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登革2型病毒體外誘導(dǎo)Ana-1巨噬細(xì)胞極化及其TLR7表達(dá)的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-16 21:24

  本文選題:登革型病毒 + 巨噬細(xì)胞 ; 參考:《中國(guó)免疫學(xué)雜志》2013年07期


【摘要】:目的:研究登革2型病毒體外誘導(dǎo)Ana-1細(xì)胞極化及TLR7表達(dá)情況,分析其在登革病毒致病過(guò)程中的可能作用。方法:用DEN2感染Ana-1細(xì)胞,24、72、120小時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測(cè)病毒核酸、iNOS、Arg-1、IL-10、IL-12p40 mRNA;Western blot檢測(cè)iNOS、Arg-1、TLR7蛋白;雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)TNF-α水平。結(jié)果:巨噬細(xì)胞被DEN2感染后病毒核酸在72小時(shí)達(dá)峰值,2-ΔΔCt值為159.98±37.80;iNOS mRNA及蛋白表達(dá)明顯上升(P0.05),IL-12p40 mRNA、TNF-α水平顯著升高(P0.05),72小時(shí)達(dá)峰值;IL-12p40 mRNA 2-ΔΔCt值為11.1±2.41,TNF-α濃度為(454.72±13.41)pg/ml。Arg-1 mRNA及蛋白較M2型極化對(duì)照組降低(P0.05);IL-10 mRNA與正常對(duì)照組無(wú)顯著差異(P0.05);TLR7表達(dá)低于同期正常對(duì)照組。結(jié)論:Ana-1細(xì)胞被DEN2感染后向M1型極化;DEN2可下調(diào)Ana-1細(xì)胞TLR7表達(dá),可能是DEN2發(fā)生免疫逃逸的機(jī)制之一;Ana-1細(xì)胞TNF-α水平與細(xì)胞內(nèi)DEN2核酸呈正相關(guān)。
[Abstract]:Aim: to study the polarization and expression of TLR7 in Ana-1 cells induced by dengue 2 virus in vitro and to analyze its possible role in the pathogenesis of dengue virus. Methods: Ana-1 cells infected with DEN2 for 24 ~ 72120 hours were used to detect the level of TNF- 偽 by double antibody sandwich Elisa. The viral nucleic acid (iNOSN) Arg-1 IL-10 IL-12p40 mRNA-Western blot was used to detect the level of TLR7 protein in Ana-1 cells infected with DEN2, and the double antibody sandwich Elisa was used to detect the level of TNF- 偽. Results: the expression of iNOS mRNA and protein in macrophages reached a peak value at 72 hours after infection with DEN2. The expression of iNOS mRNA and protein was 159.98 鹵37.80 mRNAs. The level of IL-12p40 mRNA-TNF- 偽 in macrophages was significantly higher than that of M2 type. The level of IL-12p40 mRNA 2- 螖 Ct was 11.1 鹵2.41TNF- 偽 in macrophages at 72 hours. The level of IL-12p40 mRNA and protein in macrophages was significantly higher than that in M2 type. There was no significant difference between the control group and the normal control group in the expression of IL-10 mRNA. The expression of TLR7 in the control group was lower than that in the control group. Conclusion the expression of TLR7 in Ana-1 cells can be down-regulated after infection by DEN2, which may be one of the mechanisms of immune escape of DEN2. TNF- 偽 level of Ana-1 cells is positively correlated with the intracellular DEN2 nucleic acid.
【作者單位】: 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.31060129) 貴州省優(yōu)秀人才省長(zhǎng)基金 貴州省教育廳“125”重大科技專項(xiàng) 貴州省社會(huì)發(fā)展合作專項(xiàng)資金項(xiàng)目(黔科合〔2010〕3155)資助
【分類號(hào)】:R392.12

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2028159

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