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胎胰蛋白促進(jìn)人脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞向胰島素及C-肽陽性細(xì)胞的分化及細(xì)胞鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-12-04 07:04

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【摘要】:目的:利用大鼠胚胎胰腺組織蛋白提取物誘導(dǎo)人脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(hASCs)向胰島素分泌細(xì)胞分化,為臨床胰島移植尋找新的細(xì)胞來源。方法:將新生SD大鼠的胚胎胰腺勻漿后提取胎胰蛋白,重建胰腺微環(huán)境,誘導(dǎo)hASCs向胰腺方向分化。誘導(dǎo)組為胎胰蛋白培養(yǎng)組,對(duì)照組不添加胎胰蛋白,其余培養(yǎng)條件相同,誘導(dǎo)20d后,熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)2組胰腺發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)水平,ELISA法檢測(cè)細(xì)胞懸液胰島素水平,熒光免疫組織化學(xué)檢測(cè)細(xì)胞C-肽蛋白表達(dá)。結(jié)果:在胎胰蛋白誘導(dǎo)過程中,hASCs重要標(biāo)志基因Oct3/4及Nanog的表達(dá)持續(xù)降低,說明hASCs逐漸失去全能干細(xì)胞的特性;在誘導(dǎo)的第6天開始檢測(cè)到PDX-1和CK-19的表達(dá)上調(diào),誘導(dǎo)細(xì)胞出現(xiàn)了胰腺方向的分化,12d開始檢測(cè)到胰島素的陽性表達(dá)。所獲分化細(xì)胞基礎(chǔ)相分泌胰島素量為(287.17±15.67)mIU.L-1,高糖刺激下為(401.09±28.94)mIU.L-1,二者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且均明顯高于對(duì)照組的(4.85±1.04)mIU.L-1(P0.01);免疫熒光檢測(cè),誘導(dǎo)組可見C肽陽性細(xì)胞,對(duì)照組未見C-肽陽性細(xì)胞。結(jié)論:模擬的微環(huán)境可誘導(dǎo)hASCs分化為有功能的胰島素產(chǎn)生細(xì)胞,具有替代胰島細(xì)胞治療糖尿病的潛在可能性。
【作者單位】: 廣東省深圳市人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究中心;廣東省深圳市老年醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】:國(guó)家973計(jì)劃前期研究專題資助課題(2007CB516811) 廣東省深圳市重點(diǎn)科技計(jì)劃項(xiàng)目資助課題(200901001)
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: Edmonton方案之后,胰島移植成為最有希望治愈糖尿病的方法,但面臨移植物來源短缺和移植排斥反應(yīng)[1]。研究表明:干細(xì)胞可以表達(dá)多譜系mRNA,具有多譜系分化潛能,在特定微環(huán)境中可轉(zhuǎn)分化為相應(yīng)組織細(xì)胞。2001年Zuk等[2]首次從人脂肪組織中發(fā)現(xiàn)了大量類似于間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 肖娜;程臘梅;;間充質(zhì)干細(xì)胞在1型糖尿病治療中的應(yīng)用[J];國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志;2009年03期

2 豐干鈞;劉浩;;細(xì)胞移植進(jìn)行椎間盤退變修復(fù)的研究進(jìn)展[J];四川醫(yī)學(xué);2006年11期

3 卓本慧,李廷玉;間充質(zhì)干細(xì)胞與神經(jīng)細(xì)胞移植[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).腦血管疾病分冊(cè);2002年04期

4 何秀華;李東良;;骨髓干細(xì)胞治療肝病的研究進(jìn)展[J];國(guó)際消化病雜志;2010年03期

5 趙慶華;田紀(jì)偉;;椎間盤再生基于細(xì)胞的治療策略[J];中國(guó)矯形外科雜志;2011年05期

6 馬南;鐘z,

本文編號(hào):1250134


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