靶向RNA干擾TIM4表達(dá)對T細(xì)胞的影響
本文關(guān)鍵詞: T細(xì)胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白 RNA干擾 樹突狀細(xì)胞 Th細(xì)胞 出處:《中國輸血雜志》2013年09期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的構(gòu)建靶向RNA干擾T細(xì)胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白4(TIM4)基因的慢病毒重組表達(dá)載體,分析TIM4基因?qū)細(xì)胞的影響。方法根據(jù)Gene Bank報道的TIM4 mRNA序列(NM_178759.4)設(shè)計干擾片段,通過基因工程方法構(gòu)建靶向RNA干擾TIM4基因的慢病毒載體,體外轉(zhuǎn)染DCs后與T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng),檢測細(xì)胞增殖情況及細(xì)胞因子分泌水平。結(jié)果成功構(gòu)建基因干擾的慢病毒載體并轉(zhuǎn)染DCs。MTT實驗表明TIM4-DC組T細(xì)胞的增殖受到抑制;ELISA檢測顯示:TIM4-DC組IL-12和IFN-γ的分泌均明顯高于對照組(P0.05)。結(jié)論 RNA干擾TIM4基因在DCs表達(dá)后,可抑制T細(xì)胞增殖的作用以及T細(xì)胞向Th2細(xì)胞分化。
[Abstract]:Objective to construct a recombinant expression vector of lentivirus targeting RNA interfering T cell immunoglobulin and mucin domain protein 4 / TIM4 gene. Methods the interference fragment was designed according to the TIM4 mRNA sequence reported by Gene Bank. A lentivirus vector targeting RNA interfering TIM4 gene was constructed by genetic engineering method and co-cultured with T lymphocytes after transfection of DCs in vitro. Results Lentivirus vector with gene interference was successfully constructed and transfected into DCs.MTT. The results showed that the proliferation of T cells in TIM4-DC group was inhibited. ELISA analysis showed that the secretion of IL-12 and IFN- 緯 in the control group was significantly higher than that in the control group (P 0.05). Conclusion RNA interferes with the expression of TIM4 gene in DCs. It can inhibit the proliferation of T cells and the differentiation of T cells into Th2 cells.
【作者單位】: 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院輸血科;
【基金】:上海市自然科學(xué)基金項目面上項目(11ZR1405200) 上海市公共衛(wèi)生重點學(xué)科建設(shè)計劃(12GWZX0202)
【分類號】:R392
【正文快照】: T細(xì)胞可以識別抗原,產(chǎn)生淋巴因子,增殖分化成效應(yīng)T細(xì)胞和記憶細(xì)胞。根據(jù)T細(xì)胞表面標(biāo)志及功能可分為細(xì)胞毒性,輔助,調(diào)節(jié)/抑制和記憶T細(xì)胞,其中CD4+T的輔助T細(xì)胞在免疫過程中可通過增殖擴(kuò)散來激活其它產(chǎn)生直接免疫反應(yīng)的免疫細(xì)胞,因此在免疫過程中具有重要作用。樹突狀細(xì)胞(dend
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【二級參考文獻(xiàn)】
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