【摘要】：目的:研究糞菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)對葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium,DSS)誘導的潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的作用并初步探討其作用機制。方法:將60只C57BL/6J小鼠分為6組:A組(無菌水+生理鹽水組,10只)、B組(無菌水+UC小鼠糞菌液組,10只)、C組(4%DSS溶液+生理鹽水組,10只)、D組(4%DSS溶液+正常糞菌液組,10只)、E組(4%DSS溶液+思連康組,10只)、F組(4%DSS溶液+UC小鼠糞菌液組,10只)。每日觀察各組小鼠一般情況,8天后實驗結束,進行結腸長度、脾重及疾病活動指數(shù)(DAI)大體積分,采用HE染色進行組織學損傷積分,測定結腸組織髓過氧化物酶(MPO)活性,應用熒光定量聚合酶鏈反應(Real-Time PCR)檢測糞便中腸球菌和乳酸桿菌豐度變化,流式細胞術檢測小鼠全血Th17數(shù)量,免疫組化法檢測IL-17、IL-23和RORγt在小鼠結腸組織的表達。結果:1.各組小鼠體重、結腸長度、脾重及DAI評分:與A組相比,C組小鼠體重減輕、結腸長度縮短、脾重增加,DAI評分明顯增高,均具有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05或P㩳0.01),D、E組上述指標與C組比較,均有顯著差異(P0.05或P0.01),F組與C組比較,除DAI積分外,均有顯著差異(P0.05或P0.01)。2.結腸組織學損傷及評分:B組、C組組織學損傷較A組高(P0.01),D組、E組經(jīng)治療后組織學損傷程度有所減輕,F組比C組情況更嚴重,同C組比較,均具有統(tǒng)計學意義(P0.01)。3.結腸組織髓過氧化物酶(MPO)活性:與A組相比,其B組、C組MPO均有不同程度升高(P0.01),D組、E組與C組相比,MPO水平明顯下降(P0.05),但F組顯著升高(P0.01)。4.小鼠糞便腸球菌、乳酸桿菌豐度變化:與A組相比,C組腸球菌豐度增高(P0.05),乳酸桿菌豐度降低(P0.01),E組處理小鼠的腸球菌豐度被抑制(P0.05),且D組、E組小鼠乳酸桿菌豐度較C組有所升高(P0.01)。5.全血Th17細胞:C組Th17細胞數(shù)量較A組明顯升高,D組、E組治療小鼠Th17細胞數(shù)量明顯降低,與C組比較,具有統(tǒng)計學差異(P0.01),但F組Th17細胞較C組降低(P0.05)。6.結腸組織IL-23、IL-17、RORγt表達水平:C組較A組IL-17、IL-23、RORγt表達量增高(P0.01),D組、E組三個指標表達量有所下降,同C組比較具有統(tǒng)計學意義(P0.01),F組IL-17、IL-23、RORγt表達量較C組更高(P0.05或P0.01)。結論:FMT可緩解DSS誘導的UC小鼠炎癥程度,改善其腸道菌群結構,其機制可能與調整菌群異常免疫有關,Th17細胞、IL-23/IL-17軸發(fā)揮重要作用。
【學位授予單位】：河南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R574.62;R-332
【圖文】：

圖 1 各組小鼠組織損傷情況及大體積分Fig. 1 Tissue damage and macroscopic score of mice in each group. A: Changefor body weight; B,C: Change for colon length; D: Change for spleen weight; E: Change for DAI.an±SEM (n=8). *P<0.05 vs A group, **P<0.01 vs A group, #P<0.05 vs C group, ##P<0.01 vs Cgroup.2. 各組小鼠組織學損傷及評分由圖 2A 可見，正常組的小鼠結腸黏膜結構層次清晰，上皮細胞結構基本完整，腺齊排列，富含杯狀細胞，固有層無明顯炎性細胞浸潤。B 組、C 組小鼠結腸黏膜上胞廣泛缺失，腺體不完整，炎性細胞廣泛浸潤，呈典型炎性反應改變，組織學評分 組高(P＜0.01)，且 C 組損傷程度較 B 組更嚴重，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）

圖 2 各組小鼠結腸組織 HE 染色、組織學積分ning and histopathological score. A: HE staining of mice in each group (pathological score. mean±SEM(n=8). **P<0.01 vs A group, ##P<0.01P<0.01 vs B group.鼠結腸組織 MPO 活性變化PO 活性為（0.505±0.035）U/g 蛋白，B 組、C 組分別上白、（1.451±0.129）U/g 蛋白，D 組、E 組治療后 MPO 活

圖 3 各組小鼠結腸組織 MPO 活性or each group. mean±SEM(n=8). **P<0.01 vs A grou便腸球菌、乳酸桿菌豐度變化 患者腸道菌群中變化最大的兩種細菌分別是要觀察了這兩種菌在各組的變化。Real-ti，C 組腸球菌豐度明顯升高（P＜0.05）， 組治療對腸球菌豐度有抑制作用，但無統(tǒng)計低（P＜0.01），C 組比 B 組乳酸桿菌的影變乳酸桿菌豐度（P＜0.01），且 E 組效果較 亂情況有加重的趨勢,但無統(tǒng)計學意義（P

【參考文獻】

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本文編號：2802953