HOXC4基因在斑馬魚早期胚胎發(fā)育過程中的表達
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【摘要】:目的探討HOXC4基因在斑馬魚早期胚胎發(fā)育過程中的作用機制,從而為進一步研究其在造血發(fā)育中的功能奠定基礎(chǔ)。方法提取斑馬魚總RNA,利用RT-PCR克隆得到HOXC4基因片段,將克隆得到的基因片段和載體pCS2+用限制性內(nèi)切酶BamHⅠ和XhoⅠ雙酶切后,把基因片段插入pCS2+中,重組質(zhì)粒經(jīng)雙酶切及測序鑒定后,采用T3RNA聚合酶體外轉(zhuǎn)錄體系制備地高辛標記的HOXC4基因反義mRNA探針,然后行全胚胎原位雜交。結(jié)果構(gòu)建HOXC4-pCS2+重組質(zhì)粒,獲得地高辛標記的反義mRNA探針并且完成其在野生型斑馬魚中的全胚胎原位雜交,顯示HOXC4基因在Tuebingen野生型斑馬魚神經(jīng)系統(tǒng)高表達。結(jié)論得到HOXC4基因在斑馬魚早期胚胎發(fā)育過程中的基本表達情況,為進一步研究該基因在造血發(fā)育過程中的功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 貴陽醫(yī)學(xué)院兒科教研室;貴陽醫(yī)學(xué)院組織工程與干細胞實驗中心;貴陽醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.30960412) 貴州省科技基礎(chǔ)條件平臺項目(No.[2009]4005) 貴州省優(yōu)秀科技教育人才省長專項資金(No.S2008-4)資助
【分類號】:R-331
【正文快照】: 同源盒(homeobox,HOX)基因,最初是在果蠅中發(fā)現(xiàn),具有同源結(jié)構(gòu)域,包含高度保守的180bp的序列,編碼60個氨基酸,對胚胎的發(fā)育具有重要的調(diào)節(jié)作用[1]。其中一些同源盒基因作為重要的轉(zhuǎn)錄因子,是轉(zhuǎn)錄的激活劑或抑制劑。爪蟾的HOX基因調(diào)控胚胎期的發(fā)育,影響其原始造血祖細胞的分化[2
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