本文關(guān)鍵詞：志賀菌誘導(dǎo)耐多藥相關(guān)基因抑制性消減雜交法篩選

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【摘要】：目的應(yīng)用抑制性消減雜交技術(shù)研究志賀菌誘導(dǎo)耐多藥株與其敏感株之間差異基因,篩選耐多藥相關(guān)基因,探討基因表達(dá)差異與志賀菌誘導(dǎo)耐多藥的相關(guān)性。方法以志賀菌誘導(dǎo)耐多藥株DNA為檢測子(tester),以其敏感株DNA為驅(qū)趕子(driver),構(gòu)建DNA消減文庫,采用PCR鑒定及斑點雜交進(jìn)行篩選,并隨機挑取陽性克隆測序,所得結(jié)果在GenBank中做同源性比較分析。結(jié)果成功構(gòu)建了志賀菌誘導(dǎo)耐多藥株的特異性DNA消減雜交文庫;選取部分陽性克隆進(jìn)行雜交篩選,獲得12個誘導(dǎo)耐多藥差異片段,對其中6個基因片段經(jīng)克隆測序并與GenBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行初步比對,3個未知基因可能為新基因,3個已知基因分別為16S rRNA核糖體基因、預(yù)測的rep蛋白質(zhì)(解螺旋酶)、位點特異性Ⅰ型脫氧核糖核酸酶(Hsds)等相關(guān)基因。結(jié)論志賀菌耐多藥是多基因參與的復(fù)雜過程,篩選的新基因片段為進(jìn)一步克隆其全長基因進(jìn)而研究其功能打下基礎(chǔ)。
【作者單位】： 鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病學(xué)教研室;河南科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)教研室;
【基金】：河南省醫(yī)學(xué)科技公關(guān)項目(WKJ2007-2-024)
【分類號】：R378.2
【正文快照】： 近年來,隨著抗生素廣泛使用甚至濫用,造成志賀菌菌株頻繁發(fā)生變異,產(chǎn)生耐藥株,且耐藥率高、耐藥產(chǎn)生速度快及范圍廣[1-2],給細(xì)菌性痢疾的防治帶來新的挑戰(zhàn)。因此,深入探討志賀菌耐多藥機制成為目前解決志賀菌耐多藥的先決條件。本研究于2011年6月,采用差異表達(dá)基因克隆技術(shù)抑

【參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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2 齊，

本文編號：1295109