本文選題：骨髓 + 間充質干細胞��；參考：《臨床與實驗病理學雜志》2013年06期

【摘要】：目的體外定向誘導猴骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenhymal stem cells,BMSCs)分化為脂肪細胞。方法抽取2～3歲齡雄性恒河猴髂骨骨髓,應用密度梯度離心法提取單核細胞層進行貼壁培養(yǎng),獲取原代(P0)猴BMSCs后進行傳代培養(yǎng),并進行多向分化能力鑒定。分別取第3代(P3)、第5代(P5)、第8代(P8)猴BMSCs,實驗組加入脂肪細胞誘導分化培養(yǎng)液,對照組加入常規(guī)培養(yǎng)液。倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化,誘導3周后行油紅O染色,計算脂肪細胞分化率,并比較不同代次之間脂肪細胞分化率之間的差異。結果實驗抽取的猴骨髓單核細胞具有成脂及成骨分化能力,從而表明其為多能性干細胞。成脂誘導分化培養(yǎng)后第5天,實驗組即可觀察到少數細胞胞質內出現(xiàn)脂滴,隨后胞質內脂滴數量、大小及含脂滴細胞數量逐漸增加,約3周時達到高峰,隨后誘導細胞迅速出現(xiàn)死亡;油紅O染色示脂滴呈橙紅色;脂肪細胞分化率:P3(48.3±10.0)%,P5(58.7±5.3)%,P8(68.1±5.5)%,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。對照組未見脂滴形成,油紅O染色呈陰性。結論脂肪細胞誘導分化培養(yǎng)液可以在體外將猴BMSCs定向誘導分化為脂肪細胞,脂肪細胞分化率隨著傳代次數增加而增加。
[Abstract]:Objective to induce bone marrow mesenchymal stem cells (marrow mesenhymal stem cells) to differentiate into adipocytes in vitro.Methods the bone marrow of the iliac bone of male rhesus monkeys aged 2 to 3 years old was extracted by density gradient centrifugation. The monocyte layer was isolated for adherent culture, the primary BMSCs was obtained, and the ability of multi-directional differentiation was identified.The third generation of P3, the 5th generation of P5, the 8th generation of P8) monkey BMSCs were taken respectively. The experimental group was added adipocyte induced differentiation medium, the control group was added to the conventional culture medium.The morphologic changes of adipocytes were observed under inverted phase contrast microscope. After 3 weeks of induction, oil red O staining was used to calculate the differentiation rate of adipocytes and to compare the difference of adipocyte differentiation rates among different generations.Results Mononuclear cells extracted from monkey bone marrow had the ability of adipogenic and osteogenic differentiation, which indicated that they were pluripotent stem cells.Lipid droplets were observed in the cytoplasm of a few cells in the experimental group on the 5th day after adipogenic differentiation, followed by an increase in the number, size and number of lipid droplets in the cytoplasm, and reached a peak at about 3 weeks.The differentiation rate of adipocytes was 48.3 鹵10.0%. The differentiation rate of adipocytes was 58.7 鹵5.3%. The difference was statistically significant (P 0.05).No lipid droplets were found in the control group, but oil red O staining was negative.Conclusion the adipocyte differentiation medium can induce the differentiation of monkey BMSCs into adipocytes in vitro, and the adipocyte differentiation rate increases with the increase of passage times.
【作者單位】： 北京市垂楊柳醫(yī)院病理科;中山大學醫(yī)學院病理學與病理生理學教研室;北京航天總醫(yī)院眼科;
【基金】：國家自然科學基金(30271327)
【分類號】：R329

【參考文獻】

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本文編號：1730958