利用原位分子雜交結(jié)合酪酰胺放大檢驗(yàn)軍團(tuán)菌性肺炎組織嗜肺軍團(tuán)菌的研究
本文選題:嗜肺軍團(tuán)菌 + 肺炎 ; 參考:《現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)》2013年10期
【摘要】:目的利用針對(duì)嗜肺軍團(tuán)菌種特異性16SrRNA和軍團(tuán)菌致病基因—巨噬感染增強(qiáng)因子(mip)序列探針原位分子雜交結(jié)合酪酰胺放大技術(shù)(Tyramide signal amplification method,TSA)建立軍團(tuán)菌性肺炎組織中嗜肺軍團(tuán)菌的快速、特異性檢驗(yàn)方法。方法設(shè)計(jì)特異性針對(duì)嗜肺軍團(tuán)菌種特異性16SrRNA、mip序列探針,分別采用熒光、地高辛標(biāo)記探針對(duì)嗜肺軍團(tuán)菌性豚鼠肺炎模型支氣管肺泡灌洗液、肺組織進(jìn)行原位雜交結(jié)合TSA檢驗(yàn)嗜肺軍團(tuán)菌。結(jié)果熒光原位雜交顯示支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞中存在16SrRNA、mip序列雙雜交陽(yáng)性桿狀細(xì)菌;地高辛標(biāo)記原位雜交結(jié)合TSA顯示肺組織中也存在雜交陽(yáng)性桿狀細(xì)菌,分布于肺泡壁與細(xì)胞內(nèi),整個(gè)檢驗(yàn)周期小于24h。結(jié)論結(jié)果表明采用熒光、地高辛標(biāo)記探針結(jié)合TSA的原位雜交能迅速準(zhǔn)確靈敏檢驗(yàn)出肺組織、支氣管肺泡灌洗液中的嗜肺軍團(tuán)菌,是一種快速、特異性檢驗(yàn)方法。
[Abstract]:Objective to establish the rapid development of Legionella pneumophila in Legionella pneumoniae by in situ hybridization with in situ hybridization and tyramide signal amplification technique using 16s rRNA specific to Legionella pneumophila and (mip) probe of Legionella pathogenicity gene-macrophage infection enhancer. Specificity test method. Methods A specific 16s rRNA mip sequence probe was designed for Legionella pneumophila strain. Fluorescent and digoxin labeled probes were used to treat bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of Legionella pneumophila pneumonia model in guinea pigs. In situ hybridization and TSA were performed to detect Legionella pneumophila in lung tissue. Results fluorescence in situ hybridization showed that there were 16s rRNA mip positive rod bacteria in bronchoalveolar lavage fluid cells, digoxigenin-labeled in situ hybridization combined with TSA showed that there were hybridization positive rod-like bacteria in lung tissue, which distributed in alveolar wall and cell. The whole inspection period is less than 24 h. Conclusion fluorescence, digoxigenin labeled probe and in situ hybridization with TSA can quickly, accurately and sensitively detect Legionella pneumophila in lung tissue and bronchoalveolar lavage fluid. It is a rapid and specific method for detection of Legionella pneumophila in bronchoalveolar lavage fluid.
【作者單位】: 西安市疾病預(yù)防控制中心;
【基金】:陜西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2006C223) 西安市支撐計(jì)劃資助項(xiàng)目(YF07154)
【分類(lèi)號(hào)】:R378
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本文編號(hào):2073395
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