【摘要】：目的探討切割穹隆海馬傘的側海馬提取液"激活"的星形膠質細胞分泌聚集素蛋白(CLU)及體外CLU誘導海馬神經(jīng)干細胞分化為神經(jīng)元的情況。方法分別用切割穹隆海馬傘的海馬提取液、正常海馬提取液、DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng)星形膠質細胞,制備切割12h、24h、48h組,正常組和對照組條件培養(yǎng)基;ELISA檢測比較不同條件培養(yǎng)基中CLU蛋白的濃度;體外細胞培養(yǎng)采用CLU誘導海馬神經(jīng)干細胞分化,設誘導組和空白對照組,7d后通過微管相關蛋白2(MAP-2)免疫熒光及Hoechst標記觀察海馬神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元的分化情況。結果正常組和對照組條件培養(yǎng)基中CLU濃度較低,約為(0.1037±0.0119)ng/L和(0.1170±0.0078)ng/L;切割組12h、24h、48h條件培養(yǎng)基中其濃度明顯增高,分別為(0.1940±0.0364)ng/L、(0.4250±0.0724)ng/L和(0.2903±0.0472)ng/L,以24h組最高,約為正常組和對照組的4倍。CLU誘導組中MAP-2陽性細胞數(shù)明顯高于空白對照組(P0.05),其占總細胞數(shù)的百分比分別為(11.67±2.57)%和(4.52±1.54)%,且誘導組中MAP-2陽性細胞突起更長、更豐富。結論切割穹隆海馬傘側海馬提取液"激活"的星形膠質細胞可分泌更多的CLU,體外細胞培養(yǎng)中CLU可促進海馬神經(jīng)干細胞向成熟的神經(jīng)元分化。
[Abstract]:Objective to investigate the "activation" of astrocytes secreting aggregin protein (CLU) from the lateral hippocampal extract of the fimbria fornix and the differentiation of neural stem cells into neurons induced by CLU in vitro. Methods astrocytes were cultured in DMEM / F12 medium with the hippocampal extract cut from the fimbria fornix, and cultured in the normal hippocampal extract DMEM / F12 medium. The concentration of CLU protein in different conditioned media was detected by Elisa in normal group and control group, and the differentiation of neural stem cells in hippocampus was induced by CLU in vitro. The differentiation of hippocampal neural stem cells into neurons was observed by microtubule-associated protein 2 (MAP-2) immunofluorescence and Hoechst labeling after 7 days in induction group and blank control group. Results the concentrations of CLU in conditioned medium of normal group and control group were (0.1037 鹵0.0119) ng / L and (0.1170 鹵0.0078) ng / L, respectively, and the concentration of CLU in conditioned medium of 12h and 24h / 48h was (0.1940 鹵0.0364) ng / L, (0.4250 鹵0.0724) ngP / L and (0.2903 鹵0.0472) ng / L, respectively, the highest was in 24 h group, and the highest in 24 h group, (0.4250 鹵0.0724) ng / L and (0.2903 鹵0.0472) ng / L, respectively. The number of MAP-2 positive cells in CLU induced group was significantly higher than that in blank control group (P0.05), and the percentage of MAP-2 positive cells in the total cells was (11.67 鹵2.57)% and (4.52 鹵1.54), respectively. Conclusion the astrocytes "activated" in the hippocampal extract of fimbria incised fornix can secrete more CLU, and CLU can promote the differentiation of hippocampal neural stem cells into mature neurons in vitro.
【作者單位】： 南通大學醫(yī)學院人體解剖學系 江蘇省神經(jīng)再生重點實驗室;
【基金】：江蘇省高校自然科學研究項目(10KJD180002) 江蘇省高校優(yōu)勢學科建設工程資助項目(PAPD)
【分類號】：R329

【參考文獻】

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本文編號：2120140