本文關(guān)鍵詞：微型核酶對賈第蟲組織蛋白酶B基因體外轉(zhuǎn)錄體切割效果的研究　出處：《中國病原生物學(xué)雜志》2013年04期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的檢測微型核酶對籃氏賈第鞭毛蟲(簡稱賈第蟲)組織蛋白酶B基因體外轉(zhuǎn)錄體的切割效率。方法用RNA draw軟件對賈第蟲組織蛋白酶B基因序列二級結(jié)構(gòu)進(jìn)行模擬分析,并按照微型核酶設(shè)計(jì)的原則,選取合適的核酶切割位點(diǎn),設(shè)計(jì)微型核酶序列,構(gòu)建含賈第蟲組織蛋白酶B基因短反義序列和長反義序列的兩個(gè)微型核酶嵌合型犬賈第蟲病毒重組質(zhì)粒(CRzS和CRzL),以三磷酸甘油醛脫氫酶基因的微型核酶(GRzL)和無核酶的組織蛋白酶B基因(PCB)重組質(zhì)粒作對照。將重組質(zhì)粒線性化后體外轉(zhuǎn)錄為mRNA,然后用微型核酶體外切割組織蛋白酶B基因轉(zhuǎn)錄體,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測切割效率。結(jié)果微型核酶CRzS和CRzL對組織蛋白酶B基因轉(zhuǎn)錄體切割效率分別為75.42%和83.14%,微型核酶GRzL的切割效率為0.02%,無核酶PCB切割效率為23.0%。結(jié)論微型核酶可有效切割賈第蟲組織蛋白酶B基因轉(zhuǎn)錄體,為開展體內(nèi)抑制組織蛋白酶B基因表達(dá)試驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 吉林大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31101804)
【分類號】：R382
【正文快照】： 藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(簡稱賈第蟲)感染引起人獸共患賈第蟲病,該病呈世界性分布。賈第蟲主要寄生于包括人在內(nèi)的哺乳動物、鳥類以及兩棲類等動物[1]。近年來,賈第蟲被認(rèn)為是一種機(jī)會致病性原蟲,在艾滋病患者中常有賈第蟲合并感染[2,3]。賈第蟲病毒為專性寄生在賈第蟲體內(nèi)的病毒[4],

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本文編號：1309156