整合素阻斷劑AP25單克隆抗體的制備與鑒定
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【摘要】:目的制備整合素阻斷劑AP25的單克隆抗體,鑒定其效價和特異性。方法從抗原免疫BALB/c小鼠分離免疫脾細胞,通過雜交瘤技術(shù)將免疫脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞SP2/0融合,篩選雜交瘤細胞株并進行擴大培養(yǎng)。采用小鼠體內(nèi)誘生法制備腹水,進行純化后得到抗AP25單克隆抗體,用ELISA和Western blot鑒定其效價和特異性。結(jié)果 ELISA檢測抗AP25單克隆抗體效價可達1∶2×106,Western blot鑒定抗體特異性良好。結(jié)論獲得了能夠高表達抗AP25單克隆抗體的雜交瘤細胞株;腹水制備抗體,純化后得到效價高、特異性良好的AP25單克隆抗體。
【作者單位】: 中國藥科大學生命科學與技術(shù)學院;
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃“863”項目(SQ2011SF11B02030)
【分類號】:R392
【正文快照】: 整合素蛋白是一類細胞黏附分子,在腫瘤新生血管生成過程中發(fā)揮重要作用,已成為腫瘤研究中的靶標分子之一[1-3]。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列是細胞外基質(zhì)與整合素受體黏附的通用識別位點[4-6],因此該序列被用于發(fā)展不同的整合素阻斷劑。整合素阻斷劑AP25是本實驗室設(shè)計
【相似文獻】
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