miRNA-144靶向調(diào)節(jié)鈣粘蛋白11對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的抑制效應(yīng)
本文選題:miRNA- + 鈣粘蛋白; 參考:《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2013年10期
【摘要】:目的證實(shí)miRNA-144靶向調(diào)節(jié)鈣粘蛋白11(Cad-11)表達(dá),抑制間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSCs)的成骨分化。方法通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)對(duì)Cad-11與miRNA-144的靶基因關(guān)系進(jìn)行鑒定;將pre-miR-144及anti-miR-144分別轉(zhuǎn)染MSCs,成骨誘導(dǎo)7、14 d后,實(shí)時(shí)定量PCR和蛋白印跡方法檢測(cè)細(xì)胞中Cad-11及成骨標(biāo)志物Runx2、ALP的表達(dá)情況,分析其與MSCs成骨分化的變化關(guān)系。黏附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miRNA-144對(duì)MSCs成骨分化過(guò)程中黏附的影響。結(jié)果 Cad-11是miRNA-144的靶基因;miRNA-144在成骨誘導(dǎo)第7、14天可明顯抑制Cad-11、Runx2和ALP的表達(dá)(P0.05),同時(shí)降低MSCs的黏附性。結(jié)論 miRNA-144通過(guò)抑制Cad-11的表達(dá)對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化起負(fù)向調(diào)控的作用。
[Abstract]:Objective to demonstrate that miRNA-144 can inhibit the osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells by regulating the expression of cadherin 11 (cadherin). Methods the target gene relationship between Cad-11 and miRNA-144 was identified by double luciferase reporting system, pre-miR-144 and anti-miR-144 were transfected into MSCs, and the expression of Cad-11 and the osteoblastic marker Runx2 were detected by real-time quantitative PCR and Western blotting after 714 days of osteogenesis induction. To analyze the relationship between MSCs and osteogenic differentiation. The effect of miRNA-144 on the adhesion of MSCs during osteogenic differentiation was detected by adhesion experiment. Results Cad-11 was the target gene of miRNA-144, miRNA-144 could significantly inhibit the expression of Cad-11G Runx2 and ALP on the 714th day of osteogenesis, and decrease the adhesion of MSCs. Conclusion miRNA-144 plays a negative role in the osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells by inhibiting the expression of Cad-11.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部人體解剖學(xué)教研室 重慶市生物力學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;成都軍區(qū)總醫(yī)院骨科;
【基金】:國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃,2011CB964701) 國(guó)家自然科學(xué)基金(30872636,81271980)~~
【分類號(hào)】:R329
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,本文編號(hào):1985881
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