本文關(guān)鍵詞：白血病干細(xì)胞的新型標(biāo)志蛋白IL1RAP雜交瘤細(xì)胞的制備及其分泌單克隆抗體的檢測(cè)　出處：《中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志》2013年06期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：本研究旨在制備針對(duì)白血病干細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)的特異性單克隆抗體并對(duì)其進(jìn)行鑒定。用重組人IL1RAP作為抗原免疫BALB/c小鼠,通過(guò)常規(guī)雜交瘤技術(shù)將免疫后的小鼠脾細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞經(jīng)PEG融合,篩選陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞株。分別應(yīng)用ELISA和Western blot法對(duì)雜交瘤細(xì)胞上清中分泌抗體進(jìn)行抗體類型、滴度和敏感性檢測(cè)。分離人外周單個(gè)核細(xì)胞,檢測(cè)所得抗體對(duì)細(xì)胞內(nèi)源性抗原的特異性。結(jié)果表明,獲得了8株可穩(wěn)定分泌IL1RAP單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,分別為3H6E10、4B6A6、8G11B5、9E9F2、10D8A7、1C7H7、1D7G11和2D3D3;抗體類型鑒定為IgG1/κ型;分泌的單克隆抗體能特異性識(shí)別單個(gè)核細(xì)胞表達(dá)的IL1RAP。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)成功制備了可穩(wěn)定分泌IL1RAP單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞及其特異性的IL1RAP單克隆抗體,為將來(lái)有效清除體內(nèi)白血病干細(xì)胞提供了新途徑。
【作者單位】： 徐州醫(yī)學(xué)院移植免疫實(shí)驗(yàn)室;徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院血液科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào)81200376,81270637) 中國(guó)博士后科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào)2012M510141) 江蘇省"六大人才高峰"資助(編號(hào)2012-WSN-082) 徐州醫(yī)學(xué)院院長(zhǎng)專項(xiàng)人才基金(編號(hào)2012KJZ13)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)是最近報(bào)道的白血病干細(xì)胞(LSC)的表面標(biāo)志[1,2]。IL1RAP基因位于3q28,表達(dá)翻譯形成膜IL1RAP和可溶性IL1RAP兩種形式。IL1RAP在慢性髓系白血病(CML)病人的LSC上表達(dá)顯著升高,但在正常造血干細(xì)胞(HSC)上不表達(dá)或僅低表達(dá),而在正常的造

【共引文獻(xiàn)】

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