EV71類病毒顆粒的表達和免疫原性的初步評價
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【摘要】:目的:運用Bac-to-Bac桿狀病毒表達系統(tǒng)構(gòu)建EV71類病毒顆粒,并對形成的類病毒顆粒的免疫原性進行初步評價。方法:構(gòu)建重組桿狀病毒表達載體Bacmid-P1-3CD,轉(zhuǎn)染昆蟲細胞sf9細胞系,獲得攜帶EV71病毒結(jié)構(gòu)基因P1和3CD蛋白酶基因的重組桿狀病毒AcMNPV-P1-3CD。采用免疫熒光、Western blot及電鏡觀察等方法檢測重組病毒表達產(chǎn)物及形態(tài)學特征。表達產(chǎn)物免疫動物后用ELISA、中和試驗的方法對其免疫效果進行初步評價。結(jié)果:免疫熒光證明有特異性表達產(chǎn)物,Western blot結(jié)果可見大小約為39kDa的VP1特異性條帶。電鏡結(jié)果可觀察到大小約為27nm的顆粒。免疫動物的血清ELISA抗體效價為1:776,中和抗體效價為1:588。結(jié)論:利用Bac-to-Bac桿狀病毒表達系統(tǒng)能共表達EV71的P1和3CD基因,并能形成EV71類病毒顆粒。經(jīng)初步評價,形成的EV71類病毒顆粒具有較好的免疫原性。
【作者單位】: 中國醫(yī)學科學院;北京協(xié)和醫(yī)學院;醫(yī)學生物學研究所;云南省重大傳染病疫苗研發(fā)實驗室;
【分類號】:R392
【正文快照】: 手足口病(hand foot mouth disease,HFMD)是世界范圍內(nèi)發(fā)生在嬰幼兒之間的一組由腸道病毒包括腸道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)、柯薩奇病毒A16型(coxsackievirus A group 16 strain,CA16)等引起的常見傳染病。其傳染速度較快,范圍較廣,人群普遍易感[1]。近幾十年來,
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