本文關(guān)鍵詞：D-半乳糖對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞衰老的影響

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【摘要】：目的:觀察D-半乳糖(D-galactose,D-gal)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)衰老的影響,構(gòu)建體外MSCs衰老誘導(dǎo)模型。方法:分離SD大鼠(7日齡)MSCs,傳代培養(yǎng)至第3代后,細(xì)胞隨機(jī)分為4組:分別為正常對照組,1 g/L,10 g/L和50 g/L D-gal衰老誘導(dǎo)組。對照組在正常的DMEM培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng);誘導(dǎo)組MSCs分別在含1 g/L、10 g/L、50 g/L D-gal的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)48 h。各組細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后,衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶染色法觀察細(xì)胞衰老變化、Western blot法檢測衰老相關(guān)蛋白p53、p21和p16表達(dá),AO/EB雙染法檢測細(xì)胞凋亡,MTT法檢測細(xì)胞增殖,超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量檢測細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平。結(jié)果:10 g/L和50 g/L D-gal誘導(dǎo)組衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶染色陽性細(xì)胞數(shù)較對照組顯著升高(P0.01),衰老相關(guān)蛋白p53、p21和p16表達(dá)明顯增高:AO/EB染色結(jié)果顯示50 g/L D-gal誘導(dǎo)組細(xì)胞凋亡率較對照組顯著升高(P0.01);MTT檢測結(jié)果表明10 g/L和50 g/L D-gal均能抑制MSCs增殖活性,而10 g/L和50 g/L D-gal誘導(dǎo)組MSCs內(nèi)SOD活力較對照組明顯降低(P0.01),MDA含量顯著升高(P0.01)。結(jié)論:10 g/L和50 g/L D-gal均可誘導(dǎo)MSCs發(fā)生衰老變化,并促使細(xì)胞內(nèi)衰老相關(guān)蛋白p53、p21和p16表達(dá)增加,細(xì)胞存活能力減弱,增殖能力降低,這可能與D-gal促使MSCs內(nèi)氧化應(yīng)激水平升高有關(guān)。10 g/L是D-gal誘導(dǎo)MSCs衰老的合適濃度。
【作者單位】： 浙江大學(xué)城市學(xué)院醫(yī)學(xué)院;杭州市第二人民醫(yī)院;
【基金】：杭州市科技發(fā)展計(jì)劃基金資助項(xiàng)目(20110833B11) 浙江大學(xué)城市學(xué)院大學(xué)生科研資助項(xiàng)目(X2013562118)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 干細(xì)胞具有自我更新及多向分化能力,對機(jī)體穩(wěn)態(tài)的維持和器官損傷的修復(fù)具有重要作用[1]。但干細(xì)胞和體內(nèi)其他細(xì)胞一樣,也會(huì)衰老,衰老干細(xì)胞增殖及分化能力減弱[2-3]。MSCs(mesenchymal stem cells,MSCs)可分化為中胚層的各種細(xì)胞且經(jīng)誘導(dǎo)能向神經(jīng)外胚層分化,是臨床細(xì)胞移植重

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本文編號(hào)：1305105