【摘要】：核因子κB(NF-κB)通過調(diào)節(jié)其靶基因的轉(zhuǎn)錄,發(fā)揮多重生物學(xué)功能,不僅參與生理機(jī)能調(diào)節(jié),同時(shí)參與多種疾病病理過程的調(diào)節(jié),包括神經(jīng)退行性疾病。然而,NF-κB信號(hào)通路在朊病毒病發(fā)病機(jī)理中的作用仍不十分明確。本研究首先評(píng)估了感染朊病毒的細(xì)胞系SMB-S15中NF-κB(p65)的狀態(tài)。與正常對(duì)照細(xì)胞系SMB-PS相比,在SMB-S15細(xì)胞中p65和磷酸化形式的p65(p-p65)水平較低。在SMB-S15細(xì)胞中,NF-κB信號(hào)通路對(duì)腫瘤壞死因子(TNF-α)刺激的反應(yīng)較緩慢。清除SMB-S15細(xì)胞中PrPSc的復(fù)制,可在一定程度上恢復(fù)NF-κB的表達(dá)及活性。然而,在SMB-S15細(xì)胞中過表達(dá)p65并不影響PrPsc的復(fù)制。此外,在SMB-S15細(xì)胞的裂解物感染小鼠及朊病毒毒株263K感染倉鼠終末期的腦組織中p65水平顯著下降。通過免疫熒光方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),來自正常或朊病毒感染的動(dòng)物腦組織切片中,p65與神經(jīng)元標(biāo)志蛋白NeuN陽性細(xì)胞存在共定位,而與星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白GFAP陽性細(xì)胞幾乎無共定位現(xiàn)象。對(duì)可調(diào)節(jié)NF-κB活性的相關(guān)蛋白檢測(cè),結(jié)果顯示,SMB-S15細(xì)胞和朊病毒感染的動(dòng)物腦組織中的胞內(nèi)磷脂酰肌醇激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)含量均減少。這些數(shù)據(jù)表明在體外和體內(nèi)朊病毒感染期間,經(jīng)典NF-κB信號(hào)通路呈顯著抑制狀態(tài)。NF-κB(p65)的異常改變與細(xì)胞中PrPSc的復(fù)制和積累密切相關(guān)。小膠質(zhì)細(xì)胞激活是朊病毒病的病理特征之一,常伴隨著大量炎性因子的產(chǎn)生,如TNF-α、白介素6(IL-6)等。TNF-α不僅參與促炎癥反應(yīng),還參與細(xì)胞通訊、分化及死亡等過程。本研究初步探索了 TNF-α對(duì)阮病毒病發(fā)生發(fā)展的影響。脂多糖(LPS)激活的小膠質(zhì)細(xì)胞系BV2條件培養(yǎng)基更易造成SMB-S15細(xì)胞的損傷。該條件培養(yǎng)基中,細(xì)胞因子TNF-α含量明顯升高。此外,細(xì)胞因子TNF-α單獨(dú)作用于SMB-S15細(xì)胞同樣可導(dǎo)致其細(xì)胞活力的降低。然而,在TNF-α刺激后的SMB-S15細(xì)胞中,凋亡相關(guān)蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)及受體相互作用蛋白-1(RIP1)的剪切形式并無明顯增加,且含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-8(caspase-8)活性明顯低于SMB-PS細(xì)胞。相反,在TNF-α刺激后的SMB-S15細(xì)胞中,壞死性凋亡相關(guān)蛋白,即磷酸化的混合譜系激酶結(jié)構(gòu)域(p-MLKL)含量明顯增加。結(jié)果表明,TNF-α刺激所引起的SMB-S15細(xì)胞活性下降主要源于壞死性凋亡途徑的激活。同時(shí),清除SMB-S15細(xì)胞中PrPSc的復(fù)制后,細(xì)胞對(duì)TNF-α的耐受性得到了一定的提高。進(jìn)一步表明,壞死性凋亡的發(fā)生與細(xì)胞中PrPsc的復(fù)制和積累密切相關(guān)。朊病毒感染所引起的經(jīng)典NF-κB信號(hào)通路的顯著抑制,一定程度上增加了炎性因子對(duì)朊病毒感染細(xì)胞的損傷作用,從而加速了疾病的發(fā)生發(fā)展過程。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)疾病預(yù)防控制中心
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R373
【圖文】：

Ｆｉｇ．邋１．１邋Ｖａｒｉａｎｔｓ邋ｏｆ邋ＰＲＮＰ逡逑動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)的ＴＳＥ主要包括羊癢病（Ｓｃｒａｐｉｅ）、瘋牛病（Ｂｏｖｉｎｅ邋Ｓｐｏｎｇｉｆｏｒｍ逡逑Ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｉｅｓ，ＢＳＥ）、馬驟和麋鹿的慢性消耗性疾�。ǎ茫瑁颍铮睿椋沐澹祝幔螅簦椋睿珏澹模椋螅澹幔螅澹义希茫祝模�、可傳播性豹腦病（Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｂｌｅ邋Ｍｉｎｋ邋Ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ，邋ＴＭＥ）、貓的海逡逑綿狀腦�。ǎ疲澹欤椋睿邋澹樱穑铮睿纾椋妫铮颍礤澹牛睿悖澹穑瑁幔欤铮穑幔簦瑁�，ＦＳＥ）等［３］（表邋１．１邋）0逡逑

圖１．３朊病毒病致病機(jī)制［１８］逡逑Ｆｉｇ．邋１．３邋Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ邋ｏｆ邋ｐｒｉｏｎ邋ｄｉｓｅａｓｅ逡逑病毒具有一定的蛋白酶抗性，其對(duì)于外界滅活的抵抗能力很強(qiáng)，對(duì)煮沸、逡逑、乙醇、雙氧水、氋錳酸鉀、碘、氧乙烯蒸汽、去垢劑、有機(jī)溶劑、甲醛、逡逑線、Ｙ射線和標(biāo)準(zhǔn)的１２１°Ｃ高壓滅菌均有抗性，但可被強(qiáng)堿溶液滅活［２（）］。逡逑５逡逑

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6 林世和;張朝暉;;從瘋牛病聯(lián)想到人朊病毒病的早期發(fā)現(xiàn)和治療[J];大家健康;1996年10期

7 李瀟;;小鼠的朊病毒病可逆轉(zhuǎn)[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2008年03期

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5 張騰龍;朊病毒病相關(guān)LncRNA表達(dá)譜分析研究[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2015年

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