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BslA蛋白在減毒炭疽芽孢桿菌中的表達和功能分析

發(fā)布時間:2017-12-21 01:36

  本文關(guān)鍵詞:BslA蛋白在減毒炭疽芽孢桿菌中的表達和功能分析 出處:《軍事醫(yī)學》2013年05期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的在減毒炭疽芽孢桿菌AP422中表達BslA蛋白,并分析其生物學活性。方法利用PCR方法從炭疽芽孢桿菌中擴增出bslA基因,克隆至穿梭質(zhì)粒pDG148,采用電轉(zhuǎn)化方法將表達載體轉(zhuǎn)入減毒炭疽芽孢桿菌AP422后誘導表達重組BslA。并利用SDS-PAGE電泳、Western印跡、間接免疫熒光實驗和流式細胞術(shù)分析目標蛋白的表達,并對其進行空間定位,最后用細菌黏附實驗分析其生物學功能。結(jié)果 BslA蛋白在AP422中獲得成功表達,且目標蛋白主要表達于菌體表面。表達BslA蛋白的AP422(pDG-BslA)菌株具有黏附宿主細胞表面的能力,該黏附能力與陽性對照A16R菌株基本一致。結(jié)論在減毒炭疽芽孢桿菌AP422中實現(xiàn)了BslA蛋白的功能性表達,為進一步研究該蛋白的功能和構(gòu)建新的疫苗候選株奠定了實驗基礎(chǔ)。
【作者單位】: 沈陽藥科大學生命科學與生物制藥學院;軍事醫(yī)學科學院生物工程研究所病原微生物生物安全國家重點實驗室;
【分類號】:R378.7
【正文快照】: 炭疽芽孢桿菌S層蛋白A(B.anthracis S-layer protein A,BslA蛋白)是炭疽芽孢桿菌S層的組成部分,既是一種S層蛋白,又是一種黏附素。BslA由位于毒力大質(zhì)粒pXO1中的pXO1-90基因編碼,共652個氨基酸殘基。BslA蛋白N端45~210位氨基酸殘基之間是3個連續(xù)的保守SLH基序(surface layer

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