miRNA-144靶向調(diào)節(jié)鈣粘蛋白11對間充質(zhì)干細胞成骨分化的抑制效應
本文選題:miRNA- + 鈣粘蛋白 ; 參考:《第三軍醫(yī)大學學報》2013年10期
【摘要】:目的證實miRNA-144靶向調(diào)節(jié)鈣粘蛋白11(Cad-11)表達,抑制間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cell,MSCs)的成骨分化。方法通過雙熒光素酶報告系統(tǒng)對Cad-11與miRNA-144的靶基因關(guān)系進行鑒定;將pre-miR-144及anti-miR-144分別轉(zhuǎn)染MSCs,成骨誘導7、14 d后,實時定量PCR和蛋白印跡方法檢測細胞中Cad-11及成骨標志物Runx2、ALP的表達情況,分析其與MSCs成骨分化的變化關(guān)系。黏附實驗檢測miRNA-144對MSCs成骨分化過程中黏附的影響。結(jié)果 Cad-11是miRNA-144的靶基因;miRNA-144在成骨誘導第7、14天可明顯抑制Cad-11、Runx2和ALP的表達(P0.05),同時降低MSCs的黏附性。結(jié)論 miRNA-144通過抑制Cad-11的表達對間充質(zhì)干細胞的成骨分化起負向調(diào)控的作用。
[Abstract]:Objective to demonstrate that miRNA-144 can inhibit the osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells by regulating the expression of cadherin 11 (cadherin). Methods the target gene relationship between Cad-11 and miRNA-144 was identified by double luciferase reporting system, pre-miR-144 and anti-miR-144 were transfected into MSCs, and the expression of Cad-11 and the osteoblastic marker Runx2 were detected by real-time quantitative PCR and Western blotting after 714 days of osteogenesis induction. To analyze the relationship between MSCs and osteogenic differentiation. The effect of miRNA-144 on the adhesion of MSCs during osteogenic differentiation was detected by adhesion experiment. Results Cad-11 was the target gene of miRNA-144, miRNA-144 could significantly inhibit the expression of Cad-11G Runx2 and ALP on the 714th day of osteogenesis, and decrease the adhesion of MSCs. Conclusion miRNA-144 plays a negative role in the osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells by inhibiting the expression of Cad-11.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學基礎(chǔ)醫(yī)學部人體解剖學教研室 重慶市生物力學重點實驗室;成都軍區(qū)總醫(yī)院骨科;
【基金】:國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973計劃,2011CB964701) 國家自然科學基金(30872636,81271980)~~
【分類號】:R329
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,本文編號:1985881
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