【摘要】：目的建立一種可同時(shí)檢測(cè)鼻病毒、呼吸道合胞病毒以及腺病毒的基因芯片方法。方法根據(jù)GenBank已發(fā)表的鼻病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒的基因序列,應(yīng)用生物學(xué)軟件設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物和寡核苷酸探針,構(gòu)建檢測(cè)芯片;使用巢式PCR擴(kuò)增標(biāo)記目的片段,將其與檢測(cè)基因芯片進(jìn)行雜交和掃描分析;通過(guò)特異性、靈敏性和重復(fù)性試驗(yàn)評(píng)估基因芯片方法。結(jié)果設(shè)計(jì)的全部探針均能與相應(yīng)的標(biāo)記樣品特異性雜交,其中探針1a和1b可特異檢測(cè)鼻病毒;探針2a、2b和2c可特異檢測(cè)呼吸道合胞病毒,探針3a和3b可特異檢測(cè)腺病毒�；蛐酒z測(cè)3種病毒的最低拷貝數(shù)分別是2.59×102個(gè)/μl、2.21×101個(gè)/μl和2.05×102個(gè)/μl。結(jié)論構(gòu)建的基因芯片可特異性檢測(cè)樣品中低滴度的鼻病毒、呼吸道合胞病毒以及腺病毒,有望為臨床提供確診依據(jù)。
[Abstract]:Objective to establish a gene chip method for simultaneous detection of rhinovirus, respiratory syncytial virus and adenoviruses. Methods according to the gene sequences of rhinovirus, respiratory syncytial virus and adenoviruses published by GenBank, the corresponding primers and oligodeoxynucleotides probes were designed by biological software, and the detection chip was constructed. The target fragment was amplified by nest PCR, crossed with the detection gene chip and analyzed by scanning, and the gene chip method was evaluated by specificity, sensitivity and reproducibility test. Results all the designed probes could specifically cross with the corresponding labeled samples, in which probes 1a and 1b could specifically detect rhinovirus, probe 2a, 2b and 2c could specifically detect respiratory syncytial virus, and probes 3a and 3b could specifically detect adenoviruses. The minimum copy number of the three viruses detected by gene chip method was 2.59 脳 102 / 渭 l, 2.21 脳 101 / 渭 l and 2.05 脳 102 / 渭 l, respectively. Conclusion the constructed gene chip can specifically detect low titer rhinovirus, respiratory syncytial virus and adenovirus in the sample, which is expected to provide diagnostic basis for clinical diagnosis.
【作者單位】： 吉林大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué);
【基金】：吉林省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No.20100416)
【分類號(hào)】：R373

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【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2494049