本文關(guān)鍵詞：腮腺炎病毒誘導(dǎo)小鼠睪丸天然免疫反應(yīng)的機制　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 腮腺炎病毒 睪丸 模式識別受體 天然免疫反應(yīng) 自噬

【摘要】：背景與目的：腮腺炎病毒(mumps virus, MuV)感染常引發(fā)睪丸炎,導(dǎo)致男性不育。雖然疫苗的使用已有效地控制了腮腺炎病毒的大范圍流行,但近來臨床上腮腺炎病毒感染并發(fā)的睪丸炎有復(fù)發(fā)趨勢。認識MuV誘導(dǎo)睪丸天然免疫反應(yīng)的機制,可為疾病防治提供線索。本文利用小鼠為模型,研究MuV誘導(dǎo)睪丸天然免疫反應(yīng)的機制及其在睪丸細胞的復(fù)制與調(diào)控。材料與方法：以C57BL/6或Toll樣受體(Toll-like receptor, TLR)基因敲除小鼠(TLR2-/-, TLR3-/-和TLR4-/-)為模型,分離原代睪丸細胞。采用結(jié)晶紫染色感染的Vero細胞,測定病毒滴度。實時定量RT-PCR檢測基因表達水平,ELISA測定細胞因子的濃度水平,以及Western blot,免疫組織化學(xué)和免疫熒光的方法檢測蛋白的表達水平與細胞分布。并結(jié)合RNA干擾技術(shù)研究相關(guān)基因的功能。結(jié)果：MuV可通過TLR2和RIG-I信號通路誘導(dǎo)Sertoli及Leydig細胞產(chǎn)生天然免疫反應(yīng),產(chǎn)生TNF-α、IL-6、MCP-1、CXCL10及Ⅰ型干擾素(IFN-α和IFN-p)等細胞因子,而不能誘導(dǎo)生精細胞產(chǎn)生這些細胞因子。MuV感染后,Sertoli細胞產(chǎn)生的炎癥因子及趨化因子水平較Leydig細胞高,但IFN-a與IFN-β水平要低于Leydig細胞。體內(nèi)實驗證實,睪丸原位感染MuV可誘發(fā)睪丸局部天然免疫反應(yīng),并抑制Leydig細胞合成睪酮。MuV能夠感染多種睪丸細胞,包括Sertoli、Leydig、巨噬細胞和生精細胞,但MuV在不同細胞中的復(fù)制效率存在差異,這與細胞特異的抗病毒防御機制有關(guān)。MuV在Sertoli細胞中能快速復(fù)制并持續(xù)存在,在Leydig細胞和巨噬細胞中也有顯著性的復(fù)制,但在生精細胞中則檢測不到病毒的復(fù)制。Sertoli, Leydig,和巨噬細胞主要依靠產(chǎn)生Ⅰ型干擾素和抗病毒蛋白來抵御病毒感染,生精細胞則是依賴自身高水平的自噬來限制病毒的復(fù)制。結(jié)論：MuV能夠誘導(dǎo)睪丸Sertoli及Leydig細胞產(chǎn)生天然免疫反應(yīng),且這一過程由TLR2和RIG-I信號通路介導(dǎo)。MuV可以感染睪丸細胞并進行復(fù)制,受不同細胞的抗病毒機制調(diào)節(jié)。以上結(jié)果為認識MuV誘導(dǎo)睪丸細胞的天然免疫反應(yīng)及睪丸的抗病毒防御機制提供了新思路。
[Abstract]:Background & objective: mumps virus (Muv) infection often causes orchitis. Causes male infertility. Although the use of the vaccine has been effective in controlling the widespread prevalence of mumps virus. But recently, the mumps virus infection complicated with orchitis has a tendency to recur. Understanding the mechanism of MuV induced testicular innate immune response can provide clues for the prevention and treatment of the disease. To study the mechanism of testicular innate immune response induced by MuV and its replication and regulation in testicular cells. Materials and methods: C57BL / 6 or Toll like receptor (C57BL / 6). Toll-like receptor. Primary testicular cells were isolated from TLR2-r-, TLR3-r- and TLR4-r- by using crystal violet staining of Vero cells. The viral titer was measured. The gene expression level was detected by real-time quantitative RT-PCR. The concentration of cytokines was measured by Elisa, and the Western blot was measured. Immunohistochemical and immunofluorescence methods were used to detect the expression level and cell distribution of proteins. The function of related genes was studied by RNA interference technique. Results:. MuV can induce the innate immune response of Sertoli and Leydig cells through TLR2 and RIG-I signaling pathway. Cytokines such as TNF- 偽, IL-6, MCP-1, CXCL10 and IFN- 偽 and IFN-p were produced. However, the levels of inflammatory and chemokines produced by Sertoli cells were higher than those of Leydig cells. However, the levels of IFN-a and IFN- 尾 were lower than those of Leydig cells. In vivo, testicular in situ infection with MuV could induce local innate immune response of testis. Inhibiting the synthesis of testosterone by Leydig cells can infect many testicular cells, including Sertoli Leydigs, macrophages and spermatogenic cells. However, the replication efficiency of MuV in different cells is different, which is related to the cell-specific anti-virus defense mechanism. MuV can replicate rapidly and persist in Sertoli cells. There was also significant replication in Leydig cells and macrophages, but not in spermatogenic cells. Sertoli, Leydig was not detected in spermatogenic cells. Macrophages and macrophages mainly rely on the production of interferon type I and antiviral proteins to resist viral infection. Spermatogenic cells are dependent on high levels of autophagy to limit the replication of the virus. Conclusion: Muv can induce the innate immune response of Sertoli and Leydig cells in testis. And this process is mediated by TLR2 and RIG-I signaling pathway. MuV can infect testicular cells and replicate. The above results provide a new idea for understanding the innate immune response of testicular cells induced by MuV and the antiviral defense mechanism of testis.
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R392

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄭慶偉;;中國科學(xué)院揭示果蠅天然免疫反應(yīng)新機制[J];農(nóng)藥市場信息;2014年09期

2 孫建中,郭峰,丁蘇蘇,黃桂芬;紅細胞對細菌的天然免疫反應(yīng)比較實驗研究[J];深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志;2000年06期

3 劉爭輝;韓代書;;模式識別受體介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)獲得性免疫的機理[J];中國組織化學(xué)與細胞化學(xué)雜志;2013年06期

4 刁勇;許瑞安;;重組腺相關(guān)病毒載體誘導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)及機制[J];微生物學(xué)報;2012年05期

5 ;局部糖皮質(zhì)激素增強鼻黏膜上皮細胞的天然免疫反應(yīng)[J];今日藥學(xué);2010年12期

6 李麗;;IL-4誘導(dǎo)小鼠pDC產(chǎn)生IFN-γ[J];中國腫瘤生物治療雜志;2005年04期

7 劉靖華,趙克森;TLR與天然免疫反應(yīng)[J];免疫學(xué)雜志;2001年S1期

8 郭峰,李聞捷,花美仙,張建榮,孫蕾,錢寶華;抗原激活紅細胞天然免疫反應(yīng)主干道血脂含量變化實驗研究[J];深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志;2005年01期

9 周昌華;;新生兒臍帶血單核細胞對胃腸道正常菌群的天然免疫反應(yīng)[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);2003年05期

10 田春敏;李培進;程剛;馮淑華;鄭淑英;;天然免疫反應(yīng)與SARS發(fā)病的探討[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2007年03期

相關(guān)會議論文 前6條

1 張樂之;郭峰;徐玉蓮;花美仙;錢寶華;許育;;免疫原快速激活紅細胞天然免疫反應(yīng)促白細胞分泌IL-8仿真實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2008年

2 李盛安;向陽;王嚴戒;劉杰;李文輝;張云;;眼鏡王蛇抗菌肽OH-CATH30選擇性地調(diào)節(jié)天然免疫反應(yīng)抵御細菌感染[A];第十一屆中國生物毒素研究及醫(yī)藥應(yīng)用年會論文摘要集[C];2013年

3 趙敬湘;王字玲;;DNA損傷反應(yīng)通過NKG2D配體調(diào)節(jié)天然免疫反應(yīng)的機制[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

4 歐陽松應(yīng);宋先強;王丫丫;茹衡;Neil Shaw;姜艷;牛鋒鋒;朱艷平;邱偉成;Kislay Parvatiyar;李揚;張榮光;程根宏;劉志杰;;接頭蛋白STING二聚體形成和c-di-GMP結(jié)合的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)[A];中國晶體學(xué)會第五屆全國會員代表大會暨學(xué)術(shù)大會（大分子分會場）論文摘要集[C];2012年

5 郭峰;錢寶華;花美仙;張樂之;張軍;許育;;免疫原快速激活系統(tǒng)血液天然免疫反應(yīng)血細胞CD_(35)和IL-8含量變化仿真實驗研究[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

6 蔣文淵;方敬愛;孫艷艷;張曉東;劉文媛;常沁濤;王蕊花;王月香;李慧;劉婷;;Toll受體與臨床疾病的研究進展[A];2010中國醫(yī)師協(xié)會中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師大會摘要集[C];2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前8條

1 賈雪;TRIM14調(diào)控天然免疫反應(yīng)機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

2 程麗靜;模式識別受體介導(dǎo)的小鼠附睪天然免疫反應(yīng)[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

3 吳晗;腮腺炎病毒誘導(dǎo)小鼠睪丸天然免疫反應(yīng)的機制[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

4 李暉;Toll樣受體和NF-κB在HSV-1感染人角膜上皮細胞天然免疫反應(yīng)中的作用[D];武漢大學(xué);2004年

5 王青;可溶性白細胞介素6受體介導(dǎo)的DNA和RNA病毒天然免疫反應(yīng)機制研究[D];武漢大學(xué);2013年

6 鄭月娟;接頭蛋白Gab1通過PI3K途徑促進TLRs和RIG-I介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)[D];浙江大學(xué);2009年

7 商濤;Leydig細胞中Toll樣受體（TLR）介導(dǎo)的睪丸天然免疫反應(yīng)[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

8 蘇利波;鼠多形螺旋線蟲感染對宿主抗細菌天然免疫反應(yīng)的調(diào)控研究[D];吉林大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 陳志龍;MDRV感染誘導(dǎo)宿主天然免疫反應(yīng)的機理研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

，

本文編號：1359901