【摘要】：目的制備人Ⅱ型高爾基體膜蛋白73(Golgi protein 73,GP73)的多克隆抗體,為進一步研究GP73的功能奠定基礎。方法利用重組原核表達載體PET-32a-GP73在大腸桿菌BL21中誘導表達,利用切膠方法回收純化蛋白,并免疫新西蘭兔制備多克隆抗體。制備的抗體經(jīng)硫酸銨沉淀純化后,用ELISA法和Western blot對多克隆抗體進行效價和特異性檢測,用免疫組織化學法(IHC)檢測純化抗體在不同肝組織中識別GP73的能力。結果 GP73蛋白表達成功,并成功獲得純化的GP73蛋白及兔抗GP73多克隆抗體;ELISA法測定多克隆抗體效價16 000;Western blot證明多克隆抗體的特異性良好;IHC顯示GP73蛋白在正常肝組織中僅表達于膽管上皮細胞,而在肝癌組織中表達于肝癌細胞和膽管上皮細胞。結論成功獲得了純化的GP73蛋白及高效價的多克隆抗體,肝臟組織的IHC驗證了其良好的特異性。
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【作者單位】： 廣州醫(yī)學院檢驗系;廣州醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院病理科;
【分類號】：R392

【參考文獻】

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1 劉樹業(yè);杜智;邵新華;劉兆明;杜振華;;高爾基體蛋白73在肝癌診斷中的意義[J];廣東醫(yī)學;2010年03期

2 蔡媛媛;徐霞;;Ⅱ型高爾基體膜蛋白GP73的研究進展[J];中國實驗診斷學;2012年07期

【共引文獻】

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2 趙文革;李美玉;閆兆平;;原發(fā)性肝癌實驗室檢查進展[J];中國醫(yī)療前沿;2010年17期

3 張濤;單利;;高爾基體蛋白73與惡性腫瘤關系的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2010年22期

4 蔡媛媛;徐霞;;Ⅱ型高爾基體膜蛋白GP73的研究進展[J];中國實驗診斷學;2012年07期

5 單姍;陳虹;王樂天;;高爾基糖蛋白73在各種良性終末期肝病肝組織中的表達[J];中國組織工程研究;2012年31期

6 肖瀟;陳東風;;一種新的血清肝癌標志物——GP73[J];醫(yī)學綜述;2012年20期

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1 何玉龍;GP73和AFP對肝細胞癌診斷價值的Meta分析[D];廣西醫(yī)科大學;2012年

【二級參考文獻】

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1 劉樹業(yè);杜智;邵新華;劉兆明;杜振華;;高爾基體蛋白73在肝癌診斷中的意義[J];廣東醫(yī)學;2010年03期

2 沈錚,沈霞;甲胎蛋白及其異質體檢測的臨床應用價值[J];上海醫(yī)學檢驗雜志;2000年06期

3 殷正豐;甲胎蛋白異質體作為肝癌標志物的臨床應用[J];實用腫瘤雜志;2004年01期

4 張濤;單利;;高爾基體蛋白73與惡性腫瘤關系的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2010年22期

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2 張燕,薛耀明,郭愛林,張文敏;GST-IRS-4原核表達載體的構建、表達及抗GST-IRS4多克隆抗體的制備[J];實用醫(yī)學雜志;2005年05期

3 吳鏑,許國雙,陳香美,師鎖柱,洪權,張萍,呂揚;抗人有機陰離子轉運蛋白4多克隆抗體的制備及其在腎臟的定位研究[J];中國中西醫(yī)結合腎病雜志;2005年06期

4 孫玉寧,靳更林,李燕,壽成超;人Norpeg蛋白的原核表達及其抗體的制備[J];寧夏醫(yī)學院學報;2005年04期

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3 歐陜興;楊太成;王江濤;;抗rhANG多克隆抗體對高危人群肺癌篩檢研究[A];中華醫(yī)學會第十三屆全國放射學大會論文匯編（下冊）[C];2006年

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5 陳波;錢，

本文編號：2491938