本文關(guān)鍵詞：抗HPV L1小鼠單克隆抗體及兔多克隆抗體的制備

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【摘要】：目的用人乳頭瘤病毒主要衣殼蛋白(HPV L1)C-末端保守序列多肽制備抗HPV L1單克隆及多克隆抗體,并對所制備的抗體的檢測能力進(jìn)行鑒定,同時比較其與購買的單克隆抗體的檢測能力。方法將HPV L1 C-末端一段30個氨基酸長度的保守序列多肽與載體蛋白KLH偶聯(lián),免疫小鼠及兔,制備抗多肽單克隆及多克隆抗體。分別采用ELISA、Western blot、免疫組織化學(xué)等方法檢測所制備的多肽抗體多種型別HPV L1的反應(yīng)性,并與市售的多價抗HPV L1單克隆抗體進(jìn)行比較,以確定多肽抗體的檢測能力。結(jié)果免疫小鼠及兔后得到的鼠單克隆抗體及兔多克隆抗體,其效價分別在1∶320 000以上及1∶64 000以上;用ELISA方法檢測3種抗體對HPV陽性細(xì)胞提取蛋白及L1重組蛋白的反應(yīng)性,均有陽性反應(yīng);用Western blot方法檢測抗體對HPV陽性細(xì)胞提取蛋白及L1重組蛋白的反應(yīng)性,均出現(xiàn)明顯條帶,但我們制備的鼠單克隆抗體與細(xì)胞提取蛋白未見明顯條帶;用免疫組織化學(xué)方法檢測HPV陽性細(xì)胞,3種抗體均呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。結(jié)論 HPV L1 C-末端保守序列可以誘導(dǎo)產(chǎn)生抗HPV L1單克隆或多克隆抗體,可以檢測出多型別的HPV L1,其檢測能力與市售的多價抗HPV L1單克隆抗體基本相當(dāng)。
【作者單位】： 三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院;三峽大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院婦產(chǎn)科;三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院婦產(chǎn)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30770104) 湖北省自然科學(xué)基金(2011CDC002)
【分類號】：R392
【正文快照】： 宮頸癌是導(dǎo)致女性死亡的第3大原因[1]。估計(jì)全球?qū)m頸癌患病率為11.7%,85%的宮頸癌發(fā)生在發(fā)展中國家。HPV感染在宮頸癌病變的發(fā)展中起著決定性的作用[2-3],其中高危型HPV尤其是HPV16、18與宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(cervical intraepithelialneoplasia,CIN)發(fā)生的相關(guān)性最為

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本文編號：1298298