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9型重組腺相關(guān)病毒轉(zhuǎn)染microRNA-21前體在大鼠心肌的轉(zhuǎn)染效率及安全性

發(fā)布時間:2018-04-23 23:19

  本文選題:腺相關(guān)病毒 + 型重組腺相關(guān)病毒; 參考:《中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志》2013年09期


【摘要】:目的研究含熒光標(biāo)記ZsGreen的9型重組腺相關(guān)病毒(rAAV9)轉(zhuǎn)染目的基因microRNA-21前體(pre-miR-21)至大鼠心肌的轉(zhuǎn)染效率、表達(dá)時間及安全性。方法用冠脈注射方法轉(zhuǎn)染PBS及rAAV9-Zs-Green-pre-miR-21 1.0×1010vg/只、1.0×1011vg/只、1.0×1012vg/只至SD大鼠心肌,倒置熒光顯微鏡觀察心肌組織熒光表達(dá)并計算轉(zhuǎn)染效率,Realtime PCR方法測定miR-21表達(dá),超聲心動圖觀察大鼠心功能。結(jié)果冠脈注射后7 d PBS組未見綠色熒光,余各組大鼠心肌均可觀察到少量綠色熒光表達(dá),第14天達(dá)高峰,之后呈下降趨勢。14 d高病毒量組較其他中、低病毒量組轉(zhuǎn)染效率明顯高([73.7±8.4)%vs(39.6±4.8)%,(P0.001)];([73.7±8.4)%vs(24.1±4.2)%,(P0.001)]。14 d miR-21表達(dá)在低、中、高病毒量組較PBS組分別增加1.51倍、2.89倍及4.43倍。rAAV9轉(zhuǎn)染后對大鼠心功能無影響(P0.05)。結(jié)論 rAAV9-Zs-Green-pre-miR-21可以有效、持久、安全地在大鼠心肌表達(dá)。
[Abstract]:Objective to study the transfection efficiency, expression time and safety of recombinant adeno-associated virus type 9 (rAAV9) containing fluorescent labeled ZsGreen into rat myocardium after transfection of microRNA-21 precursor pre-miR-21). Methods Coronary artery injection was used to transfect PBS and rAAV9-Zs-Green-pre-miR-21 1.0 脳 1010vg/ and 1.0 脳 1011vg/ to SD rat myocardium. The fluorescence expression of myocardial tissue was observed by inverted fluorescence microscope and the expression of miR-21 was measured by Realtime PCR method. The cardiac function of rats was observed by echocardiography. Results there was no green fluorescence in the PBS group 7 days after coronary artery injection. A small amount of green fluorescence expression was observed in the myocardium of the rest of the rats, which reached the peak on the 14th day, and then decreased. The amount of high virus in the 14 days group was higher than that in the other groups. The transfection efficiency ([73.7 鹵8.4)%vs(39.6 鹵4.8 鹵P0.001)] ([73.7 鹵8.4)%vs(24.1 鹵4.2 + P0.001] 路14 d miR-21 expression in the low viral group was significantly higher than that in the PBS group. The expression of miR-21 in the high virus group was 1.51 times, 2.89 times and 4.43 times higher than that in the PBS group, respectively. Conclusion rAAV9-Zs-Green-pre-miR-21 can be expressed effectively, persistently and safely in rat myocardium.
【作者單位】: 中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院心內(nèi)科;廣州醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院心內(nèi)科;
【分類號】:R346

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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