本文關鍵詞：大鼠腎小球足細胞的原代培養(yǎng)與鑒定　出處：《四川大學學報(醫(yī)學版)》2013年06期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的建立一種簡單適用的原代培養(yǎng)與鑒定大鼠腎小球足細胞的方法。方法通過差異過篩法收獲SD大鼠(體質量60~100g)腎小球,2g/LⅣ型膠原酶消化腎小球,組織塊種植法將腎小球種植于添加有ITS-X(含轉鐵蛋白-亞硒酸鈉-胰島素)的K1-3T3培養(yǎng)基,9~10d后首次傳代培養(yǎng)。通過觀察細胞形態(tài)結合免疫組織化學SP法檢測角蛋白、結蛋白和Wilms瘤抑癌因子-1(WT-1)表達以鑒定足細胞。結果種植腎小球3d后,可見從腎小球內生長出來的細胞逐漸增多,9~10d后融合成鵝卵石樣外觀。傳代后的細胞變?yōu)榇蠖馄降男切渭毎?有明顯突起和微絨毛;免疫組織化學法顯示結蛋白表達呈陰性、角蛋白和WT-1表達呈陽性,提示所培養(yǎng)的細胞為足細胞。結論種植膠原酶消化的腎小球是一種簡單易行的原代培養(yǎng)大鼠腎小球足細胞方法。WT-1可作為鑒定大鼠腎小球足細胞的合適標記。
【作者單位】： 四川大學華西第二醫(yī)院兒科;四川大學華西基礎醫(yī)學與法醫(yī)學院生物化學與分子生物學教研室;
【基金】：國家自然科學基金(No.30700775)資助
【分類號】：R329
【正文快照】： 足細胞不僅是腎小球疾病的被動受害者,而且主動參與腎小球疾病的發(fā)生和發(fā)展。要從細胞分子水平研究足細胞生物學功能,就必須體外培養(yǎng)足細胞。然而,足細胞是高度分化的終末細胞,體外培養(yǎng)很困難。隨著基因敲除、RNA干擾技術的發(fā)展,國外已建立人[1]和小鼠[2]腎小球足細胞系。但是

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