本文關(guān)鍵詞：α-胞襯蛋白siRNA對(duì)干燥綜合征模型NOD小鼠IFN-γ和IL-4表達(dá)水平及基因沉默效果的影響　出處：《吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2013年03期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： α-胞襯蛋白 小干擾RNA 非肥胖糖尿病 白細(xì)胞介素 干擾素γ 干燥綜合征

【摘要】：目的:觀察α-胞襯蛋白(α-Fodrin)特異性小干擾RNA(siRNA)對(duì)干燥綜合征(SS)動(dòng)物模型非肥胖糖尿病(NOD)小鼠細(xì)胞因子IFN-γ和IL-4表達(dá)水平的影響,探討α-Fodrin siRNA治療NOD的可能性。方法:12只NOD雌性小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、空載體組、α-Fodrin siRNA1組和α-Fodrin siRNA2組,每組3只。將成功構(gòu)建的α-Fodrin siRNA1和α-Fodrin siRNA2表達(dá)載體分別經(jīng)尾靜脈注射α-Fodrin siRNA1組和α-Fodrin siRNA2組NOD小鼠,對(duì)照組和空載體組小鼠分別注射同等劑量的PBS和pGFP-V-RS空載體,測(cè)定每周每只小鼠的飲水量。注射后1、3、5和7d,各組小鼠尾部采血,ELISA法檢測(cè)4組小鼠血清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4的表達(dá)水平,RT-PCR法檢測(cè)NOD小鼠肺臟組織中α-Fodrin mRNA的表達(dá)水平,免疫組織化學(xué)法檢測(cè)NOD小鼠肺臟組織中α-Fodrin的表達(dá)水平。結(jié)果:4組小鼠飲水量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。注射后1和3d,siRNA1組和siRNA2組NOD小鼠血清中IL-4水平明顯升高、IFN-γ/IL-4比值減低,與對(duì)照組和空載體組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),對(duì)照組與空載體組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,siRNA1組與siRNA2組比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;注射后5和7d,4組小鼠血清中IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。注射后7d,siRNA1組和siRNA2組NOD小鼠肺臟組織中α-Fodrin及其mRNA的表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組和空載體組(P0.05),對(duì)照組和空載體組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,siRNA1組和siRNA2組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:NOD小鼠注射α-Fodrin siRNA載體后,血清中IL-4的水平升高、IFN-γ/IL-4的比值降低,同時(shí)α-FodrinmRNA表達(dá)水平和α-Fodrin表達(dá)水平下降,提示α-Fodrin siRNA可以通過(guò)減輕NOD小鼠炎癥反應(yīng)延緩SS病情進(jìn)程。
[Abstract]:Objective: To observe the effect of alpha fodrin (alpha -Fodrin) specific small interfering RNA (siRNA) of Sjogren syndrome (SS) animal model of non obese diabetic (NOD) mice expression of cytokines IFN- and IL-4, to explore the possibility of a -Fodrin siRNA for the treatment of NOD. Methods: 12 NOD female mice were randomly divided into control group, empty vector group, siRNA1 group and alpha -Fodrin alpha -Fodrin siRNA2 group, 3 rats in each group. The successful construction of the -Fodrin siRNA1 alpha and alpha -Fodrin expression vector siRNA2 respectively by intravenous injection of alpha -Fodrin alpha -Fodrin siRNA2 siRNA1 group and NOD group, PBS and pGFP-V-RS were injected with the same dose of vector light group and vector group mice, each mouse was measured weekly. The amount of water after injection of 1,3,5 and 7d, the mice tail blood ELISA cytokines were measured by 4 groups of mice serum levels of IFN-, the expression level of IL-4 and RT-PCR were detected in lung tissue of NOD mice The expression level of alpha -Fodrin mRNA, detection of NOD expression in mouse lung tissue by immunohistochemistry in alpha -Fodrin. Results: there was no significant difference between the 4 groups of mice drinking water (P0.05). After the injection of 1 and 3D, IL-4 level of siRNA1 group and siRNA2 group NOD in the serum of mice was significantly increased, the ratio of /IL-4 IFN- gamma reduced, there was statistically significant difference compared with the control group and empty vector group (P0.05), the control group and empty vector group had no significant difference, the difference between the siRNA1 group and siRNA2 group have no statistical significance; after the injection of 5 and 7d, no significant difference was found in the level of IFN- and the ratio of /IL-4 gamma IL-4 4 groups in the serum of mice difference. After injection of 7D, the expression level of -Fodrin and mRNA alpha siRNA1 group and siRNA2 group of NOD mice lung tissues was significantly lower than the control group and empty vector group (P0.05), the control group and empty vector group but no significant difference was found between group siRNA1 and S The difference between the iRNA2 group had no statistical significance. Conclusion: NOD mice were injected with alpha -Fodrin siRNA vector, elevated serum IL-4 level, IFN- ratio of gamma /IL-4 decreased, while the expression of -FodrinmRNA alpha and alpha -Fodrin expression level decreased, suggesting that siRNA alpha -Fodrin can reduce NOD mice inflammatory response delay SS disease process.

【作者單位】： 內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院風(fēng)濕免疫研究所;
【基金】：內(nèi)蒙古自治區(qū)教育廳高等學(xué)�？茖W(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目資助課題(NJ09165)
【分類號(hào)】：R589;R-332
【正文快照】： 干燥綜合征(Sjogren’s syndrome,SS)是一種以淚腺、涎腺等外分泌腺受累為主要特征的系統(tǒng)性自身免疫性疾病。多種細(xì)胞因子和自身抗體參與了SS的致病過(guò)程[1-3]。α-胞襯蛋白(α-Fodrin)是從干燥小鼠唇腺中提取的一種相對(duì)分子質(zhì)量為120 000的涎腺特異性自身抗原。研究[4]表明:α

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本文編號(hào)：1402795