發(fā)布時(shí)間：2018-01-09 06:15

  本文關(guān)鍵詞：大黃炭對(duì)激光誘導(dǎo)的小鼠脈絡(luò)膜新生血管模型的干預(yù)療效及其機(jī)制研究　出處：《上海交通大學(xué)》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:中藥方劑在治療年齡相關(guān)性黃斑變性(Age-relatedmaculardegeneration,AMD)中取得了良好的臨床療效。已經(jīng)發(fā)明的一種中藥方劑(專利號(hào):WO2012079419)經(jīng)過臨床實(shí)驗(yàn)顯示了其在治療濕性AMD方面的積極作用,此項(xiàng)試驗(yàn)的目的在于揭示作為方劑成分之一的大黃炭(charred Radix et Rhizoma Rhei,CRRR)對(duì)于半導(dǎo)體倍頻激光誘導(dǎo)的小鼠脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型的治療效果及其可能機(jī)制。方法:1、用半導(dǎo)體倍頻激光照射C57BL/6小鼠,通過引起B(yǎng)ruch’s膜的破裂誘發(fā)CNV。2、將誘發(fā)了CNV的30只C57BL/6小鼠隨機(jī)分為CRRR干預(yù)組(15只)和對(duì)照組(15只)。3、將CRRR干預(yù)組的小鼠給予CRRR的水溶液灌胃(濃度為0.6 g/100 ml;劑量為1 ml/0.1 kg;一天兩次灌胃,共計(jì)21天)。4、將對(duì)照組的小鼠給予生理鹽水灌胃(劑量為1 ml/0.1 kg;一天兩次灌胃,共計(jì)21天)。3、將CRRR干預(yù)組和對(duì)照組的各5只小鼠在半導(dǎo)體倍頻激光照射后第7天處死,收集視網(wǎng)膜組織采用定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)測(cè)定白細(xì)胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular epithelial growth factor,VEGF)在mRNA水平的表達(dá)。4、將CRRR干預(yù)組和對(duì)照組的各5只小鼠在半導(dǎo)體倍頻激光照射后第7天處死,收集視網(wǎng)膜組織采用western blot測(cè)定IL-10和VEGF的蛋白表達(dá)。5、在半導(dǎo)體倍頻激光照射后的第14天和第21天分別將CRRR干預(yù)組和對(duì)照組的小鼠進(jìn)行眼底熒光血管造影(fundus fluorescein angiography,FFA)檢查,將造影圖片進(jìn)行分級(jí)以評(píng)估血管滲漏的程度。6、在半導(dǎo)體倍頻激光照射后第22天,將CRRR干預(yù)組和對(duì)照組其余的小鼠處死,摘取眼球后制備視網(wǎng)膜鋪片,進(jìn)行三維共焦顯微鏡檢查以評(píng)估CNV的體積。結(jié)果:1、在半導(dǎo)體倍頻激光照射后的14天和21天,將FFA圖片進(jìn)行分級(jí)并比較,在將CRRR干預(yù)組和對(duì)照組中與臨床相關(guān)的組織損害(2b級(jí))的比較中沒有發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異。2、在半導(dǎo)體倍頻激光照射后第7天,qPCR顯示CRRR干預(yù)組相對(duì)于對(duì)照組而言,IL-10在mRNA水平的表達(dá)顯著增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P0.05)。3、在半導(dǎo)體倍頻激光照射后第7天,Western blot顯示CRRR干預(yù)組相對(duì)于對(duì)照組而言,IL-10的蛋白表達(dá)顯著增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P0.05)。4、在半導(dǎo)體倍頻激光照射后7天,qPCR顯示CRRR干預(yù)組相對(duì)于對(duì)照組而言,VEGF在mNA水平的表達(dá)沒有顯著增加,差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P0.05)5、在半導(dǎo)體倍頻激光照射后第7天,Western blot顯示CRRR干預(yù)組相對(duì)于對(duì)照組而言,VEGF的蛋白表達(dá)沒有顯著增加,差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P0.05)。6、在半導(dǎo)體倍頻激光照射后22天,用共焦顯微鏡對(duì)視網(wǎng)膜鋪片的CNV進(jìn)行體積測(cè)定,在CRRR干預(yù)組和對(duì)照組的比較中沒有發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異,(P0.05)。結(jié)論:1、CRRR干預(yù)組相對(duì)于對(duì)照組而言,IL-10在mRNA水平的表達(dá)和蛋白表達(dá)均顯著增加。2、CRRR在此方劑中的作用是因?yàn)镮L-10的抗炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)等一系列作用。3、CRRR在此方劑中的作用也可能是因?yàn)镃RRR本身的止血作用以及和方劑中其他藥物成分的協(xié)同作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R276.7;R-332

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本文編號(hào)：1400296