本文選題：HaCaT細(xì)胞 + TOLL樣受體　； 參考：《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2013年08期

【摘要】：目的探討TOLL樣受體7(TLR7)的激活對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖與分化的影響及其可能的機(jī)制。方法培養(yǎng)HaCaT細(xì)胞,以不同劑量的TLR7配體Gardiquimod經(jīng)不同的時(shí)間體外刺激HaCaT細(xì)胞,MTT及流式細(xì)胞術(shù)分析TLR7的激活對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的影響。以不同劑量的TLR7配體Gardiquimod經(jīng)不同的時(shí)間體外刺激HaCaT細(xì)胞,加入氯化鈣誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞分化,Western blot分析HaCaT細(xì)胞的分化Markers(顆粒層:Keratin1,基底層:Keratin5和棘層:Involucrin)并以此分析TLR7的激活對(duì)氯化鈣誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞分化的影響。Western blot分析TLR7在HaCaT細(xì)胞中激活的信號(hào)通路PI3K-AKT和RAS-MAPK等。在TLR7配體Gardiquimod處理HaCaT細(xì)胞前1 h,分別加入特異性阻斷劑(PD98059及LY2940002)阻斷TLR7配體Gardiquimod激活的相關(guān)信號(hào)通路,然后分析阻斷劑對(duì)TLR7配體Gardiquimod調(diào)控HaCaT細(xì)胞增殖及分化影響,從而探討PI3K-AKT和RAS-MAPK信號(hào)通路在TLR7配體Gardiquimod對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖及分化調(diào)控中的作用。結(jié)果 MTT及流式細(xì)胞分析結(jié)果顯示:TLR7配體Gardiquimod促進(jìn)HaCaT細(xì)胞增殖,且具有時(shí)間及劑量依賴性;TLR7配體Gardiquimod能夠抑制氯化鈣誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞分化Markers(Keratin1及Involucrin)的表達(dá),存在時(shí)間效應(yīng)及劑量效應(yīng);信號(hào)通路分析揭示TLR7配體Gardiquimod能夠增加ERK1/2和MAPK的水平;阻斷劑的研究發(fā)現(xiàn)TLR7配體Gardiquimod部分依賴PI3K-AKT和RAS-MAPK途徑發(fā)揮其促進(jìn)增殖及抑制分化作用。結(jié)論 TLR7配體Gardiquimod部分依賴PI3K-AKT和RAS-MAPK途徑發(fā)揮其促進(jìn)增殖及抑制分化作用。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of TLR7 ligand Gardiquimod on the proliferation and differentiation of HaCaT cells . The effect of TLR7 ligand Gardiquimod on the proliferation and differentiation of HaCaT cells was investigated .
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【分類號(hào)】：R341

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本文編號(hào)：2027166