噬菌體展示技術篩選人隱孢子蟲P23抗原表位
發(fā)布時間:2018-02-07 17:48
本文關鍵詞: 噬菌體展示技術 篩選 人隱孢子蟲 P抗原 細胞表位 出處:《中國人獸共患病學報》2013年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的本研究利用噬菌體展示技術篩選人隱孢子蟲P23抗原表位,為研制其抗原表位疫苗奠定基礎。方法首先用人隱孢子蟲重組P23抗原免疫動物以制備抗體,將該抗體與噬菌體展示隨機肽庫結合,通過ELISA和Western-blot方法鑒定陽性克隆,并對陽性克隆進行增殖,然后對其序列測定和抗原表位預測。結果噬菌體肽庫結合抗體后,經(jīng)ELISA方法可鑒定10株為陽性克隆,Western-blot檢測可發(fā)現(xiàn)有67kD目的條帶出現(xiàn);序列分析結果可發(fā)現(xiàn)它們中具有3個不同結構表位序列,命名為ep1,ep2,ep3,且預測出具有良好的親水性。結論所得序列是具有B細胞抗原表位。
[Abstract]:Objective to screen the epitopes of human Cryptosporidium P23 antigen by phage display technique in order to establish the foundation for the preparation of the antigen epitope vaccine. Methods the recombinant P23 antigen was first used to immunize animals with human Cryptosporidium p23 antigen to prepare antibodies. The antibody was combined with phage display random peptide library, positive clones were identified by ELISA and Western-blot, and the positive clones were proliferated, then sequenced and epitope predicted. The results of ELISA analysis showed that there were 67kD target bands in 10 positive clones by Western-blot, and three different structural epitopes were found in them by sequence analysis. It was named ep1 ep2 ep3 and was predicted to have good hydrophilicity. Conclusion the obtained sequence is a B cell epitope.
【作者單位】: 安徽農(nóng)業(yè)大學;華南農(nóng)業(yè)大學;
【基金】:安徽省高等學校自然科學基金項目(KJ2009B027Z)~~
【分類號】:R382.3
【參考文獻】
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【共引文獻】
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本文編號:1494953
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