本文關(guān)鍵詞：普氏立克次體重組表面蛋白制備和免疫印跡抗原特異性分析

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【摘要】：目的克隆與表達(dá)普氏立克次體(Rickettesia prowazekii)主要蛋白抗原基因,分析所表達(dá)重組蛋白的抗原特異性。方法采用PCR法從普氏立克次體全基因組中擴(kuò)增其主要抗原基因,將擴(kuò)得的基因片段插入原核表達(dá)質(zhì)粒;將基因重組表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,用IPTG誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化菌表達(dá)重組蛋白。將普氏立克次體、莫氏立克次體、立氏立克次體、恙蟲(chóng)病東方體、黑龍江立克次體、貝氏柯克斯體等實(shí)驗(yàn)感染小鼠血清與重組蛋白做免疫印跡。結(jié)果經(jīng)過(guò)PCR擴(kuò)增后獲得9個(gè)目的基因片段,用其構(gòu)建出9個(gè)原核表達(dá)質(zhì)粒;9個(gè)原核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化菌均高效表達(dá)出相應(yīng)的重組蛋白;結(jié)果顯示FtsZ、GroEL、Rp828、EF-Ts等4個(gè)蛋白特異性最好,僅與普氏立克次體感染小鼠血清反應(yīng);其次是Omp,它除與普氏立克次體感染小鼠血清反應(yīng)外,僅與莫氏立克次體感染血清反應(yīng)。結(jié)論 FtsZ等4個(gè)重組蛋白為普氏立克次體的特異性抗原,可以作為研制流行性斑疹傷寒血清學(xué)診斷試劑的候選抗原。
【作者單位】： 中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)系;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所病 原生物生物安全國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所病原 生物生物安全國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家基礎(chǔ)研究計(jì)劃(973計(jì)劃課題2010CB530200/2010CB530205)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：R376
【正文快照】： 普氏立克次體(Rickettsia prowazekii)是流行性斑疹傷寒的病原體,普氏立克次體引起的疾病稱(chēng)為流行性斑疹傷寒(epidemic typhus)。流行性斑疹傷寒是一種急性傳染病,其臨床主要特征為起病急、 持續(xù)高熱和瘀點(diǎn)樣皮疹,常伴有劇烈頭痛、背痛,嚴(yán)重病人多有中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷癥狀。

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1300616