發(fā)布時(shí)間：2017-03-24 07:04

  本文關(guān)鍵詞：新型小鼠跨區(qū)供血耳瓣模型的構(gòu)建，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立一個(gè)實(shí)時(shí)活體觀察血管形態(tài)學(xué)變化小鼠跨區(qū)供血耳瓣模型,并應(yīng)用此模型研究有利于皮瓣成活的機(jī)制,為研究和促進(jìn)皮瓣的成活提供理論指導(dǎo)。方法:取體重25~30g清潔級ICR小鼠60只,戊巴比妥鈉麻醉后將小鼠俯臥位固定于操作臺上,商業(yè)人用脫毛膏脫毛、消毒。右耳用眼科剪從尾側(cè)向頭側(cè)剪斷小鼠耳基底部尾側(cè)2/3,保留頭側(cè)1/3,形成以耳前動(dòng)靜脈為蒂內(nèi)含三個(gè)血管體、二個(gè)choke區(qū)的跨區(qū)供血耳瓣。左耳為對照組,僅進(jìn)行脫毛處理。選擇不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行:①形態(tài)學(xué)觀察:將小鼠側(cè)臥置于二維圖像采集系統(tǒng)的動(dòng)物承載臺上,調(diào)節(jié)體視顯微鏡物鏡并固定為2.5×10倍,設(shè)置步進(jìn)參數(shù),“弓”型路線漸次、局部采集圖像,合成鼠耳全景圖,觀察皮瓣的壞死率、皮瓣內(nèi)chokeⅠ、Ⅱ區(qū)血管形態(tài)學(xué)變化;②病理學(xué)觀察:切取鼠耳耳瓣,10%福爾馬林固定液固定,用蘇木精-伊紅染色,獲取病理圖片,觀察耳瓣chokeⅠ區(qū)和chokeⅡ區(qū)的病理變化。統(tǒng)計(jì)分析ChokeⅠ區(qū)和ChokeⅡ區(qū)的動(dòng)靜脈血管數(shù)量與管徑、血管充盈度;③免疫組織化學(xué)觀察:利用免疫組化技術(shù),取各時(shí)間點(diǎn)ChokeⅠ區(qū)和ChokeⅡ區(qū)的10根血管(不分動(dòng)靜脈),計(jì)算血管及血管旁50μm內(nèi)陽性標(biāo)志物的累積光密度(IOD)。檢測ICAM-1、CD68、MCP-1三種炎癥調(diào)節(jié)因子的表達(dá)及含量變化情況。結(jié)果:①ICR小鼠耳有三個(gè)恒定的血管體,從內(nèi)到外依次為頭側(cè)血管體、中間血管體及尾側(cè)血管體。術(shù)后5天,耳瓣壞死面積趨于穩(wěn)定,壞死率為(15±7)%。內(nèi)側(cè)血管體與中間血管體之間的choke動(dòng)靜脈的管徑出現(xiàn)快速擴(kuò)增,兩者都在第10天左右達(dá)最大,choke靜脈管徑最高峰可達(dá)原來的(3.9±0.5)倍,choke動(dòng)脈管徑最高峰可達(dá)原來的(3.5±0.7)倍。10天后,choke靜脈管徑開始減小,21天后逐漸平穩(wěn),而choke動(dòng)脈管徑于術(shù)后10天左右開始平穩(wěn),之后無明顯減小。②動(dòng)靜脈血管管壁變薄,經(jīng)t檢驗(yàn)分析,實(shí)驗(yàn)組與對照組差異顯著(P0.05);ChokeⅠ區(qū)血管數(shù)量隨著術(shù)后天數(shù)的增加而呈現(xiàn)上升趨勢,ChokeⅡ區(qū)血管數(shù)量變化不明顯。ChokeⅠ區(qū)動(dòng)脈和靜脈血管充盈度分別在1d和3d時(shí)達(dá)到峰值;ChokeⅡ區(qū)術(shù)后即刻動(dòng)靜脈血管充盈度均有所下降,隨后呈上升趨勢,7d時(shí)與對照組均值相近。③0d時(shí)在ChokeⅠ區(qū)和ChokeⅡ區(qū)ICAM-1和CD68顯著升高,而MCP-1表達(dá)水平與對照組相當(dāng)。ChokeⅠ區(qū)和ChokeⅡ區(qū)MCP-1的峰值分別在3d和1d,ICAM-1的峰值分別在1d和3d,CD68的峰值分別在5d和3d。三種因子實(shí)驗(yàn)組與對照組比較,其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),與血管管徑變化顯著相關(guān)。結(jié)論:①跨區(qū)耳瓣切取后,靜脈擴(kuò)張是被動(dòng)擴(kuò)張,而動(dòng)脈擴(kuò)張是主動(dòng)增值;②跨區(qū)耳瓣切取后ChokeⅡ區(qū)擴(kuò)張的choke血管數(shù)量及擴(kuò)張度均小于ChokeⅠ區(qū);③小鼠耳瓣模型可能成為研究血管擴(kuò)張機(jī)制及遴選促皮瓣存活藥物的理想動(dòng)物模型;④ICAM-1、CD68、MCP-1三種炎癥調(diào)控因子有助于血管擴(kuò)張,過度炎癥對血管的影響還有待進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：鼠耳 跨區(qū)皮瓣 choke血管 壞死
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R322;R622
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 材料與方法12-17
• 1 材料12-13
• 1.1 主要儀器12
• 1.2 主要試劑12-13
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 2 方法13-17
• 2.1 可編程數(shù)控二維精密圖像采集系統(tǒng)的設(shè)計(jì)13-14
• 2.2 模型建立14
• 2.3 形態(tài)學(xué)觀察14
• 2.4 病理學(xué)觀察14-16
• 2.5 免疫組織化學(xué)觀察16-17
• 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析17
• 結(jié)果17-23
• 1 鼠耳的血管分布17-18
• 2 耳瓣內(nèi)血管管徑變化及壞死面積18-20
• 3 Choke區(qū)血管變化20-22
• 3.1 Choke 區(qū)血管測量20-21
• 3.2 血管內(nèi)紅細(xì)胞充盈程度21-22
• 4 免疫組織化學(xué)檢測三種因子的表達(dá)情況22-23
• 討論23-29
• 結(jié)論29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 綜述32-40
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 致謝40-41
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果41

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 于子瑩,張茹慧,劉春麗,朱鎮(zhèn),劉志輝;局部注射VEGF挽救大鼠背部隨意型超比例皮瓣成活的最佳注射層次的實(shí)驗(yàn)性研究[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2002年06期

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  本文關(guān)鍵詞：新型小鼠跨區(qū)供血耳瓣模型的構(gòu)建，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：265228