本文關(guān)鍵詞：Axl-siRNA核轉(zhuǎn)染對(duì)髓源性DC前體細(xì)胞分化的影響　出處：《華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2013年05期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的將Axl(Anexelekto)-siRNA(small interfering RNA)序列核轉(zhuǎn)染于髓源性樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC)前體細(xì)胞中,觀察轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞生長(zhǎng)及分化情況。方法構(gòu)建Axl-siRNA序列,用核轉(zhuǎn)染法將此序列轉(zhuǎn)染于小鼠骨髓原代細(xì)胞并誘導(dǎo)向DC分化;根據(jù)是否轉(zhuǎn)染Axl-siRNA,將實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組和Axl-siRNA核轉(zhuǎn)染組;轉(zhuǎn)染后熒光顯微鏡觀察細(xì)胞熒光水平以評(píng)估轉(zhuǎn)染效率;通過(guò)錐蟲藍(lán)染色觀察細(xì)胞的存活情況;觀察細(xì)胞的形態(tài)變化,記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況,繪制生長(zhǎng)曲線;轉(zhuǎn)染后第8天流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC的表面標(biāo)志CD11c+。結(jié)果轉(zhuǎn)染后1~3d熒光表達(dá)率分別為(70.5±6.3)%、(72.6±7.3)%、(68.8±6.5)%,而后熒光逐漸減弱并淬滅;核轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的死亡率為(21.2±5.4)%;空白對(duì)照組細(xì)胞在培養(yǎng)的前3d內(nèi)的生長(zhǎng)曲線呈對(duì)數(shù)增長(zhǎng),第4至6天,細(xì)胞數(shù)穩(wěn)定在(2.38~2.47)×106/孔,培養(yǎng)后第7、8天細(xì)胞數(shù)略有下降,為(2.23~2.31)×106/孔;Axl-siRNA核轉(zhuǎn)染組細(xì)胞生長(zhǎng)曲線也呈現(xiàn)相同的趨勢(shì),但與空白對(duì)照組相比每階段的細(xì)胞計(jì)數(shù)略有減少;細(xì)胞培養(yǎng)8d后,空白對(duì)照組和Axl-siRNA核轉(zhuǎn)染組CD11c+的細(xì)胞百分比分別為(70.28±6.13)%和(67.53±7.45)%。結(jié)論 Axl-siRNA核轉(zhuǎn)染法對(duì)髓源性DC前體細(xì)胞具有較高的轉(zhuǎn)染效率,不影響DC的生長(zhǎng)和分化;Axl-siRNA核轉(zhuǎn)染法是研究DC功能的一種有效手段。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院器官移植研究所 衛(wèi)生部器官移植重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 器官移植教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;海軍工程大學(xué)海工醫(yī)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81072441)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC)在免疫應(yīng)答中起著重要作用。通過(guò)對(duì)DC分化基因進(jìn)行干預(yù),可以影響DC的成熟,進(jìn)而調(diào)控DC的抗原提呈能力。由骨髓原代細(xì)胞中的DC前體細(xì)胞(pre-DC)分化獲取DC,是一種常規(guī)、穩(wěn)定的方法[1]。在原代細(xì)胞的分化干預(yù)中,脂質(zhì)體法效率較低,慢病毒載體可感

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 劉燕;彭聿平;黃彥;黃慧偉;邱一華;;淋巴細(xì)胞不同轉(zhuǎn)染方法比較[J];交通醫(yī)學(xué);2010年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 吳寶明;李俊;;黃芪多糖在免疫調(diào)節(jié)中的作用[J];安徽醫(yī)藥;2008年07期

2 羅凱鴻,何鈞瓏;珍靈口服液的主要藥效與毒性研究[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年06期

3 邵茜雯;陳寶安;朱梁軍;杜娟;束永前;邵澤葉;;CD3AK/iNOS細(xì)胞對(duì)白血病細(xì)胞體外殺傷的研究[J];癌癥;2006年01期

4 梁蓓蓓;劉華鋼;曹俊濤;;仙人掌果多糖對(duì)S_(180)荷瘤小鼠抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];癌癥;2008年06期

5 黃恒;沈若武;季愛玉;梅光東;;大鼠坐骨神經(jīng)損傷修復(fù)后Th1/Th2細(xì)胞因子的表達(dá)[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年02期

6 徐明輝;陳智平;秦雪;莫武寧;王立秋;李若林;林發(fā)全;黃軍強(qiáng);李山;;自配試劑在COULTER流式細(xì)胞儀檢測(cè)NK細(xì)胞和B細(xì)胞中的應(yīng)用[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2009年02期

7 肖漓;石炳毅;蔡明;周文強(qiáng);;1例心臟移植受者HLA-G5表達(dá)動(dòng)態(tài)觀察[J];北京生物醫(yī)學(xué)工程;2007年04期

8 張聲生,陳明,王禾,王麗華,張曉明,鄧晉妹,劉汶,翟興紅,汪紅兵,李乾構(gòu);慢性胃病脾虛痰濕證T細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)及胃寧樂方干預(yù)治療影響的研究[J];中國(guó)醫(yī)藥學(xué)報(bào);2002年12期

9 彭新國(guó);李占全;;臍血及成人外周血淋巴細(xì)胞分化抗原和細(xì)胞因子表達(dá)能力的相關(guān)分析[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年01期

10 韓兆東;阮月芹;宋月雁;侯佃臻;孫豐潤(rùn);孔祥華;;小葉女貞對(duì)免疫功能損傷小鼠T淋巴細(xì)胞免疫功能的調(diào)節(jié)作用[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 吳煥淦;施征;王乾瑤;蔣霆輝;劉立公;施茵;;化膿灸對(duì)消化道惡性腫瘤患者免疫功能調(diào)節(jié)作用的臨床研究[A];2011中國(guó)針灸學(xué)會(huì)年會(huì)論文集（摘要）[C];2011年

2 朱勤勛;嚴(yán)雪;韓友斌;;鼠源IgG抗體F(ab')2片段及Fab片段的制備純化及其免疫活性研究[A];第五次全國(guó)免疫診斷暨疫苗學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2011年

3 劉旺華;周小青;劉建新;謝靜;楊靜宜;;急性化膿性扁桃體炎衛(wèi)分證與Th1/Th2漂移相關(guān)性研究[A];全國(guó)第十二次中醫(yī)診斷學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

4 朱云鴻;姚文虎;魏洪霞;;紅景天甙對(duì)HIV感染者外周血CD4+T細(xì)胞凋亡的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)防治艾滋病分會(huì)第八次年會(huì)論文集[C];2011年

5 魯艷芳;向希雄;劉紅艷;陳陶后;;理肺通絡(luò)合劑對(duì)支原體肺炎模型肺組織損傷等指標(biāo)的影響[A];第23屆全國(guó)中醫(yī)兒科學(xué)術(shù)研討會(huì)暨兒科名中醫(yī)講習(xí)班論文匯編[C];2006年

6 孫虹;;消銀合劑治療尋常性銀屑病的療效觀察及其對(duì)血清INF-γ、IL-10的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)皮膚科分會(huì)第五次學(xué)術(shù)年會(huì);全國(guó)中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合皮膚病診療新進(jìn)展高級(jí)研修班論文集[C];2008年

7 李霞;姚成芳;劉瑞芬;王麗;周憲賓;郭鈺琪;;宮清顆粒誘導(dǎo)藥流人早孕絨毛、蛻膜組織細(xì)胞凋亡機(jī)制探討[A];藥用植物化學(xué)與中藥有效成分分析研討會(huì)論文集（上）[C];2008年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 宗惠;活血補(bǔ)腎法調(diào)控慢性盆腔炎大鼠炎癥細(xì)胞因子及粘連相關(guān)指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2010年

2 王軍民;腫瘤干細(xì)胞樹突細(xì)胞疫苗治療腦膠質(zhì)瘤的體外實(shí)驗(yàn)及作用機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2010年

3 楊紅亞;脾腎兩虛證雙生子腦癱的生物學(xué)基礎(chǔ)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2010年

4 王瑾;抗β1-腎上腺素受體自身抗體對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖和分泌功能的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

5 李南;復(fù)蘇后多器官功能障礙家兔模型臟器功能損傷機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2011年

6 羅軍;IgA分泌細(xì)胞在IgA腎病中的分布和遷移研究[D];華中科技大學(xué);2011年

7 周英武;人參皂苷Rg1對(duì)樹突狀細(xì)胞效應(yīng)與分子機(jī)制的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

8 肖亮;Tim-1-Fc抑制同種移植物排斥反應(yīng)的作用與機(jī)制[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

9 陳歡;陽(yáng)離子聚合物介導(dǎo)的基因輸送在復(fù)合組織再生修復(fù)中的應(yīng)用及免疫效應(yīng)研究[D];南京大學(xué);2011年

10 張乃元;針刺對(duì)過(guò)敏性鼻炎大鼠免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)制的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉玉寧;EB病毒和巨細(xì)胞病毒感染與Ⅰ型自身免疫性肝炎的關(guān)系初探[D];鄭州大學(xué);2010年

2 劉智慧;豫籍漢人AIH-Ⅰ型和AIH-Ⅰ型-PBC重疊綜合征在HLA-DRB1和DQA1基因的遺傳易感性[D];鄭州大學(xué);2010年

3 倪金龍;外陰硬化性苔蘚與HLA-DQB1基因多態(tài)性的相關(guān)性的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2010年

4 郭彩云;不同外邪因素對(duì)小鼠免疫功能影響的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2010年

5 馬騰;熱休克法制備高效樹突狀細(xì)胞腫瘤疫苗治療小鼠乳腺癌[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2010年

6 溫志剛;抗樹，

本文編號(hào)：1318907