本文關(guān)鍵詞：小凹蛋白-1下調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞外鈣敏感受體介導(dǎo)的鈣內(nèi)流的作用機(jī)制

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【摘要】：目的:研究小凹蛋白-1(Cav-1)對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)細(xì)胞外鈣敏感受體(CaR)介導(dǎo)鈣內(nèi)流的作用機(jī)制。方法:取2～3代HUVECs,采用細(xì)胞膜穴樣凹陷(caveolae)結(jié)構(gòu)破壞劑非律平(filipin)和甲基-β-環(huán)糊精(MβCD)及Cav-1基因沉默,配合CaR激動(dòng)劑精胺(spermine)和負(fù)性變構(gòu)調(diào)節(jié)劑Calhex 231。Fura-2/AM負(fù)載檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度([Ca2+]i)。Western blotting檢測(cè)HUVECs中Cav-1以及CaR蛋白表達(dá),免疫共沉淀技術(shù)檢測(cè)Cav-1和CaR相互作用。用蔗糖密度梯度離心的方法提取并鑒定caveolae,Western blotting檢測(cè)caveolae的標(biāo)志蛋白Cav-1和浮艦蛋白1(flotillin-1)及CaR表達(dá)。同時(shí)檢測(cè)胞膜、胞漿和高爾基體標(biāo)志蛋白:轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)、β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)和β-外被體蛋白(β-COP)。檢測(cè)富含Cav-1膜(CEM)區(qū)、非caveolae I區(qū)(NCF I)和II區(qū)(NCF II)的Cav-1和CaR表達(dá)。結(jié)果:(1)細(xì)胞外液為含鈣液時(shí),Calhex 231完全阻斷精胺刺激引起的[Ca2+]i升高(P0.05),MβCD可加強(qiáng)精胺升高[Ca2+]i的作用(P0.05)。不同濃度MβCD處理后各組Cav-1和CaR相互作用的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(2)免疫共沉淀結(jié)果顯示,各組Cav-1和CaR蛋白表達(dá)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(3)與control組比較,spermine+Ca2+組、filipin+spermine+Ca2+組和MβCD+spermine+Ca2+組CEM區(qū)的Cav-1和CaR蛋白表達(dá)均降低(P0.05),NCF I區(qū)的Cav-1和CaR蛋白表達(dá)增加(P0.05),NCF II區(qū)Cav-1蛋白表達(dá)增加(P0.05),而CaR蛋白表達(dá)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:在HUVECs中,Cav-1和CaR共定位于同一caveolae區(qū),同時(shí)Cav-1對(duì)CaR介導(dǎo)的Ca2+內(nèi)流有下調(diào)作用,其機(jī)制可能與Cav-1抑制CaR膜定位、促使其向非caveolae區(qū)轉(zhuǎn)位及減弱其對(duì)激動(dòng)劑的反應(yīng)性有關(guān)。
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院新疆地方病與民族高發(fā)病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.30860099)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 血管內(nèi)皮功能障礙是高血壓、冠心病、糖尿病等多種心腦血管疾病的共同病理機(jī)制,主要與NO的作用有關(guān),而血管內(nèi)皮細(xì)胞持續(xù)Ca2+內(nèi)流是激活內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)生成NO的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因素。細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度(intracellular Ca2+concentration,[Ca

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 王振煥;陳雄英;胡清華;鐘華;鄧峰美;何芳;;小凹蛋白-1和鈣受體在人的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年02期

2 王振煥;胡清華;鐘華;鄧峰美;陳雄英;孫志萍;何芳;;小凹蛋白-1在臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CaR介導(dǎo)NO生成中的作用和機(jī)制[J];中國(guó)病理生理雜志;2011年05期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 龔艷;胡清華;鐘華;梁霄;羅小林;何芳;;小凹蛋白-1和細(xì)胞外鈣敏感受體在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞小凹共定位研究[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年03期

2 王振煥;胡清華;鐘華;鄧峰美;何芳;;小凹蛋白-1下調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞外鈣敏感受體介導(dǎo)的鈣內(nèi)流[J];生理學(xué)報(bào);2011年01期

3 梁霄;羅小林;鐘華;胡清華;何芳;;小干擾RNA沉默細(xì)胞外鈣敏感受體抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞鈣內(nèi)流和NO生成[J];生理學(xué)報(bào);2012年03期

4 羅小林;梁霄;趙慧;王靜;吳玲玲;鐘華;何芳;;Filipin對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞小凹蛋白-1作用的研究[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年03期

5 張海洋;張會(huì)敏;;Hcy對(duì)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞eNOS和caveolin-1表達(dá)影響[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2012年05期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李光偉;邢文婧;郝靜輝;白淑芝;李宏霞;林巖;徐長(zhǎng)慶;;鈣敏感受體在缺氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖中的作用[J];中國(guó)病理生理雜志;2010年12期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 吳金鶯;盛民立;;內(nèi)皮細(xì)胞的免疫學(xué)功能[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;1991年02期

2 葉慶林;;細(xì)胞內(nèi)鈣信號(hào)[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1993年01期

3 劉健,何作云,王培勇;新生大鼠心肌細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)的空間分布及調(diào)控的離體研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2001年07期

4 夏鋒,何振平,李昆,陳莉,王小麗,董家鴻;肝細(xì)胞內(nèi)游離鈣分布及鈣振蕩的亞細(xì)胞特征[J];中華肝臟病雜志;2003年02期

5 王維蓉;林蓉;楊玉琮;甘偉杰;劉俊田;呂社民;;人CD40分子基因轉(zhuǎn)染人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV-304[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年12期

6 楊麗霞;郭瑞威;石燕昆;齊峰;郭傳明;;內(nèi)皮細(xì)胞中血管緊張肽Ⅱ?qū)?nèi)皮型一氧化氮合酶表達(dá)的影響[J];中國(guó)急救醫(yī)學(xué);2006年01期

7 張玉英;李勇;蔣霞;范維琥;;低氧上調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞膠原ⅩⅧ和內(nèi)皮抑素的表達(dá)[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年01期

8 黃方;曾曉榮;楊艷;;平滑肌細(xì)胞內(nèi)的鈣釋放通道:IP_3R[J];醫(yī)學(xué)綜述;2007年02期

9 趙文紅;莊穎;趙紅;張鼎;;膽固醇誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡及抑制細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究[J];癌變.畸變.突變;2007年06期

10 張麗;沈成興;馮毅;馬根山;;人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中單核細(xì)胞趨化因子1表達(dá)與糖化白蛋白的影響[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年28期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 斯曉燕;趙永強(qiáng);;低密度脂蛋白、氧化型低密度脂蛋白、高密度脂蛋白對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凝血酶調(diào)節(jié)蛋白、內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體表達(dá)的影響[A];第十一屆全國(guó)血栓與止血學(xué)術(shù)會(huì)議暨血栓栓塞性疾�。ㄑㄅc止血）基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文摘要匯編及學(xué)習(xí)班講義[C];2007年

2 陳麗華;劉雪松;金伯泉;;CD226分子誘導(dǎo)HUVEC胞漿[Ca2~+]i變化的研究[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

3 陳佳;宋瑋;張英;路巖;程云鵬;劉紅陽(yáng);米芋玫;任麗麗;姜一農(nóng);;腎素前體和腎素(前體)受體在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中的作用及機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

4 馮志民;張曉峰;王宏芳;豐美福;;人NK細(xì)胞對(duì)同種和異種內(nèi)皮細(xì)胞MHCI類分子的差異識(shí)別[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第七次會(huì)議論文摘要匯編[C];1999年

5 林海龍;陳永平;鄭明華;胡萬(wàn)里;許爛漫;黃榆;;大鼠肝細(xì)胞與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞混合共微囊化的體外研究[A];第十七次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

6 王穎智;高鋒;;原代培養(yǎng)HUVEC電轉(zhuǎn)導(dǎo)siRNA進(jìn)行RNA干擾方法的建立[A];全國(guó)臨床免疫檢驗(yàn)研討會(huì)暨第六屆全國(guó)臨床免疫學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

7 劉澲雯;高鋒;;體外血管研究模型——人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞常規(guī)化培養(yǎng)方法的建立[A];全國(guó)臨床免疫檢驗(yàn)研討會(huì)暨第六屆全國(guó)臨床免疫學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

8 陶杰;閆承慧;郭鵬;吳光澤;王占勝;韓雅玲;;E1A激活基因細(xì)胞阻遏子蛋白在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

9 王曉靜;劉擁軍;盧士紅;梁琳慧;王晗;韓忠朝;;人促血液血管細(xì)胞生成素對(duì)造血干細(xì)胞與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞之間粘附功能的影響[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

10 仲悅嬌;陳寶安;黃成垠;李翠萍;高峰;費(fèi)菲;裴孝平;高沖;丁家華;孫耘玉;程堅(jiān);王駿;趙剛;馬燕;;血小板衍生膜微粒對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響[A];第11次中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文匯編[C];2007年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 記者姚春雨通訊員錢勇;人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞重建成功[N];健康報(bào);2003年

2 通訊員 錢勇 記者 范又;我國(guó)成功重建永生化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞[N];光明日?qǐng)?bào);2003年

3 錢勇;永生化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞重建成功[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

4 記者唐先武 特約記者錢勇;永生化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞重建成功[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 劉玉鳳;超聲介導(dǎo)微泡造影劑對(duì)細(xì)胞和微血管以及基因在HUVEC內(nèi)轉(zhuǎn)染率的影響的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2006年

2 劉偉;腎上腺髓質(zhì)素對(duì)LPS抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞TFPI基因表達(dá)的影響及其分子機(jī)制[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

3 崔培林;褪黑素對(duì)體外培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

4 賀軍;BDNF對(duì)大腦皮質(zhì)神經(jīng)元鈣信號(hào)調(diào)控作用研究[D];華中科技大學(xué);2005年

5 趙媛;飛秒激光刺激誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞鈣信號(hào)及其通信研究[D];華中科技大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 屈順林;NOX4在人血管細(xì)胞中的表達(dá)及其在內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用[D];南華大學(xué);2005年

2 曹艷云;不同新生隱球菌菌株對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 馮丹;Omapatrilat對(duì)AngⅡ致人血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用研究[D];武漢大學(xué);2005年

4 吳建敏;人巨細(xì)胞病毒感染致動(dòng)脈粥樣硬化的分子機(jī)制的研究[D];山東大學(xué);2006年

5 祝先進(jìn);趨化因子I-TAC在移植排斥中免疫學(xué)效應(yīng)的體外研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2006年

6 肖瑞;登革病毒對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子表達(dá)的影響[D];暨南大學(xué);2006年

7 薛鳳麟;NF-κB在AngⅡ調(diào)控HUVEC細(xì)胞生存/凋亡信號(hào)通路中的作用研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2007年

8 賀國(guó)洋;NF-kB mRNA在AngⅡ誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞生存/凋亡中表達(dá)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2007年

9 李樂(lè);E-選擇素和細(xì)胞間粘附分子-1反義寡核苷酸對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞與單核細(xì)胞粘附功能的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

10 張敕;纖連蛋白及其重組肝素結(jié)合域多肽對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

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本文編號(hào)：1307730