本文選題：VSTM-v細胞因子 + 鼠源VH-CDR　； 參考：《藥學(xué)學(xué)報》2013年11期

【摘要】：本文將鼠源VH-CDR3庫(library of murine VH-CDR3)移植到特定的人源scFv(single-chain antibody fragment)VH3-VΚ1框架構(gòu)建人源化scFv文庫,快速篩選抗VSTM1-v2的人源化單鏈抗體。以抗VSTM1-v2鼠源cDNA為模板,擴增出鼠源VH-CDR3庫,隨后將鼠源VH-CDR3庫移植到人源scFv(VH3-VΚ1)上并通過核糖體展示富集抗VSTM1-v2人源化scFv文庫,該文庫序列通過與原核基因表達調(diào)控等成分(N端添加T7啟動子、SD序列和PelB序列、C端添加his標簽序列和T7 terminal序列)拼接,構(gòu)建表達型TA載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)進行可溶性表達。最終構(gòu)建了一個庫容達1012的人源化單鏈抗體文庫,完成了1 000個克隆的初步鑒定,并篩選出EC50達21.35 nmol·L 1的抗VSTM1-v2人源化scFv。該研究結(jié)果,一方面獲得了具有潛在應(yīng)用價值的抗-VSTM1-v2先導(dǎo)抗體;另一方面,為快速獲得人源化抗體提供了一個新技術(shù)途徑。
[Abstract]:In this paper, the mouse source VH-CDR3 Library (Library of murine VH-CDR3) is transplanted to a specific human source scFv (single-chain antibody fragment) VH3-V scFv 1 frame architecture humanized scFv library. The source scFv (VH3-V 1) was enriched by ribosome display and enriched in the scFv Library of anti VSTM1-v2 human origin. The library sequence was spliced by N terminal T7 promoter, SD sequence and PelB sequence, C terminal adding his label sequence and T7 terminal sequence. Finally, a human derived single chain antibody library of 1012 was constructed, and the preliminary identification of 1000 clones was completed, and the results of the anti VSTM1-v2 human scFv. EC50 up to 21.35 nmol. L 1 were screened out. On the one hand, the anti -VSTM1-v2 precursor antibody with potential application value was obtained; on the other hand, the rapid human origin was obtained. Antibodies provide a new way of technology.
【作者單位】： 四川抗菌素工業(yè)研究所;成都生物制品研究所有限責(zé)任公司;
【基金】：國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項資助項目(2011ZX09506-005) 中國醫(yī)藥集團新產(chǎn)品基金項目(2011SW12-1)
【分類號】：R392.1

【共引文獻】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 王耘;兩種Bt毒素單鏈抗體制備與抗體檢測技術(shù)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 陳宇;抗體可變區(qū)穩(wěn)定性評價模式的建立及初步應(yīng)用[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2013年

2 韓迎莉;利用噬菌體展示技術(shù)制備全人抗DR5 scFv抗體[D];河南大學(xué);2013年

3 張曉霞;抗亞洲I型口蹄疫病毒單鏈抗體的表達與純化[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

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本文編號：1908853