本文選題：豬鏈球菌型 + MCP��； 參考：《中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào)》2013年03期

【摘要】：目的原核表達(dá)豬鏈球菌2型甲基受體趨化蛋白編碼基因05SSU0273。方法通過PCR方法檢測(cè)該基因在不同血清型豬鏈球菌中的分布情況,然后利用獲得的豬鏈球菌2型05SSU0273基因片段,構(gòu)建重組表達(dá)載體pET32a::05SSU0273。將質(zhì)粒轉(zhuǎn)入E.coli BL21中,經(jīng)IPTG誘導(dǎo),SDS-PAGE和Western blot實(shí)驗(yàn)證實(shí)目的基因的表達(dá),然后以His親和層析柱純化重組蛋白。結(jié)果在S.suis 2 35個(gè)血清型標(biāo)準(zhǔn)株中,有20株分離株擴(kuò)增出目的條帶。重組質(zhì)粒可在宿主菌中高效表達(dá),經(jīng)鎳柱親和層析得到相對(duì)分子質(zhì)量為43kD的重組蛋白。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)成功獲得S.suis 2MCP蛋白,為研究其在豬鏈球菌2型致病過程中發(fā)揮的作用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to express the encoding gene 05SSU0273 of methyl-receptor chemoattractant protein of Streptococcus suis type 2 in prokaryotic expression. Methods the distribution of the gene in different serotype Streptococcus suis was detected by PCR method. Then the recombinant expression vector pET32a: 05SSU0273 was constructed by using the obtained 05SSU0273 gene fragment of Streptococcus suis type 2. The plasmid was transferred into E.coli BL21. The expression of the target gene was confirmed by IPTG induced SDS-PAGE and Western blot. The recombinant protein was purified by His affinity chromatography. Results out of the 235 serotype standard strains of S.suis, 20 strains were isolated and the target bands were amplified. The recombinant plasmid was highly expressed in the host strain and the recombinant protein with relative molecular weight of 43kD was obtained by nickel column affinity chromatography. Conclusion S.suis 2MCP protein was successfully obtained in this study, which laid a foundation for the study of its role in the pathogenicity of Streptococcus suis type 2.
【作者單位】： 南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;南京軍區(qū)軍事醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81071317;No.81172794;No.30972638;No.31170124) 江蘇省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.BK2010113;No.BK2011098;No.BK2010025;No.BK2010114;No.BK2011097)資助~~
【分類號(hào)】：S852.611;R378.1

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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3 彭躍躍;丁q，

本文編號(hào)：1827300