發(fā)布時間：2018-03-21 15:35

  本文選題：p基因啟動子　切入點：轉錄活性　出處：《廣州中醫(yī)藥大學學報》2013年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：【目的】構建p53基因啟動子靶控報告基因細胞模型,為高通量篩選出以p53為靶標的中藥提供新的細胞模型。【方法】采用瞬時轉染報告基因測定法,確定最佳轉染方案及p53基因啟動子轉錄活性細胞模型的建立和驗證,觀察p53抑制劑PFT-a、血清饑餓、過氧化氫、自噬激活劑雷帕霉素對p53基因啟動子轉錄活性PC12細胞模型的量效和時效關系�！窘Y果】PFT-α誘導3 h,對p53基因啟動子轉錄活性抑制率達50%左右;血清饑餓誘導12、24、36 h,p53基因啟動子轉錄活性是對照組的1.6倍;過氧化氫300μmol/L誘導9 h,p53基因啟動子轉錄活性是對照組的1.3倍;雷帕霉素在濃度為0.1、1 nmol/L可上調p53基因啟動子轉錄活性,呈濃度依賴性,而5 nmol/L及更高濃度可下調p53基因啟動子轉錄活性。【結論】成功建立采用p53基因啟動子報告基因檢測p53基因啟動子轉錄活性的特異性細胞模型,血清饑餓、過氧化氫、雷帕霉素可誘導p53基因啟動子的轉錄活性。
[Abstract]:[objective] to construct a target controlled reporter gene cell model of p53 gene promoter, and to provide a new cell model for high throughput screening of Chinese medicine targeting p53. [methods] transient transfection reporter gene assay was used. The optimal transfection protocol and the establishment and validation of p53 gene promoter transcriptional active cell model were determined. The p53 inhibitor PFT-a, serum starvation, hydrogen peroxide were observed. The dose-effect and time-dependent relationship of autophagy activator rapamycin on PC12 cell model of p53 gene promoter transcriptional activity. [results] the inhibition rate of p53 promoter transcription activity was about 50% when induced by PFT- 偽 for 3 h. The transcriptional activity of p53 gene promoter induced by serum starvation was 1.6 times higher than that of the control group, the activity of p53 gene promoter induced by hydrogen peroxide 300 渭 mol/L was 1.3 times higher than that of the control group, and rapamycin could up-regulate the transcription activity of p53 gene promoter at the concentration of 0.1 nmol/L. In a concentration-dependent manner, 5 nmol/L and higher concentration could down-regulate the transcriptional activity of p53 promoter. [conclusion] A specific cell model for detecting p53 promoter transcriptional activity by p53 promoter reporter gene was successfully established. Hydrogen peroxide and rapamycin can induce the transcriptional activity of p53 promoter.
【作者單位】： 廣州中醫(yī)藥大學解剖學教研室;廣州中醫(yī)藥大學中藥學院;廣州中醫(yī)藥大學新藥開發(fā)研究中心;廣州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院;
【基金】：廣東省自然科學基金項目(編號:S2012010010406);廣東省自然科學基金博士啟動項目(編號:S2011040004778) 廣東省中醫(yī)藥管理局資助項目(編號:20112132)
【分類號】：R-332

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 鄭延松,李源,張珊紅,龔衛(wèi)琴,孫斌;用低濃度過氧化氫建立心肌細胞氧化損傷模型[J];第四軍醫(yī)大學學報;2001年20期

2 丁睿;韓霜;雷婷;劉杰;竇科峰;;Id1啟動子的熒光素酶報告基因載體的構建及其在肝癌HepG2細胞中的活性檢測[J];第四軍醫(yī)大學學報;2007年09期

3 張海玲;葉茂盛;鄭二來;陳東風;華子春;;ID1啟動子的構建及其在不同細胞系中的表達[J];解剖學研究;2011年04期

4 楊鵬宇;張建生;;mTOR抑制劑治療膠質瘤的研究進展[J];國際神經病學神經外科學雜志;2009年06期

5 吳順華;鐘彥偉;成軍;鄭玉建;;篩選肝細胞p53啟動子結合蛋白的噬菌體表面展示技術[J];環(huán)境與健康雜志;2011年07期

6 吳永青,劉彥文,邱鵬新,張清秀,葛堅;bcl-2基因轉染PC12細胞及其神經保護作用的研究[J];解剖學報;2002年04期

7 易香華;吳靜;侯秋科;鄧汝東;張賽霞;李伊為;陳東風;黎暉;周健洪;孟冬雪;張海玲;;龜板促進Parkinson病大鼠黑質骨形態(tài)發(fā)生蛋白信號分子的表達[J];神經解剖學雜志;2009年05期

8 張斌;夏作理;趙曉民;張和平;;氧化應激模型的建立及其評價[J];中國臨床康復;2006年44期

9 趙景輝;孫秋寧;閆巖;李軍;;常見皮膚癬菌體外藥物敏感試驗的研究[J];中國真菌學雜志;2006年04期

10 鮑迎秋;萬U，

本文編號：1644482