本文選題：副溶血性弧菌 + 分子馬達　； 參考：《微生物學(xué)通報》2013年07期

【摘要】：【目的】建立基于分子馬達技術(shù)的簡便快速的分子分型方法,對攜帶和非攜帶毒力基因的副溶血性弧菌進行快速分類�！痉椒ā恳訤0F1-ATPase為核心構(gòu)建分子馬達,以副溶血性弧菌毒力基因tdh、trh和種特異性基因tlh、toxR為靶基因設(shè)計4個探針。通過生物素-親和素系統(tǒng)將探針與分子馬達連接構(gòu)建F0F1-ATPase分子馬達生物傳感器,對10株副溶血性弧菌分離株進行分類,并與PCR-電泳-凝膠成像結(jié)果進行比較;同時對生物傳感器的檢測靈敏度和特異性進行研究�！窘Y(jié)果】10株試驗菌株中10株tdh陽性,0株trh陽性,而10株菌都攜帶tlh和toxR,與PCR-電泳-凝膠成像結(jié)果一致;分子馬達生物傳感器的最低檢測限為1 pg/反應(yīng)體系,且能夠?qū)Ω比苎曰【禺愋宰R別,PCR-電泳-凝膠成像方法的最低檢測限為10 pg/PCR反應(yīng)體系�！窘Y(jié)論】建立了基于分子馬達的分子分型方法,能夠?qū)Ω比苎曰【闹虏⌒赃M行快速診斷,檢測靈敏度比PCR-電泳-凝膠成像方法高了10倍,而且特異性非常高。該方法簡便、快速、省時、省力,適用于地方疾控部門和口岸檢疫部門的基層實驗室開展副溶血性弧菌監(jiān)測和流行病學(xué)溯源工作。
[Abstract]:[objective] to establish a simple and rapid molecular typing method based on molecular motor technology, and to classify virulent and non-virulent Vibrio parahaemolyticus rapidly. [methods] A molecular motor was constructed with F0F1-ATPase as the core. Four probes were designed using virulence gene of Vibrio parahaemolyticus tdhtrh and species-specific gene tlhfthotoxin R as target genes. F0F1-ATPase molecular motor biosensor was constructed by connecting the probe with molecular motor by biotin-avidin system. Ten Vibrio parahaemolyticus isolates were classified and compared with PCR-electrophoretic gel imaging results. At the same time, the sensitivity and specificity of biosensors were studied. [results] 10 of the 10 strains were tdh positive and 0 were trh positive, while all 10 strains were carrying tlh and toxr, which were consistent with the results of PCR-electrophoresis gel imaging. The minimum detection limit of molecular motor biosensor is 1 pg/ reaction system. The detection limit of PCR- electrophoresis gel imaging method for vibrio parahaemolyticus was 10 PG / PCR reaction system. [conclusion] Molecular typing method based on molecular motor was established. The detection sensitivity of Vibrio parahaemolyticus was 10 times higher than that of PCR- electrophoretic gel imaging, and the specificity was very high. The method is simple, rapid, time-saving and labor-saving. It is suitable for monitoring Vibrio parahaemolyticus and tracing the epidemiology of Vibrio parahaemolyticus in the basic laboratories of local disease control department and port quarantine department.
【作者單位】： 北京出入境檢驗檢疫局;威海出入境檢驗檢疫局;中國合格評定國家認可中心;中國科學(xué)院生物物理研究所;
【基金】：國家質(zhì)檢總局科技計劃項目(No.2011IK191,2012IK179)
【分類號】：R378

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：2066976