本文選題：天然免疫抗病毒信號(hào) + RIG-I樣模式識(shí)別受體�。� 參考：《中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：天然免疫抗病毒信號(hào)活化是機(jī)體免疫系統(tǒng)抵抗外界病毒感染的第一道防線,而RIG-I樣模式識(shí)別受體所調(diào)控的抗病毒信號(hào)活化是天然免疫抗病毒系統(tǒng)中非常重要的一個(gè)組成部分。RIG-I樣模式識(shí)別受體能夠特異性地感知RNA病毒的入侵,活化下游信號(hào)通路,誘導(dǎo)Ⅰ型干擾素及其他細(xì)胞因子的產(chǎn)生,誘發(fā)機(jī)體對(duì)病毒實(shí)施有效的抵抗。RIG-I樣模式識(shí)別受體家族主要有三個(gè)成員,分別是RIG-I、MDA-5以及LGP2。其中RIG-I和MDA-5分另能夠特異性地識(shí)別不同種類(lèi)的RNA病毒,而LGP2主要是針對(duì)RIG-I和MDA-5的活化過(guò)程起到調(diào)控作用。RIG-I或MDA-5功能的缺失會(huì)使得機(jī)體不能夠有效抵抗RNA病毒的感染,導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)多種病癥甚至死亡。而二者功能的過(guò)度活化同樣會(huì)導(dǎo)致機(jī)體穩(wěn)態(tài)的失衡,出現(xiàn)一系列自身免疫性疾病,如紅斑狼瘡�？梢�(jiàn)R1G-I和MDA-5功能的正常發(fā)揮對(duì)于機(jī)體抵抗RNA病毒以及穩(wěn)態(tài)的維持是不可或缺的。目前,對(duì)于RIG-I信號(hào)活化機(jī)制的探究相對(duì)較為清楚,但是對(duì)于MDA-5是如何被活化的目前的研究還知之甚少。目前已知MDA-5與RIG-I相似也會(huì)被PP1介導(dǎo)發(fā)生磷酸化修飾,而其他修飾類(lèi)型是否在其中也起著重要的作用目前仍是未知的。尤其是在RIG-I的活化過(guò)程中起著關(guān)鍵作用的泛素化修飾,是否在MDA-5活化過(guò)程中也起著至關(guān)重要的作用,以及有哪些泛素連接酶參與到其中目前還不清楚。基于以上原因,本文以前人的研究為基礎(chǔ),針對(duì)RNA活化MDA-5的分子機(jī)制展開(kāi)了一系列探討。在本文的研究中,我們利用免疫共沉淀及質(zhì)譜分析的方法篩選到與MDA-5可能存在相互作用的蛋白。在眾多篩選到的蛋白中,我們發(fā)現(xiàn),一種E3泛素連接酶—TR1M65,與MDA-5存在著非常強(qiáng)的相互作用。后續(xù)的一系列實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了這一相互作用的存在。為了探究二者的相互作用對(duì)于MDA-5信號(hào)活化的作用,我們構(gòu)建了Trim65缺陷小鼠,并利用MDA-5信號(hào)特異性活化劑處理缺陷鼠以及缺陷鼠來(lái)源的細(xì)胞。結(jié)果發(fā)現(xiàn),TRIM65表達(dá)缺失后,MDA-5抗病毒信號(hào)通路的活化受到了極大程度的抑制。在人源細(xì)胞中我們也得到了類(lèi)似的結(jié)果。機(jī)制方面,我們發(fā)現(xiàn)TRIM65能夠利用其自身的E3泛素連接酶的活性誘導(dǎo)MDA-5的743位賴(lài)氨酸發(fā)生K63連接方式的泛素化。進(jìn)一步我們利用SDD-AGE以及激光共聚焦技術(shù),發(fā)現(xiàn)了 TRIM65對(duì)MDA-5泛素化的誘導(dǎo)能夠顯著促進(jìn)MDA-5寡聚體的形成,而MDA-5寡聚體的形成是MDA-5抗病毒信號(hào)活化的關(guān)鍵步驟。通過(guò)以上研究,我們不僅發(fā)現(xiàn)了 TRIM65是MDA-5信號(hào)活化過(guò)程中的一個(gè)關(guān)鍵組分,同時(shí)還證實(shí)了泛素化調(diào)控對(duì)于MDA-5寡聚化以及活化都是至關(guān)重要的,并且還為MDA-5相關(guān)疾病的治療找到了新的關(guān)鍵靶點(diǎn)。
[Abstract]:The activation of innate antiviral signals is the first line of defense of the body's immune system against external virus infection. The activation of antiviral signal regulated by RIG-I like pattern recognition receptor is a very important part of innate immune antiviral system. RIG-I pattern recognition receptor can specifically perceive the invasion of RNA virus and activate downstream signal pathway. There are three main members of the RIG-I-like pattern recognition receptor family: RIG-ImDA-5 and LGP22, which induce the production of interferon type I and other cytokines. Among them, RIG-I and MDA-5 can specifically identify different RNA viruses, while LGP2 mainly regulates the activation process of RIG-I and MDA-5. The absence of RIG-I or MDA-5 makes the body unable to resist the infection of RNA virus effectively. Causes the body to appear many kinds of sickness even dies. The over-activation of both functions also leads to homeostasis and a series of autoimmune diseases such as lupus erythematosus. It can be seen that the normal function of R1G-I and MDA-5 is indispensable for the body to resist the RNA virus and maintain the homeostasis. At present, the mechanism of RIG-I signal activation is relatively clear, but little is known about how MDA-5 is activated. It is known that the phosphorylation of MDA-5 and RIG-I is mediated by PP1, but it is still unknown whether other modification types play an important role in it. Especially the ubiquitin modification which plays a key role in the activation of RIG-I and whether it also plays an important role in the activation of MDA-5 and which ubiquitin ligase is involved in it is not clear. Based on the previous studies, a series of studies on the molecular mechanism of MDA-5 activation by RNA have been carried out. In this study, we used immunoprecipitation and mass spectrometry to screen proteins that might interact with MDA-5. Among the selected proteins, we found that an E3 ubiquitin ligase TR1M65 interacts very strongly with MDA-5. A series of subsequent experiments have confirmed the existence of this interaction. In order to investigate the effect of the two interactions on the activation of MDA-5 signals, we constructed Trim65 deficient mice, and used MDA-5 signal specific activators to treat the cells from deficient mice and deficient mice. The results showed that the activation of MDA-5 antiviral signaling pathway was greatly inhibited after the deletion of TRIM65 expression. We have similar results in human cells. In terms of mechanism, we found that TRIM65 can induce the ubiquification of MDA-5 's 743 lysine ligand by using its own E3 ubiquitin ligase activity. Furthermore, by using SDD-AGE and laser confocal technique, we found that the induction of MDA-5 ubiquitin by TRIM65 can significantly promote the formation of MDA-5 oligomers, and the formation of MDA-5 oligomers is a key step in the activation of MDA-5 antiviral signals. Through the above studies, we not only found that TRIM65 is a key component in the process of MDA-5 signal activation, but also confirmed that the regulation of ubiquitin is very important for the oligopolymerization and activation of MDA-5. It also provides a new key target for the treatment of MDA-5 related diseases.
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馬明華,易楊華,湯海峰;多糖抗病毒作用的研究概況[J];藥學(xué)服務(wù)與研究;2004年04期

2 ;機(jī)體抗病毒免疫觸發(fā)機(jī)制研究獲新發(fā)現(xiàn)[J];廣西科學(xué)院學(xué)報(bào);2006年02期

3 毛飛;唐旭東;;果蠅抗病毒免疫[J];江蘇醫(yī)藥;2011年23期

4 ;抗病毒免疫[J];人民軍醫(yī);1978年12期

5 余傳霖;;抗病毒免疫[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1997年06期

6 嚴(yán)偉明;;非溶細(xì)胞性抗病毒作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));2003年01期

7 朱巖;從治療“非典”看抗病毒免疫藥物的基礎(chǔ)和應(yīng)用現(xiàn)狀[J];首都醫(yī)藥;2003年10期

8 ;我國(guó)在抗病毒免疫和炎癥研究領(lǐng)域取得新進(jìn)展[J];中國(guó)西部科技;2008年11期

9 王平忠;于海濤;蔣偉;白雪帆;;自然殺傷細(xì)胞受體介導(dǎo)抗病毒免疫的分子機(jī)制[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2013年04期

10 季曉輝;;細(xì)胞因子在抗病毒免疫中作用的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1995年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前4條

1 溫潔霞;仲飛;李秀錦;能昌愛(ài);張考;陳慧慧;;白細(xì)胞介素7的生物學(xué)特性及其在抗病毒免疫中的研究進(jìn)展[A];全國(guó)動(dòng)物生理生化第十二次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2012年

2 楊守京;李靜;高娟;孫玉靜;余璐;趙君;;漢坦病毒感染誘導(dǎo)熱休克反應(yīng)及其增強(qiáng)特異性抗病毒免疫的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)暨第九屆全國(guó)病理大會(huì)論文匯編[C];2007年

3 倪建強(qiáng);王夢(mèng)溪;黃有國(guó);;RGS2的棕櫚�；捌涔δ艿难芯縖A];第一屆全國(guó)腦與認(rèn)知科學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

4 楊鑫;陳福旺;曹宇航;逄大欣;歐陽(yáng)紅生;任林柱;;熱休克蛋白在抗病毒免疫中作用的研究進(jìn)展[A];全國(guó)動(dòng)物生理生化第十二次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2012年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前4條

1 通訊員 肖鑫邋記者 曹繼軍;我抗病毒免疫和炎癥研究取得新進(jìn)展[N];光明日?qǐng)?bào);2008年

2 通訊員 顏文;病毒性肝炎治療出現(xiàn)新途徑[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2007年

3 中國(guó)科學(xué)院上海巴斯德研究所外方所長(zhǎng) 艾德銘;世界級(jí)專(zhuān)家為什么首選中國(guó)[N];光明日?qǐng)?bào);2014年

4 ;機(jī)體抗病毒免疫觸發(fā)機(jī)制研究獲新發(fā)現(xiàn)[N];光明日?qǐng)?bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 郎雪婷;TRIM65在MDA-5抗病毒信號(hào)活化過(guò)程中的關(guān)鍵作用及其機(jī)制探究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2017年

2 陳思源;維生素A營(yíng)養(yǎng)對(duì)兒童抗手足口病免疫力的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

3 劉龍丁;IFN-α刺激相關(guān)細(xì)胞蛋白TIIMPSC和S24v2的功能分析[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 申廣輝;Ⅰ型單純皰疹病毒皮層蛋白UL41逃逸viperin抗病毒作用的分子機(jī)制[D];蘇州大學(xué);2015年

2 劉碧霞;慢性乙肝患者抗病毒治療與停藥復(fù)發(fā)后體內(nèi)HBV特異性T細(xì)胞的研究[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

3 李瑞梅;嘌呤能受體P2Y6在抗病毒免疫中的功能和機(jī)制研究[D];華東師范大學(xué);2013年

4 閆冰;鵝TLR7和TLR21抗病毒免疫學(xué)特性及功能初探[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

5 楊曉梅;呼吸道合胞病毒感染BALB/c鼠活化TLR7介導(dǎo)的抗病毒作用研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

6 史曉佾;呼吸道合胞病毒感染巨噬細(xì)胞活化Toll樣受體3、Toll樣受體7介導(dǎo)的抗病毒作用研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

7 劉宏艷;重組vMIP-Ⅱ?qū)IV/HIV特異性CD8～+T細(xì)胞抗病毒免疫功能影響的研究[D];暨南大學(xué);2005年

8 陳敏;EV71感染患兒TLR7基因多態(tài)性及抗病毒免疫研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2014年

，

本文編號(hào)：1870934