發(fā)布時(shí)間：2018-04-10 11:13

  本文選題：骨髓 + 間充質(zhì)干細(xì)胞��；參考：《臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志》2013年06期

【摘要】：目的體外定向誘導(dǎo)猴骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenhymal stem cells,BMSCs)分化為脂肪細(xì)胞。方法抽取2～3歲齡雄性恒河猴髂骨骨髓,應(yīng)用密度梯度離心法提取單核細(xì)胞層進(jìn)行貼壁培養(yǎng),獲取原代(P0)猴BMSCs后進(jìn)行傳代培養(yǎng),并進(jìn)行多向分化能力鑒定。分別取第3代(P3)、第5代(P5)、第8代(P8)猴BMSCs,實(shí)驗(yàn)組加入脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)液,對照組加入常規(guī)培養(yǎng)液。倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,誘導(dǎo)3周后行油紅O染色,計(jì)算脂肪細(xì)胞分化率,并比較不同代次之間脂肪細(xì)胞分化率之間的差異。結(jié)果實(shí)驗(yàn)抽取的猴骨髓單核細(xì)胞具有成脂及成骨分化能力,從而表明其為多能性干細(xì)胞。成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)后第5天,實(shí)驗(yàn)組即可觀察到少數(shù)細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)脂滴,隨后胞質(zhì)內(nèi)脂滴數(shù)量、大小及含脂滴細(xì)胞數(shù)量逐漸增加,約3周時(shí)達(dá)到高峰,隨后誘導(dǎo)細(xì)胞迅速出現(xiàn)死亡;油紅O染色示脂滴呈橙紅色;脂肪細(xì)胞分化率:P3(48.3±10.0)%,P5(58.7±5.3)%,P8(68.1±5.5)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。對照組未見脂滴形成,油紅O染色呈陰性。結(jié)論脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)液可以在體外將猴BMSCs定向誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞,脂肪細(xì)胞分化率隨著傳代次數(shù)增加而增加。
[Abstract]:Objective to induce bone marrow mesenchymal stem cells (marrow mesenhymal stem cells) to differentiate into adipocytes in vitro.Methods the bone marrow of the iliac bone of male rhesus monkeys aged 2 to 3 years old was extracted by density gradient centrifugation. The monocyte layer was isolated for adherent culture, the primary BMSCs was obtained, and the ability of multi-directional differentiation was identified.The third generation of P3, the 5th generation of P5, the 8th generation of P8) monkey BMSCs were taken respectively. The experimental group was added adipocyte induced differentiation medium, the control group was added to the conventional culture medium.The morphologic changes of adipocytes were observed under inverted phase contrast microscope. After 3 weeks of induction, oil red O staining was used to calculate the differentiation rate of adipocytes and to compare the difference of adipocyte differentiation rates among different generations.Results Mononuclear cells extracted from monkey bone marrow had the ability of adipogenic and osteogenic differentiation, which indicated that they were pluripotent stem cells.Lipid droplets were observed in the cytoplasm of a few cells in the experimental group on the 5th day after adipogenic differentiation, followed by an increase in the number, size and number of lipid droplets in the cytoplasm, and reached a peak at about 3 weeks.The differentiation rate of adipocytes was 48.3 鹵10.0%. The differentiation rate of adipocytes was 58.7 鹵5.3%. The difference was statistically significant (P 0.05).No lipid droplets were found in the control group, but oil red O staining was negative.Conclusion the adipocyte differentiation medium can induce the differentiation of monkey BMSCs into adipocytes in vitro, and the adipocyte differentiation rate increases with the increase of passage times.
【作者單位】： 北京市垂楊柳醫(yī)院病理科;中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)與病理生理學(xué)教研室;北京航天總醫(yī)院眼科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30271327)
【分類號】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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8 井緒東;體外誘導(dǎo)大鼠骨髓及人胎盤間質(zhì)干細(xì)胞向膽堿能樣神經(jīng)元分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];暨南大學(xué);2008年

9 張茜真;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定以及干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)其重編程的研究[D];浙江理工大學(xué);2010年

10 李麗;人胎盤來源的間充質(zhì)干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化潛能的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

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本文編號：1730958