發(fā)布時(shí)間：2018-07-17 03:50

【摘要】：目的：通過(guò)建立青年-老年大鼠腎臟交互移植模型,觀察內(nèi)環(huán)境對(duì)腎臟衰老的影響.應(yīng)用非標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法篩選與衰老顯著相關(guān)蛋白,驗(yàn)證并探討其對(duì)衰老影響的可能作用機(jī)制。方法：①通過(guò)腎臟原位切除和供腎原位移植術(shù)方法,把年輕大鼠的腎臟移植到年老大鼠,同時(shí)把年老大鼠的腎臟移植到年輕大鼠,術(shù)后體內(nèi)生長(zhǎng)6個(gè)月后,建立青年-老年大鼠腎臟交互移植模型；②觀察交互移植后腎臟病理(HE.PAS染色)、組織衰老(β-gal染色)、炎癥因子(TNF-α和IL-1p)的變化情況；③用差異蛋白質(zhì)組分析篩選參與腎臟衰老的蛋白,并在Wi38細(xì)胞進(jìn)行驗(yàn)證其參與細(xì)胞衰老的作用通路。結(jié)果：①成功建立青年-老年大鼠腎臟交互移植模型,移植后腎臟血運(yùn)正常,腎臟移植后存活；②與青年大鼠腎臟比較,移植到老年大鼠的青年腎臟HE染色、PAS染色腎臟病理無(wú)明顯改變,β-gal染色增加,炎癥因子TNF-α和IL-1p表達(dá)增加；與老年大鼠腎臟比較,移植到青年大鼠的老年腎臟HE染色、PAS染色腎臟病理無(wú)明顯改變,β-gal染色降低,炎癥因子TNF-α和IL-1p表達(dá)降低；③蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)比較腎臟移植各組的差異表達(dá)蛋白,共鑒定到了279個(gè)差異倍數(shù)2以上的差異蛋白。最終篩選出16個(gè)有與ATP能量代謝、凋亡、細(xì)胞死亡有關(guān)的蛋白質(zhì),蛋白-蛋白相互作用分析提示Sod1與多個(gè)蛋白有相互作用。與20代Wi38細(xì)胞比較：40代Wi38細(xì)胞Sod1表達(dá)降低、p16表達(dá)升高。Sod1過(guò)表達(dá)時(shí),Ac-NF-κB表達(dá)降低,細(xì)胞衰老減輕；Sod1敲除后Ac-NF-κB表達(dá)升高,細(xì)胞衰老加重。結(jié)論：1.本研究成功建立青年-老年大鼠腎臟交互移植模型,術(shù)后移植腎臟血運(yùn)好,存活率高。2.內(nèi)環(huán)境可以影響腎臟衰老狀態(tài),青年-老年大鼠腎臟交互移植模型中,內(nèi)環(huán)境可以使老年腎臟年輕化、年輕腎臟衰老化。3.通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)Sod1參與(抑制)腎臟衰老過(guò)程,通過(guò)抑制Ac-NF-κB拮抗參與衰老重要通路NF-κB通路。
[Abstract]:Aim: to observe the effect of internal environment on renal aging by establishing a model of kidney transplantation in young and aged rats. The unlabeled quantitative proteomics method was used to screen the proteins associated with senescence, and the possible mechanism of its effect on senescence was verified and discussed. Methods the kidney of the young rat was transplanted to the old rat by orthotopic nephrectomy and orthotopic transplantation of the donor kidney. At the same time, the kidney of the aged rat was transplanted to the young rat. After 6 months of operation, the kidney was transplanted to the young rat. The renal pathological changes (HE.PAS staining), tissue senescence (尾 -gal staining) and inflammatory factors (TNF- 偽 and IL-1p) were observed in the kidney of young and aged rats. The protein involved in renal senescence was screened by differential proteome analysis. The pathway involved in cell senescence was verified in Wi38 cells. Results the kidney cross-transplantation model of young and old rats was successfully established by 1: 1. The renal blood flow was normal after transplantation, and the kidney survival after transplantation was compared with that of young rats. There were no significant changes in renal pathology, 尾 -gal staining and the expression of inflammatory cytokines TNF- 偽 and IL-1p in young kidney grafted into aged rats by HE staining and pas staining. The expression of TNF- 偽 and IL-1p was decreased in the aged kidney of young rats by HE staining, pas staining, 尾 -gal staining, and the protein expression of TNF- 偽 and IL-1p. A total of 279 differentially expressed proteins were identified. Finally, 16 proteins related to ATP energy metabolism, apoptosis and cell death were screened. The protein-protein interaction analysis indicated that Sod1 interacted with many proteins. Compared with 20 generation Wi38 cells, the expression of Sod1 in Wi38 cells was decreased. The expression of p16 was increased and the expression of Ac-NF- 魏 B was decreased when Sod1 was overexpressed. The senescence of cells decreased after Sod1 knockout, and the expression of Ac-NF- 魏 B increased, and the senescence of cells increased. Conclusion 1. In this study, the model of kidney transplantation was established successfully in young and old rats. The graft blood was good after operation, and the survival rate was high. 2. The internal environment can affect the aging state of the kidney. In the model of kidney transplantation between young and aged rats, the internal environment can make the old kidney younger and the young kidney aging. 3. Through proteomics analysis, it was found that Sod1 was involved in (inhibit) renal senescence, and through inhibition of Ac-NF- 魏 B antagonism, Sod1 was involved in NF- 魏 B pathway.
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R692;R-332

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;中國(guó)生理學(xué)會(huì)腎臟生理專業(yè)委員會(huì)第二屆學(xué)術(shù)年會(huì)日程安排及征文通知(第一輪)[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2013年02期

2 ;認(rèn)識(shí)腎臟[J];人人健康;2013年03期

3 肖兵民;血管緊張素Ⅱ受體在腎臟中的分布與功能[J];醫(yī)學(xué)綜述;2001年04期

4 勞方元,劉衛(wèi)民;瘦素與腎臟[J];醫(yī)師進(jìn)修雜志;2004年17期

5 孫穎浩;高旭;;腎臟下盞結(jié)石及其處理[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;2004年05期

6 耿文學(xué),宮澤輝;血管緊張素Ⅱ受體2對(duì)心血管腎臟系統(tǒng)功能的影響[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè);2005年03期

7 郭駿,程川,鄭立泉;自發(fā)性腎臟破裂的診斷與治療(附4例報(bào)告并文獻(xiàn)復(fù)習(xí))[J];泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年04期

8 陳新石;;首個(gè)“世界腎臟日”新聞發(fā)布會(huì)在北京舉行[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2006年12期

9 賈俊亞;丁國(guó)華;;腎臟中腎素-血管緊張素系統(tǒng)的生理和病理生理作用[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2008年01期

10 李古強(qiáng);高宏偉;王召友;;適宜運(yùn)動(dòng)對(duì)老年人腎臟的影響[J];臨床合理用藥雜志;2009年14期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 王輝;徐玉蓮;;有氧及無(wú)氧訓(xùn)練對(duì)腎臟功能的影響[A];第十屆全軍檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

2 殷勝勇;葛霽光;郭淼;;灌流腎臟的生理功能動(dòng)態(tài)變化[A];中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第六次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2004年

3 殷勝勇;葛霽光;郭淼;;腎臟長(zhǎng)期灌流損傷功能的內(nèi)在機(jī)理研究[A];中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第六次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2004年

4 李慶文;汪盛;張青川;方習(xí)武;周文生;劉建民;;腹腔鏡輔助小切口技術(shù)切除無(wú)功能炎癥性腎臟[A];華東六省一市泌尿外科學(xué)術(shù)年會(huì)暨2011年浙江省泌尿外科、男科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

5 常波;衣雪潔;張錦紅;于媚娟;;急性運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠腎臟線粒體鈣運(yùn)輸?shù)挠绊慬A];2002年第9屆全國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

6 邢寶麗;;老年患者的合理用藥[A];第七屆全國(guó)老年醫(yī)學(xué)進(jìn)展學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

7 于泓;;腎臟臨床-病理討論[A];貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2008年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

8 陳以平;;腎臟間質(zhì)病變治療經(jīng)驗(yàn)[A];第七屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎臟病會(huì)議專題講座匯編[C];2003年

9 季健;馬超龍;;烏司他丁對(duì)缺血再灌注損傷大鼠腎臟ICAM-1表達(dá)的影響[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

10 宮念樵;陳知水;明長(zhǎng)生;張偉杰;周平;陳剛;林正斌;曾凡軍;盧峽;施輝波;陳松;蔣繼貧;;應(yīng)用Lifeport機(jī)械灌注冷保存腎臟供體的經(jīng)驗(yàn)[A];2013中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 慈照;你的腎臟疲倦了嗎？[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2006年

2 張鴻;中老年人腎臟檢查一年一次[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

3 項(xiàng)燕;保護(hù)腎臟從飲食做起[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

4 和煦;如何關(guān)愛自己的腎臟[N];上�？萍紙�(bào);2008年

5 徐曉羽　本報(bào)記者 張曉祺;保護(hù)腎臟從點(diǎn)滴做起[N];解放軍報(bào);2009年

6 ;老年人保護(hù)腎臟五要點(diǎn)[N];人民政協(xié)報(bào);2001年

7 韓紹安;腎臟在呼救 你注意到了嗎[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2007年

8 譚合欽;關(guān)愛您的腎臟[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2007年

9 ;人到老年腎臟有何改變[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2008年

10 許陵?yáng)| 江蘇省中醫(yī)院腎內(nèi)科;善待你的腎臟[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 梁亮;何學(xué)紅教授學(xué)術(shù)思想總結(jié)及腎衰方治療慢性腎臟病的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 韋榮飛;泛素連接酶NEDL2的生理功能及分子機(jī)制研究[D];清華大學(xué);2015年

3 李典耕;青—老年大鼠腎臟交互移植模型的構(gòu)建及機(jī)體內(nèi)環(huán)境衰老關(guān)鍵因子的研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年

4 陳福坤;犬腎臟損害對(duì)房顫凝血及內(nèi)皮功能的影響[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年

5 賈露露;利用蛋白質(zhì)組學(xué)研究腎臟蛋白處理功能[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

6 丁瑞;青年和老年大鼠腎臟互相移植引起的內(nèi)環(huán)境改變對(duì)腎臟衰老的影響[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

7 梁卓;腎臟損害和房顫發(fā)生的相關(guān)性和機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

8 石瑩;尾加壓素Ⅱ在自發(fā)性高血壓大鼠心血管系統(tǒng)和腎臟的表達(dá)及對(duì)其腎臟功能的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

9 藍(lán)榮培;金屬硫蛋白保護(hù)腎臟缺血/再灌注損傷及對(duì)免疫系統(tǒng)的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

10 唐鐵龍;缺血后適應(yīng)對(duì)大鼠腎臟熱缺血再灌注早期損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D];四川大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 梁慧;大鼠腎臟缺血再灌注損傷過(guò)程中水通道蛋白-2的表達(dá)變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 汪鳳媛;日糧中添加亞硒酸鈉對(duì)黃曲霉素B_1中毒雛雞腎臟影響的病理學(xué)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 顏帆;Angiopoietin-1聯(lián)用L-mimosine對(duì)糖尿病大鼠腎臟缺氧及相關(guān)因子的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

4 梁雯麗;CT校正腎臟深度、感興趣區(qū)和深度與感興趣區(qū)對(duì)腎積水患者GFR的影響研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

5 陳雁;Nrf2信號(hào)通路在葡萄籽原花青素降低鉛誘導(dǎo)的大鼠腎臟氧化應(yīng)激中的作用[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

6 邵川;慢性間歇低氧及再氧合對(duì)腎臟損害的機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

7 張智宇;CT測(cè)量腎臟相關(guān)橫及徑與腎臟功能的相關(guān)性研究[D];山東大學(xué);2011年

8 王繼偉;寒冷高鹽致大鼠主動(dòng)脈及腎臟損害[D];南昌大學(xué);2010年

9 黃群英;自發(fā)性高血壓大鼠腎臟ACE2蛋白和mRNA的表達(dá)[D];福建醫(yī)科大學(xué);2004年

10 江勵(lì)華;中藥對(duì)鎘致腎臟慢性損傷的保護(hù)作用的理論及實(shí)驗(yàn)研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2005年

，

本文編號(hào)：2128875