應(yīng)用纖連蛋白片段建立椎間盤退變動物模型
發(fā)布時間:2018-01-13 03:16
本文關(guān)鍵詞:應(yīng)用纖連蛋白片段建立椎間盤退變動物模型 出處:《中國脊柱脊髓雜志》2013年01期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的:探討應(yīng)用N端30kDa纖連蛋白片段(Fn-f)建立模擬人類椎間盤退變規(guī)律的椎間盤退變動物模型的可行性,為椎間盤退變的防治提供實驗?zāi)P图皩嶒炓罁?jù)。方法:選取雄性6月齡新西蘭大白兔28只,麻醉后使用30G微量注射針和微量注射器,在透視引導下經(jīng)皮將25μl 1.5μmol/L Fn-f(Fn-f組)或25μl磷酸緩沖液(PBS,0.01mol/L,pH值7.2;PBS組)隨機分別注射入不同節(jié)段的腰椎間盤中心區(qū)。分別于注射4、8、12、16周后獲取椎間盤,對椎間盤進行組織學檢測(HE、Masson三色及番紅O染色),并以RT-PCR法對椎間盤聚集蛋白聚糖和Ⅱ型膠原的基因表達水平進行分析。結(jié)果:與注射PBS椎間盤相比,注射Fn-f椎間盤造模后4周時椎間盤的髓核、纖維環(huán)結(jié)構(gòu)以及胞外基質(zhì)蛋白聚糖等無明顯差別;8周時髓核細胞數(shù)量減少、細胞簇狀分布,被胞外基質(zhì)分隔開來,纖維環(huán)層狀結(jié)構(gòu)排列部分出現(xiàn)紊亂,蛋白聚糖染色變淺;12和16周時髓核細胞數(shù)量明顯減少,細胞變圓,呈明顯的成簇聚集分布,纖維環(huán)排列明顯不規(guī)整,各層間出現(xiàn)裂隙,甚至斷裂,蛋白聚糖染色明顯變淺,甚至部分未見染色。Fn-f組椎間盤聚集蛋白聚糖mRNA表達水平在8、12和16周3個時間點均明顯低于PBS組(P0.05);Ⅱ型膠原mRNA表達水平在12和16周時明顯低于PBS對照組(P0.05)。結(jié)論:透視引導下兔椎間盤內(nèi)注射N端30kDa Fn-f可誘導椎間盤產(chǎn)生漸進性退行性病變,該法建立的動物模型可作為研究椎間盤退變的發(fā)病機制及防治的實驗?zāi)0濉?br/>[Abstract]:Objective: to investigate the feasibility of using N-terminal 30kDa fibronectin fragment (Fn-f) to establish an animal model of intervertebral disc degeneration. Methods: 28 male 6 months old New Zealand white rabbits were selected and 30 G microinjection needle and micro syringe were used after anesthesia. The pH value of 25 渭 l 1.5 渭 mol/L Fn-f(Fn-f group or 25 渭 l phosphoric acid buffer solution was 0.01 mol / L 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1). PBS group was randomly injected into the central region of different segments of lumbar intervertebral disc. The intervertebral disc was obtained 16 weeks after injection of 4 pieces 812m, and the histopathological examination of the intervertebral disc was performed. The gene expression levels of proteoglycan and type 鈪,
本文編號:1417222
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