發(fā)布時(shí)間：2017-12-18 19:30

  本文關(guān)鍵詞：EV71類病毒顆粒的表達(dá)和免疫原性的初步評(píng)價(jià)

  更多相關(guān)文章： 手足口病 EV 類病毒顆粒 Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng) 免疫評(píng)價(jià)

【摘要】：目的:運(yùn)用Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建EV71類病毒顆粒,并對(duì)形成的類病毒顆粒的免疫原性進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。方法:構(gòu)建重組桿狀病毒表達(dá)載體Bacmid-P1-3CD,轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞sf9細(xì)胞系,獲得攜帶EV71病毒結(jié)構(gòu)基因P1和3CD蛋白酶基因的重組桿狀病毒AcMNPV-P1-3CD。采用免疫熒光、Western blot及電鏡觀察等方法檢測(cè)重組病毒表達(dá)產(chǎn)物及形態(tài)學(xué)特征。表達(dá)產(chǎn)物免疫動(dòng)物后用ELISA、中和試驗(yàn)的方法對(duì)其免疫效果進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。結(jié)果:免疫熒光證明有特異性表達(dá)產(chǎn)物,Western blot結(jié)果可見大小約為39kDa的VP1特異性條帶。電鏡結(jié)果可觀察到大小約為27nm的顆粒。免疫動(dòng)物的血清ELISA抗體效價(jià)為1:776,中和抗體效價(jià)為1:588。結(jié)論:利用Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)能共表達(dá)EV71的P1和3CD基因,并能形成EV71類病毒顆粒。經(jīng)初步評(píng)價(jià),形成的EV71類病毒顆粒具有較好的免疫原性。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院;北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所;云南省重大傳染病疫苗研發(fā)實(shí)驗(yàn)室;
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 手足口病(hand foot mouth disease,HFMD)是世界范圍內(nèi)發(fā)生在嬰幼兒之間的一組由腸道病毒包括腸道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)、柯薩奇病毒A16型(coxsackievirus A group 16 strain,CA16)等引起的常見傳染病。其傳染速度較快,范圍較廣,人群普遍易感[1]。近幾十年來,

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本文編號(hào)：1305376