【摘要】：目的探討針對(duì)乙肝病毒C基因反義鎖核酸在轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)阻斷病毒基因表達(dá)的效果。方法各實(shí)驗(yàn)組經(jīng)尾靜脈給藥后,采用real-time PCR、時(shí)間分辨免疫熒光技術(shù)、免疫組織化學(xué)法等技術(shù)分別檢測(cè)血清HBV DNA、HBeAg含量及肝細(xì)胞內(nèi)HBcAg的表達(dá)情況。結(jié)果注射鎖核酸后,對(duì)乙肝病毒核酸的復(fù)制和乙肝病毒e抗原的合成均有較強(qiáng)的抑制作用,注射后1、3和5 d,HBV DNA的平均抑制率分別19.24%、39.20%和44.47%;HBeAg的平均抑制分別為30.71%、51.14%和63.46%;小鼠肝細(xì)胞的HBcAg陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)也較對(duì)照組明顯減少。結(jié)論針對(duì)乙肝病毒C基因的反義鎖核酸在轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)能有效抑制病毒基因的復(fù)制和表達(dá),提示C基因可作核酸藥物治療的有效靶位。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of blocking the expression of HBV C gene in transgenic mice by antisense locking nucleic acid (ASODN) of hepatitis B virus C gene. Methods the levels of serum HBV DNA,HBeAg and the expression of HBcAg in hepatocytes were detected by time-resolved immunofluorescence (real-time PCR,) and immunohistochemistry (immunohistochemistry) after administration through caudal vein in each experimental group. Results the inhibition rate of HBV DNA was 19.24%, 39.20% and 44.47% respectively on the 1st, 3rd and 5th day after injection, and the inhibition rate of HBV DNA was 19.24%, 39.20% and 44.47%, respectively, and the inhibition rate of HBV DNA was 19.24%, 39.20% and 44.47% respectively at the 1st, 3rd and 5th day after injection. The average inhibition of HBeAg was 30.71%, 51.14% and 63.46%, respectively, and the number of HBcAg positive cells in mouse hepatocytes was also significantly decreased compared with the control group. Conclusion antisense locking nucleic acid targeting hepatitis B virus C gene can effectively inhibit the replication and expression of HBV gene in transgenic mice, suggesting that C gene can be used as an effective target for nucleic acid drug therapy.
【作者單位】： 右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心;暨南大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心;
【基金】：廣西壯族自治區(qū)教育廳資助項(xiàng)目(200911MS187)
【分類(lèi)號(hào)】：R373

【參考文獻(xiàn)】

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1 鄧益斌;張梁;王燕菲;;HBV S基因反義鎖核酸抑制病毒體外復(fù)制[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2010年04期

【共引文獻(xiàn)】

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1 鄧益斌;溫旺榮;;反基因鎖核酸體外抑制乙肝病毒前S_1基因表達(dá)[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年06期

2 鄧益斌;溫旺榮;;HBV preS1反基因鎖核酸的設(shè)計(jì)及體外對(duì)病毒復(fù)制的抑制[J];世界華人消化雜志;2012年22期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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1 劉素俠;孫汶生;郭春;張向紅;張艷;姜昱竹;;互補(bǔ)于hTERT關(guān)鍵區(qū)段的反義RNA抑制肝癌細(xì)胞[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2006年04期

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4 唐盈;王燕菲;;針對(duì)HBVS基因的反義鎖核酸抗乙肝病毒表達(dá)的初探[J];江西醫(yī)藥;2006年04期

5 Anneke Funk;Mouna Mhamdi;Hans Will;Hüseyin Sirma;;Avian hepatitis B viruses:Molecular and cellular biology,phylogenesis,and host tropism[J];World Journal of Gastroenterology;2007年01期

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2 成軍;劉妍;陸蔭英;李克;王琳;;乙型肝炎病毒對(duì)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響[J];世界華人消化雜志;2003年04期

3 何南祥;張秀芝;蔣自鐘;郭茂福;;人腸粘膜等勻漿對(duì)乙型肝炎抗原的抑制作用[J];浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);1979年04期

4 劉寶璋;乙型肝炎病毒的最新研究和展望[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;1980年08期

5 劉志平,施溥濤,江壽平;乙型肝炎病毒的表面抗原蛋白分子的二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)[J];科學(xué)通報(bào);1985年08期

6 方宇,武建國(guó),李芳秋,喻毅強(qiáng),張?zhí)?乳牛血清中乙型肝炎病毒樣病毒顆粒的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;1988年02期

7 ;裸鼠用于乙型肝炎病毒的體內(nèi)研究[J];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1991年03期

8 米川博通 ,王春燕 ,張新創(chuàng) ,吳曉梅;對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒敏感的轉(zhuǎn)基因小鼠的培育及其意義[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;1993年03期

9 梁耀東,成軍,吳君,程明亮;活性氧簇與肝炎病毒的關(guān)系[J];世界華人消化雜志;2004年02期

10 徐軍,何金,訾小淵,余宏宇,劉惠敏,李玉莉,胡以平;乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)基因小鼠C57-TgN(adr2.0)SMMU品系的免疫病理研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2005年02期

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4 沃健兒;侯偉;劉克洲;李敏偉;陳離偉;胡中榮;劉榮華;胡敏君;;不同結(jié)合臂長(zhǎng)10-23 DNAzymes對(duì)乙型肝炎病毒S基因和C基因表達(dá)的抑制作用[A];2005年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

5 李明;嚴(yán)阿勇;姚慧;王宇;安曉榮;陳永福;茍克勉;;利用ICSI技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因小鼠[A];中國(guó)生物工程學(xué)會(huì)第四次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2005年

6 雷宇;黎燕;王蜀強(qiáng);陳壓西;周智;任紅;;乙型肝炎病毒S基因四環(huán)素調(diào)控體系的構(gòu)建及其在真核細(xì)胞中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

7 王春花;成軍;郎振為;王欣欣;吳煜;劉妍;;乙型肝炎病毒前-X蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)和純化[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

8 楊德剛;繆曉輝;;對(duì)乙型肝炎病毒共價(jià)閉合環(huán)狀DNA的再認(rèn)識(shí)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

9 張?chǎng)?劉映霞;劉敏;位興輝;;乙型肝炎病毒X蛋白對(duì)NK細(xì)胞功能影響的體外研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

10 王春花;成軍;王欣欣;吳煜;劉妍;郎振為;;乙型肝炎病毒前-X蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)和純化[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

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1 ;我國(guó)學(xué)者成功建立一套轉(zhuǎn)基因小鼠系統(tǒng)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

2 于明山;轉(zhuǎn)基因小鼠研制成功為克隆器官提供基礎(chǔ)[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2003年

3 本報(bào)記者 李嬋;克隆豬身上發(fā)熒光[N];北京科技報(bào);2004年

4 中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所 勞為德;哺乳動(dòng)物的遺傳改造[N];科技日?qǐng)?bào);2001年

5 王鳳梅;上�；蛐∈笊硎捞矫豙N];遼寧日?qǐng)?bào);2003年

6 記者 蔣建科;軍事醫(yī)科院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究邁上新臺(tái)階[N];人民日?qǐng)?bào);2000年

7 通訊員 吳志軍　杜建國(guó);北京蛋白質(zhì)組研究中心獲三項(xiàng)新成果[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

8 郝成濤　何玉璽;流感病毒是否具有抗藥性,一測(cè)便知曉[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

9 中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所研究員 沈孝宙;關(guān)于GMO的對(duì)話[N];中國(guó)國(guó)門(mén)時(shí)報(bào)(中國(guó)出入境檢驗(yàn)疫報(bào));2001年

10 實(shí)習(xí)生 周英;轉(zhuǎn)基因如何從小鼠到人類(lèi)？[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

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1 高俊;細(xì)菌人工染色體（BAC）介導(dǎo)的人載脂蛋白apoA-Ⅰ C-Ⅲ A-Ⅳ A-Ⅴ基因簇轉(zhuǎn)基因小鼠研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2002年

2 李政;酵母人工染色體（YAC）介導(dǎo)的含HS2定點(diǎn)突變的人β-珠蛋白基因簇在轉(zhuǎn)基因小鼠中的表達(dá)[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1998年

3 馮東曉;細(xì)菌人工染色體（BAC）介導(dǎo)的人α-珠蛋白基因簇轉(zhuǎn)基因小鼠的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

4 朱化星;mRFP1報(bào)告基因表達(dá)及Gal4-UAS二元表達(dá)系統(tǒng)在小鼠中的應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

5 劉曉穎;腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)的cIAP_2蛋白抑制乙型肝炎病毒復(fù)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

6 范志強(qiáng);蚓激酶基因在山羊乳腺中的表達(dá)及轉(zhuǎn)基因小鼠的制備[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

7 李進(jìn);乙型肝炎病毒X蛋白反式調(diào)節(jié)作用的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2006年

8 劉慶輝;帶紅系增強(qiáng)子的人βE-珠蛋白基因在轉(zhuǎn)基因小鼠中的表達(dá)[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1992年

9 韋玉生;BAC介導(dǎo)ApoCⅢ增強(qiáng)子刪除的人載脂蛋白apoAⅠ/CⅢ/AⅣ/AⅤ基因簇突變株轉(zhuǎn)基因鼠系的建立以及其與完整基因簇轉(zhuǎn)基因小鼠的比較研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

10 王鵬雁;口蹄疫病毒干擾RNA轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建[D];石河子大學(xué);2008年

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1 黃潔;綠色熒光蛋白標(biāo)記的乙肝病毒全基因組真核表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)分析[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

2 張南;乙型肝炎病毒全基因組轉(zhuǎn)基因小鼠病毒蛋白表達(dá)模式的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 李明;利用ICSI技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因小鼠[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

4 李文龍;血管內(nèi)皮細(xì)胞特異表達(dá)Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

5 毛濤;抗乙型肝炎病毒C區(qū)基因的M1GS RNA核酶真核表達(dá)載體的構(gòu)建[D];青島大學(xué);2006年

6 鄭逸梅;pBC-rtTA轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立和應(yīng)用[D];揚(yáng)州大學(xué);2006年

7 楊炳春;乙型肝炎病毒突變型表面抗原在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)、純化及其免疫活性研究[D];廈門(mén)大學(xué);2008年

8 蔡蘭蘭;基于四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)的TRE-C-imp13轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建及表達(dá)分析[D];廈門(mén)大學(xué);2009年

9 竺淑佳;前腦特異性過(guò)表達(dá)VGLUT1轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建及初步表型分析[D];華東師范大學(xué);2009年

10 高學(xué)松;應(yīng)用噬菌體展示技術(shù)篩選乙型肝炎病毒核心啟動(dòng)子結(jié)合蛋白[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

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本文編號(hào)：2470766