本文關(guān)鍵詞：敲低細(xì)胞角蛋白18對(duì)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的影響　出處：《軍事醫(yī)學(xué)》2013年07期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的研究氧化應(yīng)激條件下中間纖維蛋白細(xì)胞角蛋白(cytokeratin)的抗凋亡作用。方法利用RNA干擾(RNAi)技術(shù)敲低細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞角蛋白18(CK18)的表達(dá),免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞角蛋白的表達(dá)水平,并通過A549細(xì)胞建立細(xì)胞角蛋白敲低穩(wěn)定細(xì)胞系。利用免疫熒光染色技術(shù)觀察細(xì)胞角蛋白對(duì)細(xì)胞骨架的影響。利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞角蛋白對(duì)細(xì)胞內(nèi)ROS(reactive oxygen species)水平及氧化應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果篩選獲得3個(gè)干擾效果較好的RNAi序列,成功利用A549細(xì)胞建立細(xì)胞角蛋白敲低的穩(wěn)定細(xì)胞系(A549-KD)。CK18表達(dá)敲低導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)多種細(xì)胞角蛋白表達(dá)廣泛下調(diào),并破壞細(xì)胞微絲及微管骨架結(jié)構(gòu)。氧化應(yīng)激條件下A549-KD細(xì)胞抗凋亡活性顯著降低。結(jié)論細(xì)胞角蛋白參與維持細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu),對(duì)抗ROS誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,提示其在細(xì)胞的氧化應(yīng)激過程中發(fā)揮保護(hù)作用。
[Abstract]:Objective to study the antiapoptotic effect of cytokeratin in intermediate fibrin cells under oxidative stress. The expression of cytokeratin 18 (CK18) in the cells was reduced. The expression of keratin was detected by Western blot. The cytokeratin knockdown stable cell line was established by A549 cell line. The effect of cytokeratin on cytoskeleton was observed by immunofluorescence staining. Flow cytometry was used to detect the effect of keratin on cell cytoskeleton. OSS (. The level of reactive oxygen speciesand the effect of oxidative stress on apoptosis. Results three RNAi sequences with good interference effect were obtained. The successful use of A549 cell line to establish a stable cell line with low keratin knockdown induced a wide down-regulation of keratin expression in a variety of cells. The anti-apoptotic activity of A549-KD cells was significantly decreased under oxidative stress. Conclusion cytokeratin is involved in the maintenance of cytoskeletal structure. Antagonizing apoptosis induced by ROS may play a protective role in oxidative stress.
【作者單位】： 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所;
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 真核生物細(xì)胞骨架由微絲(microfilaments)、微管(microtubules)及中間纖維(intermediate fila-ments)組成。這些骨架結(jié)構(gòu)在細(xì)胞內(nèi)形成網(wǎng)絡(luò),彼此相互聯(lián)系而各自又具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)與功能。細(xì)胞角蛋白(cytokeratin)屬于中間纖維蛋白的一種,可進(jìn)一步分為呈酸性的Ⅰ型(K9～K20)及呈

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6 王秀琴,楊存田,孟慶峰,巖月宏彥,須田滿壽美;細(xì)胞骨架在回腸上皮的表達(dá)[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2001年04期

7 韓永華;中間絲蛋白的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè);2004年01期

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本文編號(hào)：1410311