本文選題：p基因啟動子　切入點：轉(zhuǎn)錄活性　出處：《廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報》2013年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：【目的】構(gòu)建p53基因啟動子靶控報告基因細(xì)胞模型,為高通量篩選出以p53為靶標(biāo)的中藥提供新的細(xì)胞模型�！痉椒ā坎捎盟矔r轉(zhuǎn)染報告基因測定法,確定最佳轉(zhuǎn)染方案及p53基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性細(xì)胞模型的建立和驗證,觀察p53抑制劑PFT-a、血清饑餓、過氧化氫、自噬激活劑雷帕霉素對p53基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性PC12細(xì)胞模型的量效和時效關(guān)系�！窘Y(jié)果】PFT-α誘導(dǎo)3 h,對p53基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性抑制率達(dá)50%左右;血清饑餓誘導(dǎo)12、24、36 h,p53基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性是對照組的1.6倍;過氧化氫300μmol/L誘導(dǎo)9 h,p53基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性是對照組的1.3倍;雷帕霉素在濃度為0.1、1 nmol/L可上調(diào)p53基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性,呈濃度依賴性,而5 nmol/L及更高濃度可下調(diào)p53基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性�！窘Y(jié)論】成功建立采用p53基因啟動子報告基因檢測p53基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性的特異性細(xì)胞模型,血清饑餓、過氧化氫、雷帕霉素可誘導(dǎo)p53基因啟動子的轉(zhuǎn)錄活性。
[Abstract]:[objective] to construct a target controlled reporter gene cell model of p53 gene promoter, and to provide a new cell model for high throughput screening of Chinese medicine targeting p53. [methods] transient transfection reporter gene assay was used. The optimal transfection protocol and the establishment and validation of p53 gene promoter transcriptional active cell model were determined. The p53 inhibitor PFT-a, serum starvation, hydrogen peroxide were observed. The dose-effect and time-dependent relationship of autophagy activator rapamycin on PC12 cell model of p53 gene promoter transcriptional activity. [results] the inhibition rate of p53 promoter transcription activity was about 50% when induced by PFT- 偽 for 3 h. The transcriptional activity of p53 gene promoter induced by serum starvation was 1.6 times higher than that of the control group, the activity of p53 gene promoter induced by hydrogen peroxide 300 渭 mol/L was 1.3 times higher than that of the control group, and rapamycin could up-regulate the transcription activity of p53 gene promoter at the concentration of 0.1 nmol/L. In a concentration-dependent manner, 5 nmol/L and higher concentration could down-regulate the transcriptional activity of p53 promoter. [conclusion] A specific cell model for detecting p53 promoter transcriptional activity by p53 promoter reporter gene was successfully established. Hydrogen peroxide and rapamycin can induce the transcriptional activity of p53 promoter.
【作者單位】： 廣州中醫(yī)藥大學(xué)解剖學(xué)教研室;廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院;廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心;廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院;
【基金】：廣東省自然科學(xué)基金項目(編號:S2012010010406);廣東省自然科學(xué)基金博士啟動項目(編號:S2011040004778) 廣東省中醫(yī)藥管理局資助項目(編號:20112132)
【分類號】：R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1644482