本文選題：WeeB　切入點：Wee蛋白　出處：《吉林大學學報(醫(yī)學版)》2013年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:檢測小鼠1-細胞期受精卵各個細胞周期中蛋白激酶Wee1B的表達水平及其定位水平,初步闡明Wee1B對哺乳動物受精卵早期發(fā)育調(diào)控的機制。方法:超排卵獲得小鼠1-細胞期受精卵,收集卵細胞后用RT-PCR和Western blotting方法檢測Wee1B的mRNA和蛋白表達水平;放射自顯影測定Wee1B活性;間接免疫熒光觀察Wee1B在各個細胞時期的定位。結(jié)果:小鼠1-細胞期受精卵G1、S、G2和M期Wee1BmRNA相對表達量比較差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05);S、G2和M期Wee1B蛋白表達量與G1期比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);與G1期比較,S、G2期Wee1B活性逐漸增高(P0.05,P0.01),M期Wee1B活性迅速下降(P0.01)。G1期和S期細胞Wee1B蛋白偶聯(lián)的紅色熒光信號主要集中分布于細胞核,但在G2期細胞紅色熒光信號彌散分布于細胞漿,在M末期和2-細胞期可見紅色熒光信號又重新分布于細胞核,細胞漿內(nèi)熒光減弱。結(jié)論:蛋白激酶Wee1B在小鼠1-細胞期受精卵各個細胞周期動態(tài)表達,Wee1B蛋白存在核漿轉(zhuǎn)位,Wee1B的定位變化可能調(diào)控小鼠受精卵有絲分裂。
[Abstract]:Objective: to detect the expression and localization of protein kinase Wee1B in each cell cycle of mouse 1-cell fertilized egg. Methods: mouse 1-cell fertilized eggs were obtained by superovulation, and the expression levels of mRNA and protein of Wee1B were detected by RT-PCR and Western blotting. Wee1B activity was measured by autoradiography. Indirect immunofluorescence was used to observe the localization of Wee1B in different cell stages. Results: there was no significant difference in the relative expression of Wee1BmRNA in G _ 1, S _ 1, G _ 2 and M phases of mouse 1-cell fertilized eggs. There was no significant difference in the expression of Wee1B protein between G _ 1 phase and G _ 1 phase. Compared with G1 phase, the activity of Wee1B in G _ 2 phase increased gradually, the Wee1B activity in P _ (0.05) P _ (0.01) G _ (-1) phase decreased rapidly, and the red fluorescence signal of Wee1B protein coupling in S phase cells was mainly distributed in the nucleus. However, in G2 phase, the red fluorescence signal was distributed in the cytoplasm, and in the late M and 2-cell phase, the red fluorescence signal was redistributed in the nucleus. Conclusion: the dynamic expression of protein kinase Wee1B in each cell cycle of 1-cell stage of mouse fertilized eggs may regulate the mitosis of mouse fertilized eggs by the localization change of nuclear and cytoplasmic translocation of Wee1B protein.
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學生物化學與分子生物學教研室;遼寧醫(yī)學院發(fā)育生物學教研室;遼寧醫(yī)學院生物化學與分子生物學教研室;
【基金】：國家自然科學基金資助課題(81270654,81270698) 遼寧省教育廳科研基金資助課題(L2012303)
【分類號】：R341

【共引文獻】

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