細粒棘球蚴轉(zhuǎn)化生長因子βⅠ型受體胞內(nèi)域原核表達載體的構(gòu)建及蛋白純化
發(fā)布時間:2017-12-19 12:03
本文關(guān)鍵詞:細粒棘球蚴轉(zhuǎn)化生長因子βⅠ型受體胞內(nèi)域原核表達載體的構(gòu)建及蛋白純化 出處:《中國病原生物學雜志》2013年12期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的構(gòu)建細粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)轉(zhuǎn)化生長因子βⅠ型受體胞內(nèi)域(transforming growth factor-βtypeⅠreceptor intracellular domain,TβRⅠ-Ⅰ)原核表達載體,誘導表達并純化EgTβRⅠ-Ⅰ蛋白。方法采集感染Eg的羊源原頭蚴,Trizol法提取原頭蚴總RNA,RT-PCR擴增EgTβRⅠ-Ⅰ基因片段,克隆至原核表達載體pET28a(+),經(jīng)限制性內(nèi)切酶雙酶切和序列鑒定正確的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌感受態(tài)細胞BL21,異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導表達,經(jīng)鎳柱親和層析純化蛋白,SDS-PAGE檢測目的蛋白的表達。結(jié)果 pET28a-EgTβRⅠ-Ⅰ原核表達載體構(gòu)建成功,經(jīng)IPTG誘導可表達EgTβRⅠ-Ⅰ蛋白(分子質(zhì)量單位為48ku),純化后獲得大量純度較高的可溶性蛋白。結(jié)論成功構(gòu)建pET28a-EgTβRⅠ-Ⅰ原核表達載體,并獲得純化的可溶性目的蛋白,為研究EgTβRⅠ-Ⅰ在Eg體內(nèi)的生物學作用及其作用方式奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院 新疆重大疾病醫(yī)學重點實驗室-省部共建國家重點實驗室培育基地 新疆包蟲病基礎(chǔ)醫(yī)學重點實驗室;新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院肝膽腔鏡外科;
【基金】:國家自然科學基金項目(No.81260252,81101271) 長江學者和創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃(No.IRT1181)
【分類號】:R392
【正文快照】: 棘球蚴病又稱包蟲病(Hydatid disease)是棘球絳蟲的幼蟲感染所致的嚴重人畜共患寄生蟲病,呈世界性分布[1]。我國存在的包蟲病類型主要是由細粒棘球蚴感染所致的囊型包蟲病和多房棘球蚴感染所致的泡型包蟲病,其中尤以囊型包蟲病多見,約占包蟲病病人總數(shù)的97%以上[2]。包蟲在與
【共引文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 阿依甫汗·阿汗;吐爾干艾力·阿吉;邵英梅;溫浩;哈麗婭;;棘球蚴抗原B對小鼠1型糖尿病拮抗作用研究[J];吉林醫(yī)學;2014年01期
2 龐楠楠;劉朝華;張峰波;朱sソ,
本文編號:1307881
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