人脂聯(lián)素基因啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因載體的構(gòu)建
本文關(guān)鍵詞:人脂聯(lián)素基因啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因載體的構(gòu)建 出處:《世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化》2013年01期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: 脂聯(lián)素基因 啟動(dòng)子 克隆 人基因組DNA 熒光素酶報(bào)告基因
【摘要】:目的:克隆不同長度人脂聯(lián)素基因(AD)啟動(dòng)子片段,構(gòu)建含人AD啟動(dòng)子片段的熒光素酶報(bào)告基因載體并進(jìn)行測序鑒定。方法:利用PCR技術(shù)從人全血基因組DNA中擴(kuò)增出AD啟動(dòng)子片段,經(jīng)純化酶切后克隆入載體pGL-3 basic中,形成重組質(zhì)粒,篩選陽性克隆進(jìn)行測序,并與GenBank比對(duì)。結(jié)果:從人全血基因組DNA中PCR擴(kuò)增得到1.1 kb和2.1 kb AD啟動(dòng)子片段,構(gòu)建2種報(bào)告基因載體,將其命名為AD promoter1.1-pGL-3 basic和AD promoter2.1-pGL-3 basic,經(jīng)測序證實(shí)所插入的目的片段與GenBank檢索的人AD啟動(dòng)子序列99.6%匹配。結(jié)論:成功構(gòu)建了含人AD啟動(dòng)子片段的報(bào)告基因載體。
【作者單位】: 河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院;河南中醫(yī)學(xué)院第一臨床醫(yī)學(xué)院;河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院/河南省病毒性疾病中醫(yī)藥防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:鄭州市科技公關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(0910SGYS33391-1):以脂肪細(xì)胞分泌因子為靶點(diǎn)的減肥中藥初步篩選,負(fù)責(zé)人:宰軍華
【分類號(hào)】:R346
【正文快照】: 近年來實(shí)驗(yàn)研究表明,脂肪組織是一個(gè)代謝活躍、功能復(fù)雜的內(nèi)分泌器官,可以產(chǎn)生多種具有生物活性的物質(zhì),如脂聯(lián)素(Adiponectin,AD)、瘦素(Leptin)、纖溶酶原激活物抑制因子(Plasminogen ac-tivator inhibitor 1,PAI-1)、抵抗素(Resistin)、白介素6(Interleukin-6,IL-6)和腫瘤
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