發(fā)布時間：2018-11-12 06:50

【摘要】：目的檢測原花青素、天麻素、黃芩素和芹菜素對抗原提呈細(xì)胞RAW264.7和DC2.4的免疫刺激活性,并將免疫刺激活性最好的原花青素作為腫瘤細(xì)胞疫苗佐劑在小鼠皮下黑色素瘤模型中進(jìn)行抗腫瘤研究,為腫瘤疫苗的研發(fā)提供一種新型可供選擇的佐劑。方法體外實驗以不同種類、不同濃度的中藥單體分別刺激RAW264.7和DC2.4細(xì)胞,48 h后用抗體染色,流式細(xì)胞術(shù)檢測兩種抗原提呈細(xì)胞表面激活標(biāo)志CD80,CD86,MHC T,MHC TT分子表達(dá)量變化；動物實驗以紫外滅活的小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F10作為抗原,將腫瘤抗原與原花青素充分混合作為腫瘤細(xì)胞疫苗,采用肌肉注射的方式免疫荷瘤C57BL/6小鼠。結(jié)果體外實驗結(jié)果顯示不同種類、不同濃度的中藥單體分別刺激RAW264.7和DC2.4細(xì)胞后,兩種抗原提呈細(xì)胞表面CD80,CD86,MHC ⊥,MHC ⊥⊥分子不同程度表達(dá)上調(diào),原花青素具有較強的免疫刺激活性；動物實驗結(jié)果顯示原花青素能夠增強小鼠體內(nèi)Dc的激活,原花青素作為腫瘤細(xì)胞疫苗佐劑免疫的荷瘤小鼠腫瘤生長速度減慢并且生存期延長,腫瘤細(xì)胞疫苗能夠誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生高水平針對B16F10抗原的特異性的細(xì)胞殺傷,并且能夠激活小鼠體內(nèi)分泌高水平perforin、IFN-γ和TNF-α的CD8+T細(xì)胞；結(jié)果表明原花青素作為腫瘤細(xì)胞疫苗佐劑在小鼠黑色素瘤模型中能夠誘導(dǎo)一定的抗腫瘤效果。結(jié)論原花青素是一種具有潛在應(yīng)用價值的腫瘤細(xì)胞疫苗佐劑,本研究為原花青素作為疫苗佐劑的進(jìn)一步應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to detect the immunostimulatory activity of proanthocyanidins, gastrodin, baicalin and apigenin on antigen-presenting cells (RAW264.7 and DC2.4). Proanthocyanidins, which have the best immunostimulatory activity, were used as adjuvant of tumor cell vaccine in mouse subcutaneous melanoma model to provide a new adjuvant for the development of tumor vaccine. Methods RAW264.7 and DC2.4 cells were stimulated with different kinds and different concentrations of traditional Chinese medicine monomers in vitro. After 48 hours, antibody staining was used to detect the activation marker CD80,CD86,MHC T on the surface of the two antigen-presenting cells. The change of MHC TT expression; Mouse melanoma cell line B16F10 was used as antigen, tumor antigen and procyanidin were mixed as tumor cell vaccine, and C57BL/6 mice were immunized by intramuscular injection. Results after stimulation of RAW264.7 and DC2.4 cells with different kinds of Chinese medicine monomers and different concentrations of Chinese medicine monomer in vitro, the surface of the two antigen-presenting cells was up-regulated in different degrees, and the expression of CD80,CD86,MHC Karabakh and MHC was up-regulated in different degrees on the surface of the two antigen-presenting cells. Proanthocyanidins have strong immunostimulatory activity. The results of animal experiments showed that proanthocyanidins could enhance the activation of Dc in mice. The tumor growth rate and survival time of tumor-bearing mice immunized with proanthocyanidins as adjuvant of tumor cell vaccine were decreased and the survival time was prolonged. Tumor cell vaccine can induce high level of specific cytotoxicity against B16F10 antigen in mice and activate CD8 T cells secreting high levels of perforin,IFN- 緯 and TNF- 偽 in mice. The results showed that proanthocyanidins as adjuvant of tumor cell vaccine could induce anti-tumor effect in mouse melanoma model. Conclusion proanthocyanidin is a potential tumor cell vaccine adjuvant. This study provides a theoretical basis for the further application of proanthocyanidins as vaccine adjuvants.
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R392

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本文編號：2326363