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HepG2.2.15細(xì)胞模型功能的重新評(píng)價(jià):分泌HBVDNA、cccDNA及血清學(xué)標(biāo)志物的動(dòng)態(tài)變化研究

發(fā)布時(shí)間:2017-12-18 15:19

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【摘要】:目的研究HepG2.2.15細(xì)胞分泌特點(diǎn)及動(dòng)態(tài)變化,建立穩(wěn)定的抗HBV藥物篩選平臺(tái)。方法采用微量細(xì)胞培養(yǎng)法培養(yǎng)HepG2.2.15細(xì)胞株,于第3、6、9、12、15d收集培養(yǎng)上清液,采用ELISA方法檢測(cè)preS1、HBsAg和HbeAg,采用Abbot試劑盒定量檢測(cè)HBVDNA,采用Roche熒光定量PCR試劑盒檢測(cè)HBVcccDNA。結(jié)果 HepG2.2.15細(xì)胞分泌preS1、HBsAg、HBeAg、HBVDNA的量隨著細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增加,其中HBsAg在第9d達(dá)到分泌高峰,其余均在第12d達(dá)到分泌高峰。HBVcccDNA在第9d檢測(cè)值仍為0,第12d時(shí)檢測(cè)值達(dá)24×103copies/ml。結(jié)論 HepG2.2.15細(xì)胞具有穩(wěn)定的分泌HBV病毒及相關(guān)抗原的生物學(xué)功能,是比較理想的病毒復(fù)制及抗HBVDNA藥物篩選的細(xì)胞模型。本研究所用細(xì)胞株及實(shí)驗(yàn)方法可靠、穩(wěn)定且重復(fù)性好,適用于抗HBV藥物篩選等研究。
【作者單位】: 北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)系和感染中心;
【基金】:國(guó)家‘十二五’艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治科技重大專項(xiàng)(No.2012ZX10002005-003-001)
【分類號(hào)】:R373
【正文快照】: 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)屬嗜肝DNA病毒科,可引起人類急慢性肝炎,其持續(xù)性感染與肝硬化及肝癌的發(fā)生密切相關(guān)[1],是一種嚴(yán)重威脅人類健康的病原體。全球約有20億人曾感染過(guò)HBV,其中約有3.5億~4億人為慢性HBV感染者[2]。我國(guó)是世界上HBV感染人數(shù)最多的國(guó)家,雖自19

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1 琦祖和 ,閻s,

本文編號(hào):1304643


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