【摘要】：目的構(gòu)建大鼠Lhx8全長結(jié)構(gòu)基因真核表達(dá)載體。方法 PCR法擴(kuò)增Lhx8全長結(jié)構(gòu)基因,經(jīng)EcoRI和BamHI雙酶切后連接至真核表達(dá)載體pEGFP-C3中,重組質(zhì)粒pEGFP-C3-Lhx8經(jīng)測序鑒定后,采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法轉(zhuǎn)染至體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)干細(xì)胞中。結(jié)果測序鑒定表明,重組質(zhì)粒pEGFP-C3-Lhx8-EGFP構(gòu)建成功,該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞后,質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組中ChAT陽性的細(xì)胞數(shù)較陰性對(duì)照組明顯增多(P0.05)。結(jié)論重組質(zhì)粒pEGFP-C3-Lhx8-EGFP構(gòu)建成功,Lhx8能夠促進(jìn)NSCs向ChAT陽性的細(xì)胞分化。
[Abstract]:Objective to construct the eukaryotic expression vector of rat Lhx8 full-length structure gene. Methods the full-length structure gene of Lhx8 was amplified by PCR and ligated into eukaryotic expression vector pEGFP-C3 by double enzyme digestion of EcoRI and BamHI. The recombinant plasmid pEGFP-C3-Lhx8 was sequenced. Liposome transfection was used to transfect neural stem cells from hippocampus in vitro. Results sequencing showed that the recombinant plasmid pEGFP-C3-Lhx8-EGFP was successfully constructed. After the recombinant plasmid was transferred into neural stem cells cultured in vitro, the number of ChAT positive cells in the plasmid transfection group was significantly higher than that in the negative control group (P0.05). Conclusion the recombinant plasmid pEGFP-C3-Lhx8-EGFP was successfully constructed and Lhx8 could promote the differentiation of NSCs into ChAT positive cells.
【作者單位】： 南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)系 江蘇省神經(jīng)再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31070937;31271138) 江蘇省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(BK2012659) 江蘇省高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目(PAPD) 江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃資助項(xiàng)目(CXZZ12-0869)
【分類號(hào)】：R329.28

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本文編號(hào)：2406893