本文選題：HBx蛋白 + CytoTrap酵母雙雜交　； 參考：《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報》2013年04期

【摘要】：目的篩選與乙型肝炎病毒HBx蛋白發(fā)生相互作用的肝細胞蛋白。方法構(gòu)建誘餌重組載體pSos-HBx,經(jīng)測序正確后將其轉(zhuǎn)化酵母菌cdc25Hα中,檢測其在酵母中的表達及有無自激活作用,并利用CytoTrap酵母雙雜交的方法篩選與誘餌蛋白HBx相互作用的肝細胞蛋白。結(jié)果獲得重組誘餌質(zhì)粒pSos-HBx,驗證可以在酵母中表達誘餌蛋白Sos-HBx,且誘餌質(zhì)粒在此系統(tǒng)中沒有自激活作用。利用此系統(tǒng)篩選出6個能與HBx相互作用的肝細胞蛋白,分別為纖連蛋白1、翻譯調(diào)控腫瘤蛋白1、核受體結(jié)合蛋白IQ-WD1、軟泡抑素、血清類粘蛋白1、二硫化物異構(gòu)酶家族A3。結(jié)論成功克隆出乙型肝炎病毒HBx蛋白的結(jié)合蛋白,為進一步研究HBx蛋白在肝炎或肝癌過程中發(fā)揮的作用提供了新線索。
[Abstract]:Objective to screen hepatocyte proteins interacting with hepatitis B virus HBx protein. Methods the recombinant bait vector pSos-HBxwas constructed and transformed into yeast cdc25H 偽 by sequencing correctly. The expression and self-activation of pSos-HBxwas detected in yeast, and the hepatocyte proteins interacting with decoy protein HBx were screened by CytoTrap yeast two-hybrid method. Results Recombinant bait plasmid pSos-HBxwas obtained. It was verified that the bait protein Sos-HBxcould be expressed in yeast, and the decoy plasmid had no self-activation in this system. Six hepatocyte proteins, fibronectin 1, translator-regulated tumor protein 1, nuclear receptor binding protein IQ-WD1, soft endostatin, serum mucin-like protein 1, disulfide isomerase family A3, were screened by this system. Conclusion the successful cloning of hepatitis B virus HBx binding protein provides a new clue for the further study of the role of HBx protein in the process of hepatitis or liver cancer.
【作者單位】： 昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30960346,81260248) 國家科技支撐計劃項目(2009BAI83B02-21,2011BAI15B01-21,2012BAI39B01)~~
【分類號】：R373

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本文編號：1846101