本文關(guān)鍵詞：大鼠腎小球足細(xì)胞的原代培養(yǎng)與鑒定　出處：《四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2013年06期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的建立一種簡(jiǎn)單適用的原代培養(yǎng)與鑒定大鼠腎小球足細(xì)胞的方法。方法通過(guò)差異過(guò)篩法收獲SD大鼠(體質(zhì)量60~100g)腎小球,2g/LⅣ型膠原酶消化腎小球,組織塊種植法將腎小球種植于添加有ITS-X(含轉(zhuǎn)鐵蛋白-亞硒酸鈉-胰島素)的K1-3T3培養(yǎng)基,9~10d后首次傳代培養(yǎng)。通過(guò)觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)合免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)角蛋白、結(jié)蛋白和Wilms瘤抑癌因子-1(WT-1)表達(dá)以鑒定足細(xì)胞。結(jié)果種植腎小球3d后,可見從腎小球內(nèi)生長(zhǎng)出來(lái)的細(xì)胞逐漸增多,9~10d后融合成鵝卵石樣外觀。傳代后的細(xì)胞變?yōu)榇蠖馄降男切渭?xì)胞,有明顯突起和微絨毛;免疫組織化學(xué)法顯示結(jié)蛋白表達(dá)呈陰性、角蛋白和WT-1表達(dá)呈陽(yáng)性,提示所培養(yǎng)的細(xì)胞為足細(xì)胞。結(jié)論種植膠原酶消化的腎小球是一種簡(jiǎn)單易行的原代培養(yǎng)大鼠腎小球足細(xì)胞方法。WT-1可作為鑒定大鼠腎小球足細(xì)胞的合適標(biāo)記。
【作者單位】： 四川大學(xué)華西第二醫(yī)院兒科;四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.30700775)資助
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 足細(xì)胞不僅是腎小球疾病的被動(dòng)受害者,而且主動(dòng)參與腎小球疾病的發(fā)生和發(fā)展。要從細(xì)胞分子水平研究足細(xì)胞生物學(xué)功能,就必須體外培養(yǎng)足細(xì)胞。然而,足細(xì)胞是高度分化的終末細(xì)胞,體外培養(yǎng)很困難。隨著基因敲除、RNA干擾技術(shù)的發(fā)展,國(guó)外已建立人[1]和小鼠[2]腎小球足細(xì)胞系。但是

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1 劉劍;李立;冉江華;張升寧;邵建春;;克隆篩選純化在大鼠脂肪源性干細(xì)胞原代培養(yǎng)中的作用[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年10期

2 郭畹華;林啟祥;;膠質(zhì)細(xì)胞成熟因子支持原代培養(yǎng)的小腦皮質(zhì)神經(jīng)元的生存[J];解剖學(xué)報(bào);1989年01期

3 潘禮龍;戴敏;王偉;;大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)的研究[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2007年03期

4 王圓圓;張文斌;龔曉兵;郭國(guó)慶;陳靜;辛莉;沈偉哉;原林;;大鼠海馬神經(jīng)元neurobasal無(wú)血清的原代培養(yǎng)方法[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年06期

5 郭蓮怡;聞穎;劉沛;;大鼠腎入球動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代培養(yǎng)及鑒定方法的研究[J];中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2008年03期

6 嵇揚(yáng),王亞南,張潤(rùn)婕;HGF對(duì)原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞的作用[J];首都醫(yī)藥;2001年06期

7 牛喜平;魯盈;楊汝春;;巢蛋白在腎小球足細(xì)胞中的研究進(jìn)展[J];浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志;2010年04期

8 賈苗;張益民;賴德源;;大鼠足細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2010年23期

9 危小焰;史仍飛;張平;;幼齡大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞原代培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志;2007年03期

10 姜大春;何國(guó)祥;劉建平;張倩;唐兵;李德;;新生SD大鼠心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)的快速簡(jiǎn)單方法及鑒定[J];西南國(guó)防醫(yī)藥;2009年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 吳艷;陳淼;王洪敏;吳雙;錢明江;王宇輝;傅小云;;HO-1對(duì)原代培養(yǎng)大鼠AEC-Ⅱ細(xì)胞凋亡及Bcl-2、p53的影響[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》更名十周年、World Journal of Emergency Medicine創(chuàng)刊一周年慶典《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第十屆組稿會(huì)、第三屆急診醫(yī)學(xué)青年論壇論文匯編[C];2011年

2 劉潛;李靜;金先慶;Janifier Carter;Sulpicio G. Soriano;;大鼠未成熟神經(jīng)細(xì)胞體外模型的建立[A];中國(guó)西南地區(qū)第九屆小兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

3 寶軼;石勇銓;鄒俊杰;趙瑛;劉志民;;AGES對(duì)原代培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞的Smad2/3及APP表達(dá)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

4 高霞;徐虹;劉海梅;饒佳;查錫良;;血管生成素樣蛋白3對(duì)足細(xì)胞骨架重排影響的可能信號(hào)通路分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編（上冊(cè)）[C];2010年

5 欒麗菊;王珂;楊立元;張艷;張衛(wèi)光;秦麗華;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白7對(duì)大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧性損傷保護(hù)作用的研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2011年年會(huì)論文文摘匯編[C];2011年

6 饒佳;徐虹;楊海春;郝傳明;;血管形成素樣蛋白3在嘌呤霉素誘導(dǎo)足細(xì)胞損傷中作用及可能機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

7 饒佳;徐虹;楊海春;郝傳明;;血管形成素樣蛋白3在嘌呤霉素誘導(dǎo)足細(xì)胞損傷中作用及可能機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

8 李鴻珠;徐長(zhǎng)慶;韓麗萍;姜春明;李弘;郭津;李光偉;高君;;多巴胺受體對(duì)大鼠心肌缺血/再灌注損傷的影響[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)受體和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)專業(yè)委員會(huì)暨消化專業(yè)委員會(huì)聯(lián)合學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

9 范青鋒;丁潔;張敬京;管娜;鄧江紅;;Podocin基因敲低對(duì)小鼠足細(xì)胞nephrin和α-actinin表達(dá)分布的影響[A];“中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2004年年會(huì)”暨“第二屆全國(guó)中青年腎臟病學(xué)術(shù)會(huì)議”論文匯編[C];2004年

10 朱平;金連弘;宋雁南;李學(xué)均;遲鳳琴;;人胚胎腎臟足細(xì)胞發(fā)育的超微結(jié)構(gòu)研究[A];第八次全國(guó)電子顯微學(xué)會(huì)議論文摘要集（Ⅰ）[C];1994年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 阿勝;死亡陰影下孕育生機(jī)無(wú)限[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

2 葛素紅;我國(guó)首次完成——神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

3 本報(bào)特約撰稿人 陸志城;用大鼠還是用小鼠？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

4 孫慶偉;腎臟是怎樣生成尿的[N];家庭醫(yī)生報(bào);2007年

5 王忠田;實(shí)驗(yàn)細(xì)胞有望取代小白鼠[N];健康報(bào);2007年

6 ;接受針刺大鼠脂肪條帶結(jié)構(gòu)提取物可使受體鼠產(chǎn)生類針刺效應(yīng)[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2005年

7 張?zhí)锟?器官移植：亮點(diǎn)閃現(xiàn)[N];文匯報(bào);2001年

8 福州第三中學(xué) 閆笠 指導(dǎo)老師 魏麗真;音樂對(duì)束縛應(yīng)激大鼠巨噬細(xì)胞功能影響的研究[N];福建科技報(bào);2007年

9 葛進(jìn);新神經(jīng)細(xì)胞對(duì)空間記憶力有影響[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

10 本報(bào)特約撰稿人 陸志城;輔助生殖技術(shù)的前沿之爭(zhēng)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙舒武;缺氧對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞的損傷及EPO、葡萄糖對(duì)其保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2006年

2 朱國(guó)貞;上調(diào)Intermedin基因?qū)Υ笫竽I臟缺血再灌注保護(hù)作用及機(jī)制的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

3 王恬竹;CRMP-2的磷酸化對(duì)缺血再灌注腦損傷后神經(jīng)再生的影響及機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

4 師曉燕;豐富生存環(huán)境對(duì)大鼠大腦海馬老年性改變作用的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

5 陸長(zhǎng)亮;大鼠視上核對(duì)胃機(jī)能的調(diào)控作用及其機(jī)制的研究[D];山東師范大學(xué);2011年

6 劉燕青;HCN4在微波輻射致大鼠竇房結(jié)損傷中的作用研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2013年

7 譚濤;低頻rTMS增強(qiáng)Aβ模型大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

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