本文關鍵詞：用于膜片鉗研究的乳鼠竇房結(jié)細胞的分離與鑒定　出處：《南方醫(yī)科大學學報》2013年03期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的比較"酶解+差速貼壁"法和"酶解+差速貼壁+5-溴脫氧尿嘧啶核苷(常規(guī)培養(yǎng))"法體外分離培養(yǎng)乳鼠竇房結(jié)細胞,尋找可行的用于膜片鉗實驗的分離方法。方法取Wistar乳鼠的竇房結(jié)組織,分別采用"酶解+差速貼壁"和常規(guī)培養(yǎng)法分離培養(yǎng)竇房結(jié)細胞,觀察細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、搏動頻率、膜片鉗實驗難易程度及成功率。同樣方法分離培養(yǎng)心房肌細胞作為對照。結(jié)果培養(yǎng)的竇房結(jié)細胞中梭形細胞最多、心房肌細胞中三角形細胞最多。兩種方法分離的竇房結(jié)細胞中均為梭形細胞最多并均可記錄到自發(fā)性動作電位,其中"酶解+差速貼壁"法分離的細胞活性更好,進行膜片鉗實驗的成功率更高。結(jié)論"酶解+差速貼壁"法能成功分離出乳鼠竇房結(jié)細胞,操作步驟簡單,細胞損傷小、活性好,能更好地進行膜片鉗實驗研究。
[Abstract]:Objective to compare the isolation and culture of sinoatrial node cells from neonatal rats by "differential adherence" method and "5-bromodeoxyuridine (conventional culture) method" in vitro. Methods sinoatrial node cells were isolated from the sinoatrial node of Wistar suckling rats and cultured by "differential adherence" and conventional culture method. The morphology, pulsatile frequency, the degree of difficulty and success rate of patch clamp test were observed. The same method was used to isolate and culture atrial myocytes as control. Results the fusiform cells were the most in sinoatrial node cells. Triangular cells were the most in atrial myocytes. The number of spindle cells in sinoatrial node cells separated by both methods was the most and spontaneous action potentials were recorded. The cell activity was better and the success rate of patch clamp experiment was higher. Conclusion the method of "differential adherence by enzyme hydrolysis" can successfully isolate sinoatrial node cells from neonatal rats, and the procedure is simple. The cell damage is small, the activity is good, and the patch clamp experiment can be carried out better.
【作者單位】： 中國中醫(yī)科學院廣安門醫(yī)院心內(nèi)科;解放軍總醫(yī)院老年心血管病研究所;
【基金】：北京市自然科學基金(7102135)
【分類號】：R363
【正文快照】： 竇房結(jié)是心臟的正常起搏點,竇房結(jié)起搏細胞的自發(fā)性搏動調(diào)控心臟的正常生理活動,細胞膜上各種離子通道的復雜活動是竇房結(jié)電生理機制的基礎[1-3],目前多處于組織細胞及分子生物學相關研究水平[4-6]。利用膜片鉗技術(shù)進行離子通道學研究是個里程碑式的發(fā)展[7],竇房結(jié)細胞離子通

【參考文獻】

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【二級參考文獻】

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