本文關(guān)鍵詞：白念珠菌磷酸甘油酸激酶1的原核表達(dá)及免疫原性分析　出處：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2013年10期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的構(gòu)建白念珠菌基因磷酸甘油酸激酶1(PGK-1)基因的原核表達(dá)質(zhì)粒并誘導(dǎo)其表達(dá),對(duì)其免疫原性進(jìn)行分析。方法 PCR法獲取白念珠菌SC5314的PGK-1基因,插入原核表達(dá)載體pET30a中,以重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染感受態(tài)細(xì)胞E.coli BL21,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)后,SDS-PAGE檢測(cè)蛋白的表達(dá)情況,并用Western blot法驗(yàn)證。用純化獲取的重組蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA對(duì)蛋白的免疫原性進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果成功構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒pET-30a-pgk-1,誘導(dǎo)后表達(dá)的重組蛋白相對(duì)分子質(zhì)量(M r)約為54 810。ELISA檢測(cè)抗體效價(jià)約為1∶1 024。結(jié)論成功獲得白念珠菌PGK-1重組蛋白,該蛋白具有良好的免疫原性。
[Abstract]:Objective to construct the Candida albicans gene phosphoglycerate kinase 1 (PGK-1) prokaryotic expression plasmid gene and its immunogenicity analysis. Methods the PGK-1 gene of Candida albicans SC5314 was obtained by PCR. The PGK-1 gene was inserted into prokaryotic expression vector pET30a. The recombinant plasmid was transfected into the competent cells E.coli BL21, after IPTG induced expression, SDS-PAGE was used to detect the expression of protein, and verified by Western blot method. The recombinant protein obtained by purification was used to immunize BALB/c mice, and ELISA was used to evaluate the immunogenicity of the protein. Results the prokaryotic expression plasmid pET-30a-pgk-1 was successfully constructed, and the relative molecular mass of recombinant protein (M R) expressed after induction was about 54810. The titer of ELISA was about 1: 1024. Conclusion the recombinant protein of Candida albicans PGK-1 has been successfully obtained. The protein has good immunogenicity.
【作者單位】： 解放軍白求恩國(guó)際和平醫(yī)院檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)科;
【基金】：河北省自然科學(xué)基金(C2010001882)
【分類號(hào)】：R392-33
【正文快照】： 念珠菌是真菌感染最常見的病原體,可引起皮膚、黏膜感染,也可侵入深部器官導(dǎo)致危及生命的重癥侵襲性感染。侵襲性念珠菌病(invasive candidia-sis,IC)是指由念珠菌屬病原菌引起的系統(tǒng)性真菌感染,其中念珠菌血流感染(bloodstream infection,BSI)占醫(yī)院獲得BSI中的第4位,在重癥

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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