【摘要】：目的制備人Ⅱ型高爾基體膜蛋白73(Golgi protein 73,GP73)的多克隆抗體,為進(jìn)一步研究GP73的功能奠定基礎(chǔ)。方法利用重組原核表達(dá)載體PET-32a-GP73在大腸桿菌BL21中誘導(dǎo)表達(dá),利用切膠方法回收純化蛋白,并免疫新西蘭兔制備多克隆抗體。制備的抗體經(jīng)硫酸銨沉淀純化后,用ELISA法和Western blot對多克隆抗體進(jìn)行效價(jià)和特異性檢測,用免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測純化抗體在不同肝組織中識(shí)別GP73的能力。結(jié)果 GP73蛋白表達(dá)成功,并成功獲得純化的GP73蛋白及兔抗GP73多克隆抗體;ELISA法測定多克隆抗體效價(jià)16 000;Western blot證明多克隆抗體的特異性良好;IHC顯示GP73蛋白在正常肝組織中僅表達(dá)于膽管上皮細(xì)胞,而在肝癌組織中表達(dá)于肝癌細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞。結(jié)論成功獲得了純化的GP73蛋白及高效價(jià)的多克隆抗體,肝臟組織的IHC驗(yàn)證了其良好的特異性。
[Abstract]:......
【作者單位】： 廣州醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)系;廣州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院病理科;
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2491938