本文關鍵詞：D-半乳糖對大鼠骨髓間充質干細胞衰老的影響

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【摘要】：目的:觀察D-半乳糖(D-galactose,D-gal)對骨髓間充質干細胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)衰老的影響,構建體外MSCs衰老誘導模型。方法:分離SD大鼠(7日齡)MSCs,傳代培養(yǎng)至第3代后,細胞隨機分為4組:分別為正常對照組,1 g/L,10 g/L和50 g/L D-gal衰老誘導組。對照組在正常的DMEM培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng);誘導組MSCs分別在含1 g/L、10 g/L、50 g/L D-gal的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)48 h。各組細胞培養(yǎng)結束后,衰老相關β-半乳糖苷酶染色法觀察細胞衰老變化、Western blot法檢測衰老相關蛋白p53、p21和p16表達,AO/EB雙染法檢測細胞凋亡,MTT法檢測細胞增殖,超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量檢測細胞內氧化應激水平。結果:10 g/L和50 g/L D-gal誘導組衰老相關β-半乳糖苷酶染色陽性細胞數(shù)較對照組顯著升高(P0.01),衰老相關蛋白p53、p21和p16表達明顯增高:AO/EB染色結果顯示50 g/L D-gal誘導組細胞凋亡率較對照組顯著升高(P0.01);MTT檢測結果表明10 g/L和50 g/L D-gal均能抑制MSCs增殖活性,而10 g/L和50 g/L D-gal誘導組MSCs內SOD活力較對照組明顯降低(P0.01),MDA含量顯著升高(P0.01)。結論:10 g/L和50 g/L D-gal均可誘導MSCs發(fā)生衰老變化,并促使細胞內衰老相關蛋白p53、p21和p16表達增加,細胞存活能力減弱,增殖能力降低,這可能與D-gal促使MSCs內氧化應激水平升高有關。10 g/L是D-gal誘導MSCs衰老的合適濃度。
【作者單位】： 浙江大學城市學院醫(yī)學院;杭州市第二人民醫(yī)院;
【基金】：杭州市科技發(fā)展計劃基金資助項目(20110833B11) 浙江大學城市學院大學生科研資助項目(X2013562118)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 干細胞具有自我更新及多向分化能力,對機體穩(wěn)態(tài)的維持和器官損傷的修復具有重要作用[1]。但干細胞和體內其他細胞一樣,也會衰老,衰老干細胞增殖及分化能力減弱[2-3]。MSCs(mesenchymal stem cells,MSCs)可分化為中胚層的各種細胞且經(jīng)誘導能向神經(jīng)外胚層分化,是臨床細胞移植重

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本文編號：1305105