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新型小鼠跨區(qū)供血耳瓣模型的構(gòu)建

發(fā)布時間:2017-03-24 07:04

  本文關(guān)鍵詞:新型小鼠跨區(qū)供血耳瓣模型的構(gòu)建,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:建立一個實時活體觀察血管形態(tài)學變化小鼠跨區(qū)供血耳瓣模型,并應(yīng)用此模型研究有利于皮瓣成活的機制,為研究和促進皮瓣的成活提供理論指導。方法:取體重25~30g清潔級ICR小鼠60只,戊巴比妥鈉麻醉后將小鼠俯臥位固定于操作臺上,商業(yè)人用脫毛膏脫毛、消毒。右耳用眼科剪從尾側(cè)向頭側(cè)剪斷小鼠耳基底部尾側(cè)2/3,保留頭側(cè)1/3,形成以耳前動靜脈為蒂內(nèi)含三個血管體、二個choke區(qū)的跨區(qū)供血耳瓣。左耳為對照組,僅進行脫毛處理。選擇不同時間點進行:①形態(tài)學觀察:將小鼠側(cè)臥置于二維圖像采集系統(tǒng)的動物承載臺上,調(diào)節(jié)體視顯微鏡物鏡并固定為2.5×10倍,設(shè)置步進參數(shù),“弓”型路線漸次、局部采集圖像,合成鼠耳全景圖,觀察皮瓣的壞死率、皮瓣內(nèi)chokeⅠ、Ⅱ區(qū)血管形態(tài)學變化;②病理學觀察:切取鼠耳耳瓣,10%福爾馬林固定液固定,用蘇木精-伊紅染色,獲取病理圖片,觀察耳瓣chokeⅠ區(qū)和chokeⅡ區(qū)的病理變化。統(tǒng)計分析ChokeⅠ區(qū)和ChokeⅡ區(qū)的動靜脈血管數(shù)量與管徑、血管充盈度;③免疫組織化學觀察:利用免疫組化技術(shù),取各時間點ChokeⅠ區(qū)和ChokeⅡ區(qū)的10根血管(不分動靜脈),計算血管及血管旁50μm內(nèi)陽性標志物的累積光密度(IOD)。檢測ICAM-1、CD68、MCP-1三種炎癥調(diào)節(jié)因子的表達及含量變化情況。結(jié)果:①ICR小鼠耳有三個恒定的血管體,從內(nèi)到外依次為頭側(cè)血管體、中間血管體及尾側(cè)血管體。術(shù)后5天,耳瓣壞死面積趨于穩(wěn)定,壞死率為(15±7)%。內(nèi)側(cè)血管體與中間血管體之間的choke動靜脈的管徑出現(xiàn)快速擴增,兩者都在第10天左右達最大,choke靜脈管徑最高峰可達原來的(3.9±0.5)倍,choke動脈管徑最高峰可達原來的(3.5±0.7)倍。10天后,choke靜脈管徑開始減小,21天后逐漸平穩(wěn),而choke動脈管徑于術(shù)后10天左右開始平穩(wěn),之后無明顯減小。②動靜脈血管管壁變薄,經(jīng)t檢驗分析,實驗組與對照組差異顯著(P0.05);ChokeⅠ區(qū)血管數(shù)量隨著術(shù)后天數(shù)的增加而呈現(xiàn)上升趨勢,ChokeⅡ區(qū)血管數(shù)量變化不明顯。ChokeⅠ區(qū)動脈和靜脈血管充盈度分別在1d和3d時達到峰值;ChokeⅡ區(qū)術(shù)后即刻動靜脈血管充盈度均有所下降,隨后呈上升趨勢,7d時與對照組均值相近。③0d時在ChokeⅠ區(qū)和ChokeⅡ區(qū)ICAM-1和CD68顯著升高,而MCP-1表達水平與對照組相當。ChokeⅠ區(qū)和ChokeⅡ區(qū)MCP-1的峰值分別在3d和1d,ICAM-1的峰值分別在1d和3d,CD68的峰值分別在5d和3d。三種因子實驗組與對照組比較,其差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01),與血管管徑變化顯著相關(guān)。結(jié)論:①跨區(qū)耳瓣切取后,靜脈擴張是被動擴張,而動脈擴張是主動增值;②跨區(qū)耳瓣切取后ChokeⅡ區(qū)擴張的choke血管數(shù)量及擴張度均小于ChokeⅠ區(qū);③小鼠耳瓣模型可能成為研究血管擴張機制及遴選促皮瓣存活藥物的理想動物模型;④ICAM-1、CD68、MCP-1三種炎癥調(diào)控因子有助于血管擴張,過度炎癥對血管的影響還有待進一步研究。
【關(guān)鍵詞】:鼠耳 跨區(qū)皮瓣 choke血管 壞死
【學位授予單位】:福建醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R322;R622
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-9
  • 前言9-12
  • 材料與方法12-17
  • 1 材料12-13
  • 1.1 主要儀器12
  • 1.2 主要試劑12-13
  • 1.3 實驗動物13
  • 2 方法13-17
  • 2.1 可編程數(shù)控二維精密圖像采集系統(tǒng)的設(shè)計13-14
  • 2.2 模型建立14
  • 2.3 形態(tài)學觀察14
  • 2.4 病理學觀察14-16
  • 2.5 免疫組織化學觀察16-17
  • 3 統(tǒng)計學分析17
  • 結(jié)果17-23
  • 1 鼠耳的血管分布17-18
  • 2 耳瓣內(nèi)血管管徑變化及壞死面積18-20
  • 3 Choke區(qū)血管變化20-22
  • 3.1 Choke 區(qū)血管測量20-21
  • 3.2 血管內(nèi)紅細胞充盈程度21-22
  • 4 免疫組織化學檢測三種因子的表達情況22-23
  • 討論23-29
  • 結(jié)論29
  • 參考文獻29-32
  • 綜述32-40
  • 參考文獻36-40
  • 致謝40-41
  • 攻讀學位期間的研究成果41

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 于子瑩,張茹慧,劉春麗,朱鎮(zhèn),劉志輝;局部注射VEGF挽救大鼠背部隨意型超比例皮瓣成活的最佳注射層次的實驗性研究[J];口腔醫(yī)學研究;2002年06期

2 馮瑞錚;弓軍勝;董佳生;;穿支皮瓣微循環(huán)血流量的動態(tài)觀察及組織學研究[J];山西醫(yī)科大學學報;2009年11期

3 柴錦燕;方佩華;;抗ICAM-1單克隆抗體在治療方面的研究進展[J];細胞與分子免疫學雜志;2011年12期

4 毛以華;唐茂林;;Choke vessels與穿支皮瓣的擴展[J];中國臨床解剖學雜志;2010年02期

5 孫強;鄭永生;馬濤;翁瑞;;血管內(nèi)皮生長因子促進跨區(qū)供血反流軸型皮瓣成活的實驗研究[J];中國修復(fù)重建外科雜志;2007年01期


  本文關(guān)鍵詞:新型小鼠跨區(qū)供血耳瓣模型的構(gòu)建,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:265228

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