發(fā)布時間：2017-12-11 21:28

  本文關(guān)鍵詞：NEP1-40基因修飾對神經(jīng)干細胞移植后存活和分化的影響

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【摘要】：目的探討NEP1-40(Nogo extracellular peptide residues 1-40)基因修飾對神經(jīng)干細胞(neural stem cells,NSCs)移植后存活和分化的影響。方法從孕18 d Wistar大鼠胚胎大腦皮質(zhì)中分離獲得原代NSCs并進行體外培養(yǎng)。采用慢病毒載體將NEP1-40基因?qū)氲?代NSCs內(nèi)完成NEP1-40基因修飾。將30只成年雌性SD大鼠在T9水平進行脊髓右側(cè)半切后隨機分為脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)組(B組)、NSCs移植組(C組)、NEP1-40基因修飾NSCs組(D組),每組各10只,傷后7 d在損傷局部分別植入NSCs基礎培養(yǎng)基、NSCs懸液及NEP1-40基因修飾的NSCs;另取10只SD大鼠僅行T9椎板切除設為假手術(shù)組(A組)。移植后8周,取損傷段脊髓組織行辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)神經(jīng)示蹤、巢蛋白(Nestin)免疫熒光染色及神經(jīng)絲蛋白200(neurofilament 200,NF-200)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic portein,GFAP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫組織化學染色,評價神經(jīng)纖維再生情況及移植細胞存活和分化情況。結(jié)果移植后8周,A、B、C、D組HRP陽性染色神經(jīng)纖維束分別為(85.17±6.97)、(12.17±2.79)、(33.58±5.47)、(59.25±7.75)個,B、C、D組顯著少于A組(P0.01);但C、D組顯著高于B組,D組顯著高于C組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。Nestin免疫熒光染色示,A組未見明顯Nestin熒光信號,B組僅可見少量散在熒光信號,C、D組有較強熒光信號。免疫組織化學染色定量分析示,NF-200陽性細胞數(shù)及MBP積分吸光度(IA)值A組最高,D組次之,C組較少,B組最少,組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);GFAP陽性細胞數(shù)B組最多,D組次之,C組較少,A組最少,組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);C、D組間NF-200、GFAP、MBP陽性細胞百分比比較差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論 NEP1-40基因修飾對NSCs移植后的分化無明顯誘導性,但能促進移植細胞存活、分化及神經(jīng)元軸突再生,為研究NSCs移植治療SCI提供了新思路。
【作者單位】： 四川大學華西醫(yī)院骨科;寧夏醫(yī)科大學附屬總醫(yī)院脊柱骨科;
【基金】：高等學校博士學科點專項科研基金資助項目(200806100060)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 神經(jīng)干細胞(neural stem cells,NSCs)移植是目前治療脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)的研究熱點[1],但單純NSCs移植后細胞存活率低,局部微環(huán)境中Nogo蛋白使新生軸突生長受到抑制,使NSCs移植療效大大受限[2]。NEP1-40(Nogo extracellular peptideresidues 1-40)多肽作為Nogo

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本文編號：1280009